H5N1亚型禽流感病毒NA基因在Sf9昆虫细胞中的表达

【目的】在Sf9昆虫细胞中表达H5N1亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)神经氨酸酶(NA)基因。【方法】用PCR方法克隆H5N1亚型AIVNA基因,定点插入到转移载体pFastBacHTb中,构建重组转移载体pFastBacHTb-NA。将其转化到含有AcBacmid和helper质粒的E.coliDH10B感受态细胞中,与AcBacmid重组,获得rAcBacmid-NA。提取重组的Bacmid,转染处于对数生长期的昆虫Sf9细胞,获得重组杆状病毒vAc-NA。将vAc-NA重新感染处于对数生长期的昆虫Sf9细胞,3~5 d后收集被感染细胞。取转染细胞、感染细胞、破碎感染细胞上清和破碎感染细胞沉淀进行SDS-PAGE和Western-blotting分析。【结果】通过PCR成功地克隆了1 352 bp的H5N1亚型AIV不含信号肽序列的NA基因;pFastBacHTb-NA和rAcBacmid-NA构建成功。AIVNA基因在昆虫Sf9细胞内得到有效表达,表达产物分子质量约为52 ku,且具有免疫原性。【结论】H5N1亚型AIVNA基因在昆虫Sf9细胞中表达成功。     

外磁场作用下干细胞的磁化现象

描述了使用环境扫描电子显微镜观察活干细胞的显微图像，并通过不同制样方法得到了干细胞在外磁场作用下被磁化的图像，活的干细胞在外磁场的作用下能被磁化的特性是完全不同于其成年生物体的。     

鹿布氏杆菌病的诊治与预防

我市某养鹿场发生一起怀孕母鹿后期流产为特征的疾病。经诊断为鹿布氏杆菌感染,现报道如下。1流行情况2009年4~5月,该养殖场饲养的梅花鹿先后     

母体营养不良对子代发育影响研究进展

宫内胎儿发育迟缓是动物生产中最容易出现的问题,而营养不良是造成这一现象的主要原因.诸多研究表明,当母体缺乏蛋白质、氨基酸、脂肪酸、微量元素和维生素时,会影响到子代的生长性能及器官发育.论文对这几种营养物质缺乏时胎儿的表现进行了综述,以期为改善子代及幼畜的发育状况提供理论依据.     

施磷量及磷锌配施对夏玉米生长发育及籽粒产量的影响

为更好探索小麦/玉米一年两熟种植制度下,夏玉米施肥制度,实现夏玉米抗逆高产丰产。于2010年采用裂区设计,对施磷量及磷锌配施对夏玉米生长发育及籽粒产量的影响进行研究。结果表明：单施磷肥或磷锌配施促进夏玉米生长发育,增加干物质积累和次生根数,降低秃尖、改善穗部性状、提高抗病能,且配施效果优于单施磷肥。单施磷较对照增产幅度为7.70%~31.21%,配施增产15.99%~40.34%,磷锌配施较单施磷肥增产幅度达4.03%~8.73%。其中以施P2O5量在180 kg/hm2时配施15 kg/hm2硫酸锌,产量最高达9581.2 kg/hm2。经回归拟合,单施磷肥和磷锌配施的最佳施P2O5量分别为178.65 kg/hm2和203.49 kg/hm2,籽粒产量可达8823.0 kg/hm2和9499.61 kg/hm2。因此,在施氮基础上,配施磷或磷锌可促进夏玉米生长发育,实现高产抗逆高效栽培。     

甲壳动物CHH家族神经激素结构和功能研究进展

甲壳动物主要利用温度、光照周期等外界因子调节其生理状态 ,使它们的生殖活动处于最适条件下 ,来自外界因子的这些信息作用于甲壳动物的中枢神经系统 ,后者将其传递到神经内分泌系统和内分泌系统 ,神经内分泌系统和内分泌系统能够分泌一些促进因子和抑制因子以实施对性腺活动的调控。由于甲壳动物成体的生殖和蜕皮常常交替出现 ,因此 ,神经内分泌系统和内分泌系统的精确调控非常重要。甲壳动物高血糖激素 (ＣＨＨ)家族神经激素是甲壳动物特有的多肽激素 ,它们主要由眼柄的Ｘ -器官窦腺复合体合成 ,它们包括 :甲壳动物高血糖激素 (ＣＨＨ)、…     

