转染抑癌基因PTEN对人乳腺癌ZR-75-1细胞的细胞周期和增殖能力的影响

目的：观察PTEN（phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten，第10号染色体上磷酸酶和张力蛋白同源缺失的基因）对人乳腺癌细胞ZR-75-1细胞增殖和细胞周期的影响。方法；利用脂质体介导法将携带有野生型和突变型PTEN cDNA的真核表达载体pBP—wt—PTEN和pBP—G129R—PTEN导八人乳腺癌ZR-75-1细胞（质粒转染成功后实验分为C—WT—PTEN组、CG129R—PTEN组和未转染质粒组即对照组）后，以RT—PCR、Western blot分析目的基因的表达，并采用MTT法和流式细胞术检测细胞增殖和细胞周期。结果：C—WT—PTEN组、C—G129R—PTEN组细胞PTEN mRNA及PTEN蛋白出现明显的高表达。C—WT—PTEN组细胞生长的抑制率可高达42．7％，与对照组比较．差异有显著性（P〈0．05）。但C—G129R—PTEN组细胞生长的抑制率与对照组比较，差异无显著性（P〉0．05）。流式细胞术显示C—WT—PTEN组细胞周期从G1期到S期已发生抑制。结论：野生型PTEN可依赖其磷酸酶活性抑制肿瘤细胞的增殖,并最终诱导细胞凋亡。     

猪ZAR1基因变异及其对产仔数的影响

根据合子阻滞因子1(zygotearrest 1,ZAR1)基因GenBank的DNA序列(DQ231443,gi:83727928)设计2对引物,用直接测序和PCR-SSCP相结合的方法,进行单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)检测,分析该基因在5个品种猪(小梅山、清平、杜洛克、长白和大白)中变异特征及其与产仔数的相关性。测序后在内含子2、3和外显子3中存在6个SNP及在内含子3中存在1处5bp的插入/缺失变异。在5个品种猪群中,对外显子3中的第54碱基处C→T突变(Exon3-BstUⅠ)和内含子3中的5个碱基插入/缺失的变异(Intron3-TspRⅠ)进行了PCR-RFLP检测,并与产仔数进行了关联分析,结果表明,Exon3-BstUⅠ多态对杜洛克母猪第1胎和2胎总产仔数产生显著(P<0.05)影响,对经产母猪总产仔数产生极显著(P<0.01)影响,对经产母猪的产活仔数影响极显著(P<0.01),携带CC基因型母猪的产仔数均高于TT基因型的;Intron3-TspRⅠ多态对杜洛克母猪第1胎和经产胎次总产仔数和产活仔数有显著(P<0.05)影响,NN基因型高于MN和MM基因型的产仔数。     

胰岛素信号调控昆虫滞育的研究进展

昆虫滞育是由遗传和环境因子共同作用,导致生长发育停滞的一种重要的生态适应策略;是一个复杂的多基因参与,受多条信号通路调控的独特的发育和生理过程。作为进化上保守的信号通路,胰岛素信号对滞育昆虫的寿命、细胞周期、代谢、能量物质积累和抗逆性等方面具有重要的调控作用。因此,研究胰岛素信号对滞育诱导、滞育维持以及滞育解除的调控作用将有利于揭示昆虫滞育多样化的分子机制,进而为农业害虫的防治提供新的解决思路。本文通过总结胰岛素信号参与昆虫滞育调控的研究进展,为昆虫类胰岛素功能和昆虫滞育的分子调控机制研究提供参考。     

α-三联噻吩对斜纹夜蛾SL细胞线粒体膜电位及细胞周期的影响#br#

【目的】研究α-三联噻吩（α-T）对斜纹夜蛾（Spodoptera litura）SL细胞线粒体膜电位及细胞周期的影响。【方法】通过Rhodamine123染色和流式细胞术（flow cytometry,FCM）研究α-T处理SL细胞24 h和48 h后细胞线粒体膜电位的变化,并通过PI染色和FCM,测定α-T处理SL细胞24 h和48 h后细胞周期各时相百分率的变化。【结果】光活化后的α-T处理SL细胞24 h后,0.0625 μg&#8226;mL-1浓度和0.1250 μg&#8226;mL-1浓度处理组细胞线粒体膜电位的变化幅度不大,而0.5000 μg&#8226;mL-1浓度处理组细胞线粒体膜电位明显升高,48 h后高浓度处理组（1.0000 μg&#8226;mL-1）导致线粒体膜电位明显去极化;处理24 h后,低浓度（0.0625 μg&#8226;mL-1）处理组细胞被阻滞于S期,而高于此浓度的光照处理组细胞被阻滞于G2/M期,48 h后,浓度≤0.1250 μg&#8226;mL-1的光照处理细胞被阻滞于G2/M期,而浓度＞0.1250 μg&#8226;mL-1的光照处理组细胞被阻滞于S期。【结论】SL细胞经α-T处理后,细胞处于一系列复杂的动态变化中。当细胞本身不能扭转ROS造成的氧化损伤时,细胞线粒体膜电位和细胞周期时相即出现较大幅度的变化,这种变化决定着细胞的受损程度和细胞的死亡途径。     

