紫花苜蓿MsSQE1的克隆及对皂甙合成的功能分析

【目的】鲨烯环氧酶（squalene epoxidases,SQE）是苜蓿皂甙合成途径中的一种限速酶,与苜蓿皂甙的合成密切相关。通过对苜蓿鲨烯环氧酶（MsSQE1）基因的克隆及在苜蓿中过表达,探究鲨烯环氧酶对皂甙合成的作用机制。【方法】以模式植物蒺藜苜蓿鲨烯环氧酶基因序列设计引物,同源克隆苜蓿MsSQE1。对MsSQE1进行生物信息学分析;通过基因枪轰击技术,使MsSQE1在洋葱表皮瞬时表达,进行亚细胞定位。利用qRT-PCR方法分析该基因在根、茎、叶中的表达水平,以及在紫外辐射、ABA和GA₃条件下的表达模式。在茉莉酸甲酯（MeJA）的诱导下,分析MsSQE1的转录水平,及对苜蓿皂甙含量的影响。利用根癌农杆菌转化体系,获得过表达MsSQE1的阳性转基因植株,并测定转基因植株的皂甙含量。【结果】克隆了MsSQE1的cDNA序列,开放阅读框1 578 bp,编码525个氨基酸,等电点为8.59。同源性比对分析,其氨基酸序列与蒺藜苜蓿中SQE1氨基酸序列同源性为98.6%,与拟南芥的同源性为80%。亚细胞定位显示,MsSQE1可能定位于细胞膜。组织特异性表达分析显示,MsSQE1在叶中的表达量最高,茎中次之,根中的表达量最低。在紫外辐射、ABA和GA₃的诱导表达显示,紫外辐射诱导24 h,叶中表达量最高; GA₃（50 μmol·L ^-1）和 ABA（100 μmol·L ^-1）处理,均为8 h叶中表达量最高;MeJA处理能诱导MsSQE1表达量上调的同时苜蓿总皂甙含量也随着MsSQE1表达的上调而增加。分析过表达MsSQE1转基因苜蓿和转空载体苜蓿株系发现,MsSQE1的表达水平和总皂甙含量均升高,其中MsSQE1的表达水平是对照的3.11—9.45倍,总皂甙含量比对照提高14.26%—28.05%,暗示MsSQE1是苜蓿皂甙合成途径中的一种关键调节酶。【结论】从豆科牧草紫花苜蓿中克隆了MsSQE1并进行功能分析。在苜蓿中过表达MsSQE1能增加苜蓿总皂甙含量,暗示MsSQE1的表达影响苜蓿皂甙的生物合成,可能对皂甙的合成有重要的调节作用。     

几个水稻同核异质雄性不育系育性遗传的比较研究

本文分别以花粉可育率和田间结实率为指标，采用保持系（ｐ１）×恢复系（ｐ２）杂交组合的六个群体及Ｐ１、Ｐ２、Ｆ１、Ｆ２、Ｂ１（Ｆ１×ｐ１）和Ｂ２（Ｆ１×ｐ２），分别与不育系测交的方法，对三个同核异质雄性不育系的育性遗传进行了分析和比较，其结果表明：（１）恢复系为古２２３时，以花粉可育率和田间结实率为指标，Ｄ汕Ａ、Ｇ汕Ａ和Ｗ汕Ａ三个不育系的雄性不育及其育性恢复均受两对独立主效基因的控制；（２）恢复系为ＩＲ２４时，以花粉可育率为指标，Ｄ汕Ａ和Ｗ汕Ａ雄性不育及其育性恢复均受三对主效基因的控制，其中一对独立，两对连锁，交换值为２５％；而Ｇ汕Ａ的雄性不育及其育性恢复仍受控于两对独立主效基因。以田间结实率为指标，该三个不育系的雄性不育及其育性恢复均受两对独立主效基因的控制。     

西南地区立枯丝核菌菌丝融合群及其生态学研究

从川、滇、黔、藏的代表地区，采集植物及土壤样品８１２份，分离出具丝核菌特征的菌株３６１株。根据菌丝细胞宽度，细胞核数目等，鉴定出立枯丝核菌（ＲｈｉｚｏｃｔｏｎｉａｓｏｌａｎｉＫｕｈｎ）２２９株，双核丝核菌１３２株。将立枯丝核菌分离菌与已知融合群菌株分别配对进行菌丝融合试验，结果有２０７株分属于ＡＧ－１，ＡＧ－２，ＡＧ－３，ＡＧ－４，ＡＧ－５，ＡＧ－６，ＡＧ－７７个菌丝融合群。其中ＡＧ－４频率最高（６７．７），ＡＧ－１次之（２２．７）。ＡＧ－６，ＡＧ－７为我国首次记录。还有２２株不与现有已和融合群发生融合。立枯丝核菌在西南地区地理分布很广，寄主或基物种类多。在海拔３００－３７６０ｍ的高度范围及ｐＨ５－８的土壤中都有发现，但在３００－１０００ｍ的高度，ｐＨ６－７．５及０－１０ｃｍ的土壤中分布更丰富。季节变化对土壤中主要融合群的分布无显著影响。     