fat-1基因密码子优化及在家兔胎儿成纤维细胞中的初步表达

根据家兔基因密码子使用偏好性,对引自GenBank的秀丽隐杆线虫fat-1基因编码序列进行密码子优化,通过全基因合成的方法获得优化后的fat-1基因(命名为opfat-1);从秀丽隐杆线虫中RT-PCR扩增获得fat-1.将扩增的fat-1和合成的opfat-1基因分别构建到绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP-C1中.采用脂质体LipofectamineTM转染法将fat-1和opfat-1基因转入家兔胎儿成纤维细胞(Rabbit fetal fibroblast cells,rFFCs)中.对比不同DNA和转染试剂用量以及细胞暴露于DNA、转染试剂中作用时间探讨影响rFFCs转染效率的参数,经过优化,最优的rFFCs转染条件为:LipofectamineTM用量2～3μl,DNA量0.8～1.0μg,LipofectamineTM与DNA、细胞共培养时间为8 h.通过绿色荧光标记和RT-PCR检测转染细胞中融合蛋白和目的基因的表达.密码子优化的opfat-1与fat-1相比,体外瞬时表达效率有极为显著的提高;G418抗性筛选获得转基因单克隆细胞,RT-PCR初步验证fat-1和opfat-1基因均在家兔胎儿成纤维细胞中稳定转录表达.     

点纹斑竹鲨晚期胚胎侧线系统的研究

通过阿利新蓝染色、石蜡切片和扫描电镜,对点纹斑竹鲨晚期胚胎侧线系统的分布、形态和表面结构进行了观察。结果表明,点纹斑竹鲨的侧线系统与多数软骨鱼板鳃类相一致,包括有机械感受功能的侧线管和陷器,以及有电感受功能的罗伦氏壶腹器。侧线管分布呈典型的“七管模式”,其内的管道神经丘位于侧线管内远离体表的一侧,由覆盖细胞、支持细胞和感觉细胞组成。陷器分布于背部两体侧线管之间,单个陷器位于两盾鳞间,深陷在真皮中,由1短管通向表面,管壁不规则,上段由表皮细胞组成,管深40~60 μm。罗伦氏壶腹器由管孔、罗伦管和罗伦瓮3部分组成,呈长颈瓶状,很多罗伦管都较长,从1 mm~50 mm 不等,管壁规则;罗伦瓮由7个罗伦小囊组成,每个小囊直径约50 μm。通过与其他软骨鱼类进行比较,点纹斑竹鲨的侧线系统分布和感受器结构不但印证了软骨鱼类的系统发育关系,同时也与其生活习性相适应。     

芬太尼术后镇痛对剖宫产产妇及新生儿的影响

目的:探讨剖宫产术后产妇应用芬太尼自控恒速静脉镇痛的镇痛效果,评价其对产妇及新生儿的影响。方法:选择剖宫产产妇60例,均自愿选择术后镇痛,随机分为自控恒速静脉镇痛组、自控恒速硬膜外镇痛组、直肠肛塞双氯芬酸钠栓镇痛组,每组20例。分别记录术后6hVAS评分、肠通气时间、新生儿72h后NBNA测定。结果:芬太尼静脉组的镇痛效果优于双氯芬酸钠组,但低于硬膜外镇痛组。各种术后镇痛方式对新生儿和产妇出院时间无明显影响。芬太尼静脉镇痛组能引起呕吐,嗜睡,甚至呼吸抑制。结论:在硬膜外镇痛失败或禁用硬膜外镇痛时,可考虑应用芬太尼静脉镇痛,同时慎用镇静药,以免引起呼吸抑制。     

LIF和IGF-1对牛胚胎干细胞分离的影响

比较了添加 L IF,IGF- 1和 L IF+IGF对牛胚胎干细胞 (ES)分离的影响。结果表明 :1添加10 ng/m L L IF能提高胚胎贴壁率 ,促进内细胞团 (ICM)和 ES细胞的增殖并抑制其分化 ;2添加 10 ng/m L IGF- 1既能提高胚胎贴壁率 ,又能使 ICM明显增殖的时间和传代后集落出现的时间提前 ;3添加 10 ng/m L L IF+10 ng/m L IGF- 1,可以同时发挥两种生长因子的作用效果 ,更有利于牛胚胎干细胞的分离。