甘肃省某奶牛场肠杆菌性乳房炎主要病原菌的分离鉴定与耐药性分析

为查明甘肃省某奶牛场发生临床型奶牛乳房炎的主要病原菌并选择治疗用敏感药物,随机无菌采集了6份临床型病牛乳样和1份大罐乳样,采用划线分离、菌落形态观察、革兰染色镜检、生化鉴定及16S rDNA序列分析等方法进行细菌分离鉴定,同时采用K-B法测定主要分离菌株对抗菌药物的敏感性。结果表明,从临床型乳房炎乳样中分离鉴定出大肠埃希菌、芽胞杆菌、凝固酶阴性葡萄球菌(腐生葡萄球菌)3种细菌,其中大肠埃希菌的分离率最高,为66.67%;从大罐奶样中也分离出大肠埃希菌。药敏试验结果表明,大肠埃希菌对氨苄青霉素、阿莫西林、头孢噻吩、杆菌肽、红霉素均存在不同程度的耐药,耐药率为29%~100%;对诺氟沙星、恩诺沙星、氟苯尼考、头孢哌酮等药物敏感。说明此次牛场临床型乳房炎的主要病原菌是大肠埃希菌、葡萄球菌和芽胞杆菌,而且分离的大肠埃希菌具有多重耐药性。根据检测分析结果,给奶牛场提出针对性的防控措施,临床型乳房炎的发病率下降,病情得以控制。     

副猪嗜血杆菌同一质粒携带bla_(ROB-1)和aacA-aphD耐药基因

探讨1株副猪嗜血杆菌携带介导β-内酰胺类药物耐药基因bla_(ROB-1)耐药质粒的基因环境。抽提阳性菌的耐药质粒,采用电转法将耐药质粒转入DH5α,运用Southern blot确定耐药基因bla_(ROB-1)的位置,通过测序获得耐药质粒的基因组成结构。结果表明,该菌携带有2个质粒,其中1个质粒(p QY431-1)携带有耐药基因bla_(ROB-1),该质粒成功转入受体菌DH5α,转化子较受体菌对阿莫西林、头孢克洛、庆大霉素、卡那霉素以及阿米卡星的MIC分别提高了64倍、16倍、32倍、64倍和2倍。该质粒全长为7 777 bp,其基因环境由潜在的移动和复制区、一个截断的ISApl1插入序列、耐药基因aac A-aph D和bla_(ROB-1)组成。     

新疆部分地区生乳中金黄色葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析

【目的】探明新疆部分地区生乳中金黄色葡萄球菌流行情况及耐药性,为该地区生乳中金黄色葡萄球菌的监测及保障生乳质量安全提供理论依据。【方法】试验随机从南北疆规模化奶牛场采集110份生乳样品。采用增菌培养、分离纯化、革兰氏染色、生化鉴定及PCR法对奶样中金黄色葡萄球菌进行分离鉴定,并利用微量肉汤稀释法及PCR方法对金黄色葡萄球菌进行16种抗菌药物的耐药表型及耐药基因分析。【结果】从110份奶样中分离出18株金黄色葡萄球菌,分离株呈浅黄色、光滑凸起的圆形菌落,革兰氏染色镜检呈紫色、短链状排列的革兰氏阳性菌,生化试验结果符合金黄色葡萄球菌生化特点,经16S rDNA及nuc基因PCR扩增鉴定为金黄色葡萄球菌,分离率为16.36%(18/110)。药敏试验结果显示,金黄色葡萄球菌分离株对氨苄西林、青霉素及磺胺异噁唑具有较高的耐药性,耐药率分别为100%、83.33%和77.78%,而对万古霉素、复方新诺明、苯唑西林、头孢噻吩、头孢噻呋、利福昔明及环丙沙星7种抗菌药物高度敏感,敏感率分别为100%、100%、94.44%、94.44%、94.44%、94.44%和94.44%。其中有14株金黄色葡萄球菌为多重耐药菌,多重耐药率为77.78%。耐药基因检测结果显示,大环内酯类耐药基因ermB检出率最高,为50.00%,其次为β-内酰胺类耐药基因mecA,检出率为27.28%,磺胺类耐药基因Sul1的检出率为22.22%。【结论】新疆奶牛场生乳中分离的金黄色葡萄球菌的流行及耐药情况仍较严重,且存在多重耐药现象,因此,对生乳中金黄色葡萄球菌耐药性的监测有重要意义。     

杠板归对猪源大肠杆菌氟苯尼考耐药基因floR表达量的影响

为探索杠板归对猪源耐氟苯尼考大肠杆菌耐药基因floR表达量的变化,采用二倍稀释法测定杠板归59.92%乙醇提取物对大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC),同时测定提取物处理后氟苯尼考的MIC,利用荧光定量PCR法建立标准曲线检测耐药基因floR的表达量。结果发现,杠板归提取物对5株大肠杆菌的MIC介于2.48～9.64 g/L之间,氟苯尼考对亚抑菌浓度药物处理后的大肠杆菌MIC值可下降至76.76%,floR基因荧光定量PCR反应的线性回归方程为C_T=-3.02×lg拷贝数+28.77,r²=0.9 992,杠板归提取物对5株耐药菌floR基因表达量分别下降13.02%、10.00%、15.21%、10.25%和8.84%。试验结果表明提取物具有较好的耐药消除作用,对floR基因表达量有明显抑制作用,提示在中药提取物中寻找耐药性大肠杆菌floR基因抑制剂有一定前景。     

