富硒麦芽对肝癌间质微血管密度及癌细胞增殖的影响

将体重为120～150 g的清洁级SD雄性大鼠145 只随机分为4组:对照组(25只)、肝癌模型组(40只)、亚硒酸钠组(40只)和富硒麦芽组(40只).在对照组和模型组大鼠日粮中添加亚硒酸钠至硒含量达到饲养标准(0.1 mg·kg-1),在亚硒酸钠组和富硒麦芽组日粮中分别添加亚硒酸钠和富硒麦芽使硒含量均达到3.0 mg·kg-1.除对照组外,其余各组连续16周饮用含100 mg·L-1的二乙基亚硝胺(DEN)溶液以诱癌,然后改饮自来水至18周末.每组于4、8、12、16和18周时随机挑取5只大鼠断头处死,肝脏切片经增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组化染色后计数肝癌组织中PCNA阳性细胞并计算PCNA指数(PI);取第18周肝脏上的癌结节经第8因子相关抗原(FⅧ-Rag)抗体免疫组化染色后,计数肝癌组织中的新生微血管数目并计算微血管密度(MVD).结果表明:2个补硒组大鼠MVD值及PCNA阳性细胞数显著低于模型组;与亚硒酸钠组相比较,富硒麦芽组大鼠MVD值及PCNA阳性细胞数显著降低.上述结果提示:富硒麦芽较亚硒酸钠更能有效抑制肿瘤组织新生血管形成,从而更有效抑制肿瘤细胞增殖.     

MTT法测定8种中草药体外抗肝癌细胞SMMC-7721活性

［目的］建立一套适合于实验室高效、快速的体外抗肝癌活性物质筛选模型。［方法］通过MTT法,对芸香草、半边莲、蜜蒙花、甘草、地榆、柴胡、旱芹和莪术等8种中草药体外抗肝癌细胞SMMC7721的活性进行初测;描绘肿瘤细胞生长曲线,倒置显微镜观察细胞不同阶段的生长状况。［结果］受活性物质作用细胞尽管仍然贴壁,但萎缩,边缘清晰化,与生长状况良好的细胞形态有明显区别;浓度为1.0~1.5mg/ml的甘草乙醇浸提液（ESCG）、莪术乙醇浸提液（ESCC）和柴胡乙醇浸提液（ESCB）对体外培养的肝癌细胞SMMC7721有较强的抑制增殖作用,抑制率分别为51.6%、48.5%和52.9%,且抑制作用随着浓度的增加而加强。［结论］MTT法筛选可作为重要抗肿瘤的1个基本筛选模型。     

超声造影在肝癌射频消融治疗前后的应用价值

目的探讨超声造影技术在肝癌射频消融前后的应用价值。方法 56例肝癌患者接受射频消融治疗,于治疗前后采用超声造影技术对其中65个病灶进行造影超声检查。结果射频消融前,造影增强超声显示65个病灶表现为动脉早期抱球状、弥漫或轻度增强;治疗后病灶超声造影检查结果与MRI增强检查结果一致（Kappa〉0.70,P〈0.05）,明显优于常规彩超结果（Kappa〈0.40,P〉0.05）。结论超声造影可以帮助了解患者肝癌病灶的大小、数目和肿瘤血管等信息,有助于射频消融方案的制定及疗效的评估。     

槲寄生碱对人肝癌细胞株SMMC-7721 bcl-2mRNA表达的影响

为研究槲寄生碱对人肝癌细胞株SMMC-7721对bcl-2mRNA表达的影响。采用半定量RT-PCR法测定bcl-2mRNA表达变化。结果表明,RT-PCR检测SMMC-7721细胞中bc1-2、mRNA表达的相对强度,发现bc1-2mRNA的表达强度降低(P0.05)。说明中药槲寄生碱抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖作用与降低bcl-2mRNA表达水平有关。     

NDV、KLT及其联用时小鼠H22肝癌瘤组织的病理变化与TNF-α表达的研究

【目的】研究新城疫病毒(New Castle Disease Virus,NDV)、康莱特注射液(Kanglaite Injection,KLT)及NDV+KLT联用治疗肝癌肿瘤过程中,癌组织的病理变化以及肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)在肿瘤组织中的表达情况,探究TNF-α在抗肿瘤过程中的作用,为应用生物素治疗肿瘤提供一定的理论依据。【方法】建立小鼠H22肝癌肿瘤模型,将96只荷瘤小鼠随机均分成生理盐水对照组(0.8mL/只)、NDV治疗组(0.8mL/只)、KLT治疗组(0.5mL/只)及NDV+KLT联合治疗组共4组,分别在治疗后的4,8,12和16d取小鼠肿瘤组织制作2套石蜡切片,一套进行HE染色检测病理变化;另一套进行免疫组织化学SP观察TNF-α的表达情况。【结果】HE染色发现,与对照组相比,NDV组和KLT组都有明显的肿瘤生长抑制及肿瘤细胞坏死现象,特别是NDV+KLT联合治疗组的治疗效果显著;免疫组化研究结果表明,不同的治疗组TNF-α分布差异显著,其中NDV+KLT联合治疗组的阳性反应最强,其次是KLT治疗组。【结论】NDV和KLT的抗肿瘤作用与TNF-α细胞因子表达有一定的相关性,其中NDV+KLT联合治疗的抗肿瘤效果最好。     

