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911.
猪流行性腹泻病毒S基因B细胞表位的筛选及其单克隆抗体的制备与鉴定 《畜牧与饲料科学》2022,43(4):14-18
目的 应用生物学软件与单克隆抗体技术相结合的方法鉴定PEDV S2基因B细胞表位肽。方法 利用CLC Sequence viewer 6.8软件及在线数据库IEDB筛选出PEDV S2基因B细胞表位,并人工合成表位肽。将表位肽与钥孔血蓝蛋白(KLH)耦联后作为抗原,免疫雌性BALB/c小鼠,通过ELISA法筛选出抗体效价较高的小鼠进行1次加强免疫,3 d后取脾脏制备脾细胞悬液进行细胞融合。经HAT选择培养基培养筛选有效杂交瘤细胞,采用ELISA法筛选阳性克隆继续进行扩大培养。将部分阳性杂交瘤细胞进行小鼠腹腔注射,并收集腹水。通过ELISA方法分别检测小鼠腹水和单克隆细胞株培养上清液抗体效价,确定最高效价作为后备细胞株。结果 筛选出B细胞表位肽序列为:MQYVYTPTYYML;免疫多肽抗原后融合前血清抗体效价达到1:2 000;BALB/c小鼠腹水及单克隆细胞株培养物上清液ELISA检测结果显示抗体效价达到1:4 000。结论 筛选出了PEDV S2基因B细胞表位,为PEDV表位肽疫苗载体构建研究提供参考。 相似文献
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【目的】通过对猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)体外感染3D4/2细胞浓度、时间与细胞炎症水平进行探讨,建立PCV2体外感染3D4/2细胞炎症反应模型,以期为后期药物调控PCV2诱发3D4/2细胞炎症反应的研究奠定基础。【方法】将3D4/2细胞分为对照组及100、10-1、10-2和10-3 PCV2感染组,每组3个重复。对照组用DMEM培养,各PCV2感染组用不同稀释倍数PCV2液培养,2 h后均更换为含5%胎牛血清(FBS)的DMEM维持液进行培养,培养4、8、12和24 h后分别收集细胞及细胞上清液。采用Griess法检测一氧化氮(NO)水平,DCFH-DA荧光探针法检测活性氧(ROS)水平,酶标法检测还原型谷胱甘肽(GSH)水平,分光光度法检测黄嘌呤氧化酶(XOD)和髓过氧化物酶(MPO)活性,ELISA法测定白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-10、γ干扰素(IFN-γ)、IL-8、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)以及环氧合酶1(COX-1)和COX-2的分泌水平。【结果】100至10-3 PCV2作用4、8、12和24 h均能够成功感染3D4/2细胞。与对照组相比,100 PCV2在感染3D4/2细胞4、8、12、24 h后ROS水平均极显著升高(P<0.01),10-1至10-3 PCV2感染3D4/2细胞8、12、24 h后ROS水平显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01);100至10-3 PCV2感染3D4/2细胞8、12、24 h后,细胞内NO浓度及MPO活性显著提高(P<0.05),细胞上清液中的IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10、IFN-γ、IL-8和MCP-1水平及COX-1活性均显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01),其中100 PCV2感染3D4/2细胞后,各炎症因子水平上升最显著,且随着时间的延长,NO浓度逐渐升高,XOD活性逐渐降低。【结论】PCV2可诱导3D4/2细胞炎症反应,且100 PCV2体外感染3D4/2细胞4~12 h是建立炎症模型的最佳条件。 相似文献
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"春花1号"是从以"大五星"枇杷为母本,南亚枇杷为父本的杂交后代中,选育出的春季开花的晚熟新品种。2021年3月通过四川省非主要农作物品种认定委员会认定。该品种果形近圆形,萼洼圆,较浅,萼孔微开。果皮橙黄色,皮中厚,易剥离;单果重40 g;果肉橙黄色,汁多柔软,味浓甜,风味浓,偶有石细胞。含可溶性固形物10.4%,可溶性糖7.61%,总酸0.23%,维生素C 5.83 mg/100 g。单果种子数2~4粒,三角形。可食率71%~75%。该品种高接换种3年后,株产13~15 kg. 相似文献
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《技术与市场》2007,(1):5
防癌、治癌功效 亚洲国家如中国大陆和日本,乳腺癌、前列腺癌和结肠癌的发病率较西方国家为低,经统计结果发现,欧美国家患乳腺癌、结肠癌的机率高于中国大陆、日本等食用大豆食品国家的4倍,前列腺癌发病率高于中国大陆、日本等国家的3倍;科学家们研究发现,这一现象与大豆中所含的机能性物质大豆异黄酮是密切相关的.1987年日本科学家发现,染料木素可以特异性的抑制酩氨酸蛋白激酶(TPK)的活性,由于TPK参与细胞生长的调节和控制,因此能够抑制TPK活性的物质一直被视为有效的抗癌物质.进一步的研究发现,除了TPK外,其它几种参与调节、控制细胞生长的酶(如核糖体S6激酶,DNA拓扑异构酶)的活性也受染料木素的抑制,100多个体外研究发现,染料木素抑制多种癌细胞的生长,包括乳腺癌、肠癌、肺癌、白血病、前列腺癌等. 相似文献
915.
SOD(超氧歧化酶)是一种特异性酶,与生物体内细胞损伤、衰老和死亡密切相关.生物在外界胁迫情况下,都会产生性质极其活跃的自由基,如氧自由基和脂自由基等,引起细胞的损害和死亡. 相似文献
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如何提高嫩枝扦插成活率 总被引:2,自引:0,他引:2
采用硬枝扦插很难生根的树种如五针松、雪松、龙柏等,可改用嫩枝扦插,有利于插穗生根,其原因是嫩枝的代谢作用强、内源生长素含量高、细胞分生能力旺盛.但嫩枝抗逆性差,扦插时正值春季,气温高,水分和养分消耗大,易引起枝条枯萎死亡.因此,嫩枝扦插对技术和环境条件要求特别严格. 相似文献