子叶与外施蔗糖对豌豆幼苗生长及插条生根的影响

将豌豆（ＰｉｓｕｍｓａｔｉｖｕｍＬｉｎ．）种子播种在纯石基质中，于４０μｍｏｌｍ~（－２）Ｓ~（－１）光强、１６小时光周期和２２℃恒温条件下发芽和幼苗生长。分别于播种后４—１１天除去子叶。取１１天苗龄的插条在水培营养液中诱导生根。结果表明：幼苗高度、第三节长度、鲜重及干重均随去子叶的时间推迟而显著增加，插条生根力随幼苗生长量的增加而提高。去子叶后幼苗外施蔗糖表明：第５天去子叶的，幼苗高度和第三节长度随蔗糖浓度升高而明显增加，但过高的蔗糖浓度（４．０％）显著降低幼苗第三节长度，插条根量在２．０％蔗糖的浓度下最高。第８天去子叶的，幼苗外施蔗糖的效果显著高于未施蔗糖的，但不同蔗糖浓度间差异不明显。第５天去子叶的插条根量在０．５—０．７％的蔗糖生根液中显著高于其它处理，但平均根长度以０．９％的蔗糖浓度最高。第８天去子叶的，插条根量在０．３％蔗糖生根液下最高，平均根长随蔗糖浓度升高（０—０．９％）而显著增加。本文就子叶与外施蔗糖对豌豆生长及插条不定根形成的影响进行了讨论。     

四面山大窝铺常绿阔叶林特征研究

江津县四面山的常绿阔叶林，是四川省常绿阔叶林的重要组成部分，四面山大窝铺的常绿阔叶林又是江津县四面山的原始森林保护区。本文从植被环境、区系组成、外貌特征、群落结构、群落演替等方面对这片森林进行了调查研究，对于如何合理开发、利用、改造、保护植被资源将提供有价值的科学依据，对于进一步深入研究四川植被也有一定的意义。     

青稞籽粒灌浆特性研究

对三个青稞品种（系）籽粒灌浆特性进行观察和分析，结果表明相同栽培条件下裸大麦籽粒干物质积累过程与品种有关，其中两个品系籽粒干物质积累过程符合“S”型曲线变化，而另一个品种籽粒干物质积累出现“双高峰”现象。裸大麦籽粒体积和水分含量变化呈抛物线。抽穗后20-30d是裸大麦产量形成关键时期，籽粒含水量相对平稳，籽粒干物质积累量约占粒重的75％。各个地区应因地制宜选用适宜品种及相应的栽培技术措施来获得青稞高产。     

活性氧(ROS)对小鼠早期胚胎染色体数目的影响

小鼠体内发育的囊胚、扩张囊胚和从1-细胞期取出在CZB培养液中培养的囊胚、扩张囊胚的染色体数目分别是39．00，38．43和42．47，39．56．经统计分析。体内与体外CZB培养的染色体数目无显著性差异．体外CZB培养的不同时期添加外源性H2O2，发育至囊胚、扩张囊胚阶段，制作胚胎标本，观察胚胎的染色体数目．结果显示：扩张囊胚的0～72h组的染色体数目与对照组的染色体数目有显著性差异（P〈0．05），而其它各发育阶段的各处理组染色体数目之间均无显著性差异．说明经H2O2处理之后存活下来的胚胎与正常体外发育的胚胎染色体数目没有差异．     

面团流变学特性分析方法比较及与烘烤品质的通径分析

选用27个筋力不同的小麦品种(系)为材料，研究了粉质仪、拉伸仪及揉混仪所获得的面团流变学特性指标间的相互关系，并通过逐步回归分析和通径分析，就11个面团流变学特性指标对面包加工品质影响力的大小及直接效应与间接效应进行研究。结果表明，3种不同测定方法的主要参数间存在极显著的相关性，其中粉质仪测定的形成时间、稳定时间、粉质质量指数，拉伸仪测定的拉伸面积、最大拉伸阻力、最大拉伸比，揉混仪测定的和面时间和8min尾高各指标间均呈显著或极显著正相关。这些指标直接或间接的影响面包的加工品质，其中最主要的因素为面团稳定时间、最大拉伸阻力、和面时间及粉质质量指数。     

卵穗山羊草和柱穗山羊草与普通小麦属间杂种的产生及其育性比较

分别以卵穗山羊草和柱穗山羊草为母本,以普通小麦为父本杂交,将获得的杂种再进行回交和自交,对其育性进行比较研究.结果表明,不同的种或品种做母本其可交配性表现不同,卵穗山羊草的结实率(14.10%和11.96%),比柱穗山羊草高(2.13%和8.47%).杂种胚产生愈伤组织率和幼胚直接成苗率不同.柱穗山羊草/小麦杂种胚愈伤组织诱导率高于杂种胚.卵穗山羊草/小麦的直接成苗率高于柱穗山羊草/小麦.卵穗山羊草/小麦用小麦回交的结实率为3.71%;柱穗山羊草/小麦用小麦回交未结实.卵穗山羊草/小麦自交也能结实,自交的结实率为0.044%,柱穗山羊草/小麦杂种自交没有结实.卵穗山羊草/小麦杂种的育性较柱穗山羊草/小麦杂种强,卵穗山羊草基因通过杂交向小麦转移比柱穗山羊草更容易.     

鸭疫里默氏杆菌的分离与鉴定

对武汉周边地区的病鸭进行了病理剖检及细菌分离培养,并对分离的菌株进行了生化鉴定,最后确定此病为鸭疫里默氏杆菌(Riemerellaanatipestifer,RA)引起的。感染鸭为2～6周龄,RA易在病死鸭的肝脏、脾脏、血液等处分离到,特别是在脑组织中极易分离。该分离菌株的血清型鉴定结果为Ⅰ型RA,药敏试验结果显示对诺氟沙星高度敏感。