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利用PCR介导的基因置换技术构建阿维链霉菌bkdF-突变株 总被引:3,自引:1,他引:2
PCR介导的基因置换技术是一种利用λ噬菌体Red重组系统在微生物中进行基因中断的新方法。实验利用该方法快速构建基因中断载体,并成功地置换了阿维链霉菌(Streptomyces avermitilis)bkdF基因。先合成1对长度分别为58和59nt的引物,其5’端的39nt序列分别与bkdF基因两侧同源,3’端则分别与安普霉素抗性标记盒(aac(3)Ⅳ+onT)两侧序列一致。以该引物扩增的PCR产物电转化能表达λRed重组酶且含有目标质粒的大肠杆菌(Eschcrichia.coli)菌株BW25113/pU790/pXW1224,获得了阳性重组质粒pXW1230。将该质粒中的大小为4.0kbBglⅡ目的片段插入基因置换载体pHZl35l,再接合转移至阿维链霉菌BJBM9903,筛选得到表型为Apma^RThio^S的接合子。PCR验证并对发酵产物进行HPLC和MS分析,证实该接合子为敞dkdF^-突变株。 相似文献
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采用组织化学方法对荆豆凝集素-1(ulex europaeus agglutinin-1,UEA-1)受体在发情周期和早期妊娠犬子宫内的分布以及激素调节进行了研究。结果显示,UEA-1受体主要存在于犬子宫内膜腔上皮和腺上皮,其表达量随妊娠阶段的不同而发生动态性变化。UEA-1受体在休情期犬子宫内未见表达,而在发情期犬子宫内膜腔上皮和腺上皮内的表达量很高。在早期妊娠犬子宫内,在妊娠第6天和12天犬子宫内的表达量较低,此后其表达量逐渐增加,在妊娠第17天时,UEA-1受体在子宫内膜腔上皮和腺上皮内的表达量达到峰值,此后其表达量又逐渐下降,在妊娠第23天时未见表达。注射雌激素可明显促进卵巢切除后犬子宫内膜UEA-1受体的表达。结果表明,犬子宫内UEA-1受体的分布与胚胎着床前胚胎与子宫内膜之间的黏附和植入有关,UEA-1受体在犬子宫内的表达受母体分泌的激素所调控。 相似文献
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本文综述了植物乙烯信号传导研究的进展,包括植物中的乙烯信号传导初始途径,乙烯信号感知和传导的可能机制,植物对乙烯不敏感性突变的分子基础,E8基因和乙烯受体,以及受体水平上的乙烯作用抑制剂等。 相似文献
947.
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本实验选用Arbor Acres父母代22周龄种母鸡144只种,公鸡18只,研究了28周末-33周末(试验前期)和33周末-68周末(试验后期)两个阶段种母鸡对α-生育酚的利用。试验前设置了6周的耗竭期,全部种鸡饲喂含α-生育酚较低的基础饲粮(3.47毫克/千克)。正式试验分6个处理,每处理4个重复共24只鸡。各处理在饲喂同一基础饲粮的基础上,分别添加α-生育酚0、5、10、20、40和160毫克/千克,依此,处理分为E_0、E_5、E_(10)、E_(20)、E_(40)和E_(160)。公鸡不分组。在33-66周期间共进行7次孵化实验,入孵种蛋3582枚,在22、28、 相似文献