利用CRISPR/Cas9和λ-Red级联技术构建产肠毒素大肠杆菌LT敲除菌株

本研究旨在利用CRISPR/Cas9和λ-Red级联的技术对产肠毒素大肠杆菌（enterotoxigenic Escherichia coli，ETEC）K88的热不稳定性肠毒素（heat-labile toxin，LT）基因进行无痕敲除并获得K88 LT^-缺陷菌株。通过序列比对获取LT两端同源序列，并构建包含LT边界、氯霉素筛选标记、sgRNA和LT同源臂的供体片段；将供体片段转化至ETEC K88，同时分别利用λ-Red同源重组系统和CRISPR/Cas9基因编辑系统，对LT基因进行敲除；通过PCR验证获得了K88 LT^-缺陷菌株，并通过试验测定了敲除菌株的溶血能力和生长曲线。结果显示，λ-Red同源重组系统可成功地将LT基因替换为相应的供体片段，CRISPR/Cas9基因编辑系统可高效地对筛选标记进行删除，最终通过λ-Red和CRISPR/Cas9结合的基因编辑系统可成功对ETEC K88的LT基因进行无痕敲除。体外试验结果表明，K88 LT^-缺陷菌株的溶血能力丧失，并且生长速度比野生型菌株减缓，LT可能和ETEC K88的致病能力和生长性能有关。表明λ-Red和CRISPR/Cas9级联的基因敲除方法可用于LT毒素基因及其他一些大肠杆菌基因的敲除。K88 LT^-缺陷菌株的构建为下一步研究LT毒素的致病机制奠定基础。     

生物防治引领绿色养殖--上海高科生物工程有限公司亮相行业新闻发布会

2014年5月18～20日，第十二届（2014）中国畜牧业博览会在山东青岛举办，展会期间，主办方同期举办了猪业专场、综合（饲料、动保、设备）专场等系列新闻发布会，行业内优秀的企业和媒体代表受邀出席了发布会。为充分展示企业形象，增进与媒体之间的相互了解，上海高科生物工程有限公司董事长陆婉英女士出席了综合（饲料、动保、设备）专场新闻发布会，并在发布会上介绍了旗下全资子公司昆山博青生物科技有限公司的概况及发展愿景，同时针对记者的提问作出了精彩的回答。     

依托科技创新 助推“绿色植保”

绿色植保就是把植保工作作为人与自然界和谐相处的重要组成部分,从而保障农业的高产和安全性。本文中主要根据现状,依托科学技术,积极的推进绿色植保工作。保障农业的生产和产品的质量安全。     

一例奶牛生产瘫痪的诊治体会

生产瘫痪又称乳热症,中兽医称为产后风,是奶牛在分娩前后突然发生的一种急性低血钙症.病牛主要临床特征是精神沉郁、肌肉无力、四肢瘫痪、卧地不起、知觉丧失、体温下降,消化道麻癖及血钙降低,少数病牛发生瘤胃臌气,此病常发生在3～5胎次的高产乳牛,产后48h多发,但二产奶牛在72h后也有发病.     

青岛世园会夜场别具风情

<正>在青岛世园会夜场,游客可欣赏到五彩斑斓的灯光大戏。园区夜景灯光渲染以"春华秋实"为主题,突出展现绿色照明和智能设计两大特色。灯具全部采用节能灯具,亮化采用远程控制技术,设置照明模式、平日模式和节庆模式,可随时随意开启、关闭和切换。     

反转录病毒载体介导的EGFP基因在SP2/0小鼠骨髓瘤纽胞中的表达

为了构建携带报告基因增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的反转录病毒载体,并观察EGFP基因在SP2/0小鼠骨髓瘤细胞中的表达情况.试验将增强型绿色免疫荧光基因片段定向插入反转录病毒载体pFB-neo,获得重组反转录病毒质粒pFB-NE,利用三质粒共转染系统,将含有目的基因的重组反转录病毒质粒pFB-NE以及含有辅助病毒...     

水产调味品鲫鱼汁的研制

随着人们生活水平的提高,对食品质量的要求也在不断的提高,调味品在食品质量中扮演着非常重要的角色。本实验以普通养殖鲫鱼为主要原料,研究水产调味品鲫鱼汁的最佳工艺。通过正交试验和感官评价,最终得到水产调味鲫鱼汁的最佳配方:黄原胶0.04%,鲫鱼汁30%,盐15%,糖5%,谷氨酸钠5%,5′-肌苷酸0.25%,叶黄素0.03%,鱼味香精0.03%,山梨酸钾0.05%,均质压力35MPa。水产调味品鲫鱼汁质地均匀,口感细腻,鱼鲜风味突出,色泽淡黄,气味芬芳,符合人们对于风味和营养的需求,具有广阔的市场前景。     

准噶尔盆地东南缘绿洲-荒漠交错带土壤跳虫群落特征研究

为了解准噶尔盆地东南缘绿洲-荒漠交错带土壤跳虫群落结构特征及其变化,在2011年4、7、9和11月中旬对该交错带胡杨林、防护林、荒草原、灌木林、荒漠、菜瓜地及耕地等7种典型生境土壤跳虫群落特征进行比较研究。结果表明,共获得土壤跳虫2487只,隶属于4目10科17属。其中球角跳属Hypogastrura、伪亚跳属Pseudeachorutes、棘跳属Onychiurus、等节跳属Isotoma为优势类群,占总数的64.58%。长跳属、驼跳属、原等跳属等10个属为常见类群,占总数的33.26%。小圆跳属、短角跳属、疣跳属为稀有类群,占总数的2.16%。绿洲-荒漠交错带不同生境土壤跳虫群落组成、个体数以及不同季节间存在显著差异(P<0.05),其中个体数依次为胡杨林>防护林>灌木林>耕地>荒草原>菜瓜地>荒漠。不同季节土壤跳虫个体数顺序为夏季>春季>秋季>冬季。研究表明不同生境土壤湿度、植被类型及人为干扰程度是影响该交错带跳虫群落结构的主要因素。     

蛋鸭产蛋下降综合征的原因及其防治

随着鸭蛋越来越受到人们的欢迎,蛋鸭养殖的数量也越来越多。在蛋鸭养殖过程中,养殖户应该加强鸭群的饲养管理,预防产蛋量下降,提高养殖经济效益。本文主要介绍了蛋鸭产蛋下降综合征产生的原因与防治,供广大养殖户参考。     

设施草莓病虫害绿色防控技术规程

从设施草莓病虫害防治原则与策略、产地要求、防治方法等方面阐述了赣榆区设施草莓病虫害的绿色防控技术,为设施草莓的优质安全生产提供理论依据和具体操作规程。