输卵管上皮细胞共培养促进小鼠早期胚胎发育机理的探索

为研究输卵管上皮细胞对小鼠早期胚胎发育质量及胚胎对共培养细胞活力和基因转录量的影响,探索输卵管上皮细胞共培养促进小鼠早期胚胎发育的机理,建立纯化的小鼠输卵管上皮细胞系并对合子进行共培养,用DCHFDA测定胚胎内部的H2 O2含量,以MTT法测定输卵管上皮细胞活力,用RT-PCR检测CAT及GPX的转录状况.结果表明:1)共培养能够提高2-细胞早期、4-细胞期胚胎发育率(0.951 3％ VS 0.903 3％,0.857 6％ VS0.700 5％,P＜0.05)和囊胚发育率(0.537 9％ VS 0.573 3％,P＞0.05);2)2-细胞早期胚胎内部的H2 O2含量显著降低(0.047 9 VS 0.068 2,P＜0.05);3)Ⅰ和Ⅱ型阻滞胚胎的比例降低(0.158 3％ VS 0.192 6％,0.213 3％ VS0.433 9％,P＞0.05),Ⅲ型阻滞胚胎的比例提高(0.621 6％ VS 0.373 3％,P＜0.05);4)共培养细胞活性上升(0.216 7 VS0.195 7,P＞0.05);5)CAT及GPX的转录量增加(1.202 0 VS0.984 9,1.310 1 VS 0.998 3,P＞0.05).结果显示输卵管上皮细胞共培养通过增强自身的抗氧化能力,利用细胞-细胞间的相互作用降低胚胎细胞内部的活性氧,提高胚胎质量,促进胚胎发育.     

土壤液土比对塿土NH4+运移阻滞因子的影响

通过土娄土不同土壤液土比条件下 NH+4 饱和流运移试验 ,定量描述了土壤液土比对 NH+4 运移阻滞因子的影响。结果表明 ,土壤液土比由 0 .36 72增加到 0 .7134 ,相应的 NH+4 饱和流运移阻滞因子由 7.494减小到4.40 9,具有明显的土壤液土比效应 ;NH+4 饱和流运移阻滞因子与土壤液土比呈极显著线性负相关。     

神蜂精的药效学试验 Ⅱ.神蜂精对虎斑蛙神经传导和肌肉收缩力的影响

神蜂精对虎斑蛙的神经电位传导有很强的阻滞作用． ２５％ 的神蜂精溶液在给药后４ ｍ ｉｎ 对蛙坐骨神经动作电位的传导开始有明显的阻滞作用（Ｐ＜ ０．０５）; ５０％ 以上神蜂精溶液在２ ｍ ｉｎ 内就开始有显著阻滞作用（Ｐ＜ ０．０５）,并随给药时间推移,阻滞作用不断加强,表现出明显的时程效应．此外,不同剂量的神蜂精组间还表现出明显的剂量依赖性阻滞效应（ｒ＝ ０．９８）,而对照组１０ ｍ ｉｎ 内仍无阻滞作用．神蜂精对蛙的肌肉收缩力也有抑制作用．在给药后２～４ ｍ ｉｎ, ２００％ 的神蜂精（指内含２００个蜂单位蜂毒）与对照组对蛙缝匠肌收缩力均有抑制作用,但前者明显高于后者（２ ｍ ｉｎ 时, Ｐ＜ ０．０１; ４ ｍ ｉｎ 时, Ｐ＜ ０．００１）,且１０ ｍ ｉｎ 后肌肉收缩完全受抑制．上述试验表明神蜂精具有较强的阻滞神经动作电位传导和抑制肌肉收缩作用,证明了神蜂精对椎间盘突出症等病症引起的神经酸痛和肌肉犟痉痉挛具有较好的缓解治疗作用．     

麋鹿皮肤成纤维细胞的细胞周期同步化研究

为给体细胞核移植提供更多的G0/G1期供体细胞以提高克隆的成功率,本试验采用不同的接触抑制和血清饥饿时间及含羞草酸(mimosine)不同浓度和时间3种方法对麋鹿皮肤成纤维细胞进行同期化处理,然后利用流式细胞仪分析细胞周期.结果表明,接触抑制24 h G0/G1期比例可达91.95%;血清饥饿24 h有89.42%的细胞处于G0/G1期,当处理时间超过144 h细胞凋亡和异常聚集的比例会增加;适宜浓度(0.4 mmol &#183;L-1)的含羞草酸处理24 h能使麋鹿成纤维细胞同步化至G0/G1期,但易引起细胞损伤.     

胸段硬膜外阻滞复合全身麻醉用于开胸手术的临床观察

胸段硬膜外阻滞复合全身麻醉在临床上越来越被广泛应用。现将我院采用的胸段硬膜外阻滞复合全身麻醉用于开胸手术60例总结报道如下。     

Ran的GTPase活性及其生物学功能研究进展

核内小分子GTP结合蛋白（a small nuclear GTP-binding protein，Ran）是一种分布于真核细胞核内含量十分丰富的小分子GTP酶，是Ras基因大家族中的一员。Ran具有多种生物学功能，参与调节核物质转运，调控核膜装配、纺锤体组装、DNA复制、RNA转录、加工和运输、细胞周期及LPS信号传导等。