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旨在考察鼠源抗菌肽CRAMP的安全性、稳定性及其在清除铜绿假单胞菌生物被膜中的作用。采用兔血红细胞悬液的溶血性和小鼠腹腔巨噬细胞(RAW264.7)的细胞毒性考察CRAMP的安全性;采用不同温度、蛋白酶、金属离子和酸碱梯度对CRAMP抗菌活性的影响,考察其稳定性;通过在6孔细胞培养板中构建铜绿假单胞菌(PAO1株)成熟生物被膜,以人源抗菌肽LL-37和3种抗菌药为对照,采用结晶紫染色法检测生物被膜量,平板菌落计数法对生物被膜活菌数进行计数,苯酚-硫酸法结合Folin-酚试剂法检测生物被膜胞外基质含量,激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)观察CRAMP干预PAO1生物被膜形态学的变化。结果显示,CRAMP在所测试浓度下对兔血红细胞溶血率均<2%;在62.5~125 mg·L-1时对 RAW264.7没有细胞毒性。温度(25~100 ℃)、两种盐离子(Na+、K+)以及pH为5~10时对CRAMP的抗菌活性没有影响;胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶均不同程度影响了CRAMP的抗菌活性。6孔细胞培养板中,4倍MIC 的CRAMP极显著降低了PAO1生物被膜量(减少率为76.74%,P<0.01),极显著减少了生物被膜中的活菌数量(减少了1.2个CFU·mL-1,P<0.01),效果优于LL-37和3种抗菌药。CRAMP组的胞外基质显著低于空白对照组和LL-37组(P<0.05)。CLSM结果显示:与对照组相比较,4MIC浓度下,CRAMP组的细菌总荧光强度(PI+SYTO)显著低于空白对照组和LL-37组(P<0.05);与空白对照组相比,CRAMP组和LL-37组的死菌荧光强度/活菌荧光强度比值 (PI/SYTO)均极显著增大(P<0.01)。综上表明,CRAMP具有低溶血性、低细胞毒性,除蛋白酶作用不稳定外,具有较好的稳定性,对PAO1成熟生物被膜具有明显的清除作用,且效果优于LL-37,具有良好的药物开发前景。 相似文献
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荧光指示剂孵育法测定小麦叶肉细胞原生质体胞质游离Ca2+的变化 总被引:3,自引:0,他引:3
研究以孵育法将Ca^2 荧光探针Fluo-3AM载人小麦叶肉细胞原生质体胞质中,并结合激光共聚焦扫描显微技术,建立了测定原生质体胞质游离Ca^2 动态变化的试验方法。 相似文献
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耿国彪 《绿色中国(综合版)》2005,(10):22-29
2005年是中国“绿色地产年”,谈起绿色地产、绿色楼盘,不少人的头脑中立即就会反映出小区的绿化、花草树木与楼房的搭配和比例。把绿色理解成绿化的消费者不在少数.如果不是经过半个月的采访.就是记者本身也存在着相同的认识。“安得广厦千万间.大庇天下寒士俱欢颜”这是唐代大诗人杜甫对人需要居住的慨叹。时光过去了一千余年,人类仅需要遮风挡雨的草堂时代.早已成为了历史。现在人们不仅要求有房子住.而且要住的舒适惬意。而绿色建筑就是符合人们现代居住需求的房子。在2005“绿色地产年”接近尾声的时候.本刊记者用半个月的时间走访了相关的政府部门.建筑设计者、开发商以及消费者,对绿色建筑进行了一次全方位的调查。本期特别策划,我们汇集了记者、专家、开发商三方的见解,力图为读者立体地揭开绿色建筑的神秘面纱。 相似文献
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《辽宁畜牧兽医》2011,(2):19-20
2011年中央一号文件《中共中央国务院关于加快水利改革发展的决定》1月29日全文发布,这是新世纪以来连续第8个中央一号文件,是新中国成立62年来中共中央首次系统部署水利改革发展全面工作的决定。文件提出,水是生命之源、生产之要、生态之基。不仅关系到防洪安全、供水安全、粮食安全,而且关系到经济安全、生态安全、国家安全。文件提出,力争通过5年到10年努力,从根本上扭转水利建设明显滞后的局面。文件第一次将水利提升到关系经济安全、生态安全、国家安全的战略高度,这样的定位,是对我国基本国情和基本水情的准确把握,是对长期治水经验的提炼总结,是对水利发展阶段特征的科学判定,是我们党对水利认识的又一次重大飞跃,对统一全党思想、凝聚全社会治水兴水力量、加快水利发展与改革,必将起到巨大的推动作用、产生深远的历史影响。 相似文献
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