嗜麦芽窄食单胞菌感染与控制的研究进展

随着广谱抗生素的广泛使用,嗜麦芽窄食单胞菌的感染率不断增加,对嗜麦芽窄食单胞菌耐药机制的研究、如何减少耐药株的产生及寻找新的抗感染方法,已成为当前该领域最为关注的焦点。本文就嗜麦芽窄食单胞菌的微生物学特性及感染现状、耐药现状、耐药机制及控制策略作一综述。     

一株羊源致病性大肠杆菌分离鉴定

为了研究齐齐哈尔市周边某羊场羔羊发生腹泻的原因,通过对1例腹泻羔羊的粪便进行细菌分离鉴定、生化试验、K-B试纸法进行药物敏感性试验、菌体16S rDNA序列鉴定、动物致病性试验、耐药基因检测。结果从羔羊粪便中分离出一株细菌,菌落形态和生化试验结果与大肠杆菌相符,药物敏感性试验显示对头孢噻肟、头孢他定耐药,对四环素、环丙沙星中介,对阿米卡星、庆大霉素、氨苄西林敏感。扩增的16S rDNA序列片段大小约1 500 bp,与GenBank对比显示和序列号为NC＿054923.1的大肠杆菌同源性高达99.15%,将细菌接种于小白鼠体内24 h全部死亡,并检测到该大肠杆菌携带EBC耐药基因。为齐齐哈尔市羊源致病性大肠杆菌的研究提供了一定的依据。     

连云港周边海域副溶血性弧菌的污染及耐药性研究

为了了解江苏连云港周边沿海不同区域海水及海产品中副溶血性弧菌的分布情况并研究它们的毒性及耐药性,对连云港周边沿海不同区域海水及海产品中的副溶血性弧菌进行分离,并对检出菌株进行溶血性及耐药性检测.结果显示,菌株的检出率为78%;溶血素阳性率68%;文蛤的浸养感染率和死亡率为20%～30%;副溶血性弧菌对GN,SXT,TE,CAZ,CTX,CRO,CI,DO和NOR较为敏感,耐药率低于10%;对FR和AMP的耐药率在60%以上.说明连云港周边沿海不同区域海水及海产品中均存在副溶血性弧菌的污染,TRH型毒素分布较多,对海水养殖行业及人体健康具有潜在的影响.     

仔猪副伤寒的辨证论治

仔猪副伤寒也称猪沙门氏菌病。它是危害养猪业生产的主要疫病之一。近年来,该病在有些地方时有发生,常呈散发或地方性流行,由于耐药菌株的不断出现,在临床上使用土霉素等抗生素疗效较差,给养猪户造成了较大的经济损失。借鉴吴鞠通《湿病条辩》之理法,指导仔猪副伤寒的临床辨证,组     

生猪废水处理和磷回收工艺中抗生素和耐药细菌的削减特征

调查生猪废水处理和磷回收工艺中,厌氧消化、氧化池、磷回收流化床和潜流人工湿地对水质参数、抗生素、耐药细菌和病原菌丰度削减的贡献。结果表明,在水质指标方面,厌氧消化对COD的去除率最大,为40.28%;人工湿地对TP和NH_4~+-N的去除率最大,分别达到53.33%和67.74%;流化床对TP的去除率为49.94%。在抗生素吸附和降解方面,厌氧消化、流化床和人工湿地对土霉素(OTC)和环丙沙星(CIP)具有较大幅度的去除,去除率范围分别为32.27%～63.77%和40.44%～44.11%;厌氧消化、氧化池和人工湿地对磺胺二甲嘧啶(SM2)具有中等幅度的去除,去除率范围为18.10%～28.52%。在耐药细菌方面,厌氧消化作为一级处理工艺对各类型耐药细菌均具有最大去除率(50%);同样作为三级处理工艺,人工湿地能进一步削减耐药细菌的数量,而流化床出水中以奇异变形杆菌、鼠伤寒沙门氏菌和宋内氏志贺氏菌为主的耐药细菌数量出现反弹。微生物群落分析发现,人工湿地在降低病原细菌丰度方面优势显著。研究表明,设置潜流人工湿地承接流化床出水可进一步深化处理生猪废水。     

畜禽养殖业中磺胺类药物对农田土壤的影响及降解措施研究进展

磺胺类药物在畜禽养殖业被广泛使用,大部分以原型药物或代谢物的形式随尿液和粪便排到体外,并随着粪污加工成的肥料进入农田土壤中。磺胺类药物可在农田土壤中长期存在,发生迁移和转化,对土壤中的微生物、植物等造成影响。此外,土壤中残留的磺胺类药物增加了对细菌和耐药基因的选择压力,导致耐药性细菌和耐药基因的富集与扩散,威胁公共卫生安全。目前利用生物降解法、高级氧化工艺法、人工湿地法、生物电化学系统法和膜生物反应器法等可实现对畜禽粪污中磺胺类药物的有效降解。笔者简要概述了磺胺类药物对农田土壤环境造成的影响,以及粪污中磺胺类药物的降解方法研究进展,以期为今后畜禽粪污磺胺类药物降解提供理论依据。