DC和CIK免疫细胞及其在原发性肝癌治疗中的应用进展

树突状细胞(DC)是目前功能最强的免疫提呈细胞,能将抗原信息提呈给淋巴细胞,刺激初始T淋巴细胞,完成T细胞免疫应答的初始阶段。细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)是一种新型的免疫活性细胞,CIK增殖能力强,细胞毒作用强,具有一定的免疫特性。DC联合CIK细胞体外共同培养后回输体内疗法已成为当前治疗肿瘤的热点。现综述这一疗法在原发性肝癌中的应用。     

信号通路在肝癌发生过程中的作用及靶向治疗策略

肝癌是一种多病因参与、多阶段病变的复杂疾病。研究表明,参与调节机体重要生理过程的一些信号通路异常与癌变密切相关。该文综述了在肝癌发生过程中一些信号通路的异常现象,总结并分析了以信号通路为靶点的临床药物研究策略及未来发展方向。对这些信号通路作用机制进行深入细致了解将有助于寻找更为合适而有效的治疗靶点。     

沙棘提取物对癌细胞DNA、蛋白质合成及体内血浆中的cAMP含量的影响

采用同位素示踪技术和蛋白质结合法研究了沙棘汁和沙棘油的抗癌机理,结果显示：沙棘汁对L7712白血病、S110肉瘤、腹水型肝癌等细胞的DNA、蛋白质合成均无抑制作用。沙棘油浓度在0．005mg／L-1．0mg／L时对L7712白血瘸细胞DNA合成有抑制作用,且此时抑制率与浓度呈负相关,沙棘汁ip注射剂量为1／5LD50时,沙棘汁对小鼠血浆cAMP含量略有提高。     

富硒麦芽对二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌血管生成的影响

试验选择雄性SD大鼠100只,体重100~120 g,随机分成3组。试验Ⅰ组日粮中添加富硒麦芽（SEM）使硒含量达到3.0 mg/kg;试验Ⅱ组为模型组;试验Ⅲ组为阴性对照组,不诱癌不加SEM;试验Ⅱ、Ⅲ日粮中分别添加亚硒酸钠使硒含量达到0.1 mg/kg。试验Ⅰ、Ⅱ组饮水中添加100 mg/L二乙基亚硝胺（diethylnitrosamine,DEN）诱癌,维持DEN摄入量每天约10 mg/kg体重,连续16周,然后改饮普通灭菌水至18周末。试验Ⅲ组始终以普通灭菌水自由饮用。18周末,处死大鼠。利用免疫组织化学法分析大鼠肝肿瘤微血管密度（microvessel density,MVD）和血管内皮生长因子（VEGF）的表达。结果表明,SEM组MVD和VEGF表达较模型组显著降低。因此,表明SEM对肝肿瘤血管生成有抑制作用,下调VEGF表达可能是其抑制肿瘤血管生成的主要机理之一。     

MTT法测定8种中草药体外抗肝癌细胞SMMC-7721活性

[目的]建立一套适合于实验室的高效、快速的体外抗肝癌活性物质筛选模型.[方法]首先,选用乙醇为溶剂对芸香草、半边莲、蜜蒙花、甘草、地榆、柴胡、旱芹和莪术8种中草药植物材料进行浸提.然后通过MTT法对8种中草药体外抗肝癌细胞SMMC-7721的活性进行仞测.试验采用二甲基亚砜(DMSO)与甘氨酸-NaOH缓冲液作为溶剂,消除剩余培养基对吸光值的影响.为确保细胞株最大吸收峰位置不变,酶标仪采用570 nm波长测定OD值.为验证筛选出的3种物质对癌细胞的抑制作用,以活性物质浓度为横坐标,细胞生长抑制率为纵坐标,描绘肿瘤细胞生长曲线,倒置显微镜观察细胞不同阶段的生长状况.[结果]倒置显微镜下观察3种细胞阶段的形态:正常状态下,细胞的透明度大、折光性强、轮廓不清;当细胞受污染时,折光性变弱,胞质中常出现空泡、脂滴、颗粒样物质,细胞之间空隙加大,细胞变得不规则,失去原有特点;而受活性物质作用细胞尽管仍然贴壁,但其萎缩,边缘清晰化;三者之间存在一定区别.MTT法培养板定性检测显示,柴胡、莪术、甘草细胞培养孔内的液体颜色都较浅且比较均匀,可见,它们对细胞生长具有明显的抑制作用.而半边莲培养孔内液体颜色深浅不一.还有一些培养孔内液体颜色较深,如卤地菌、蜜蒙花、地榆和旱芹,表明它们对细胞生长没有明显的抑制作用.进一步定量计算表明,浓度为1.0～1.5 mg/ml的甘草乙醇浸提液(ESCG)、莪术乙醇浸提液(ESCC)和柴胡乙醇浸提液(ESCB)对体外培养的肝癌细胞SMMC-7721有较强的抑制增殖作用,抑制率分别为51.6%、48.5%和52.9%.甘草、柴胡和莪术3种物质的抑制作用曲线结果也验证了它们对细胞生长有明显的抑制作用,并且抑制程度与浓度呈正相关.[结论]MTT法筛选可作为重要抗肿瘤的1个基本筛选模型.