鹅细小病毒HG5/82株的分离鉴定及生物学特性的研究

本研究通过对1982年黑龙江某鹅场发生的鹅细小病毒病疑似病例的肝病变组织病毒分离,进行回顾性研究.将肝脏加PBS研磨后,-70℃/37℃反复冻融三次,除菌过滤后接种12日龄鹅胚.发现病毒对鹅胚的致死时间为5～6 d,胚体体表有轻微出血点.鹅胚尿囊液经磷钨酸染色,可见具有典型特征的细小病毒粒子.将该病毒尿囊液在12日龄鹅胚中连续传16代,随着传代次数的增加,胚体多集中在3～4 d死亡.病毒传至第三代时死亡胚体头、颈、背部出现较为严重的出血点,体表有水肿.第五代病毒尿囊液(命名为HG5/82)对12日龄鹅胚的ELD50为10-5.92/0.1 mL.将20只12日龄雏鹅分为三个试验组和一个阴性对照组,各组分别接种鹅胚尿囊液104.92ELDso、103.92ELD50、102.92ELD50及生理盐水,发现雏鹅接种HG5/82后4 d出现轻微腹泻,随后恢复正常.用套式PCR检测雏鹅肛拭子病毒的体外排放情况.发现三个试验组在接种病毒后1～20 d用套式PCR均可检测到病毒.对照组及试验组接种后20～56d没有检测到病毒.将套式PCR产物进行序列测定并于参考毒株进行比较,表明该序列具有GPV相应区域的共同分子特征,与GPV参考毒株B的相应序列同源性达93.6%.本研究结果表明,该分离毒株为典型的鹅细小病毒(Goose Parvovirus,GPV),对雏鹅的致病力较弱.     

犬细小病毒病的诊断与综合防治措施

犬细小病毒病是由犬细小病毒引起的一种急性传染病。临床上病犬以出血性肠炎和非化脓性心肌炎为其主要特征，其感染率为20％以上，甚至高达100％，病死率为10％-50％，是严重危害养犬业的病毒性传染病之一，给集约化养犬带来很大的经济损失，为此本病应引起广大养殖户的高度重视。     

犬细小病毒感染的综合防治

当前,在一些中小型犬场,由于各种因素的影响,一些烈性传染病发病机率相对较高,特别是犬细小病毒感染病例较多。有单个犬发病,也有一窝犬同时或相继发病。该病病程短,发病急,病死率较高。临床症状有体温升高,心律不齐,呕吐,腹泻,拉血便且有恶臭味等,结合特异性快速诊断试剂盒不难对该病做出诊断。现结合自己临床工作经验,对该病的病因做深入分析,同时,就该病的各种治疗及免疫方法做一定的介绍。1病因分析1.1幼犬自身原因从临床病例来看,断乳前后的仔犬易感性最高。这时期的幼犬,自身免疫系统尚未健全,抵抗力较差;同时体内的母源抗体水平比较…     

试论蜂场生态与蜜蜂病敌害发生的关系

一、非生物因子与蜜蜂病敌害的发生 1.温度因子 (1)高温与蜜蜂病敌害的发生:温度高于35℃时,易发生慢性麻痹病,并会借助于受病毒感染的花粉、巢脾、蜂机具以及盗蜂、迷巢蜂在群间迅速传播.持续的高温天气或丧失调温能力的蜂群,往往造成对卵和幼虫的高温伤害.高温有助于美洲幼虫腐臭病幼虫芽孢杆菌及急性麻痹病病毒粒子的增殖,有助于败血病及黄曲霉病的传染.     

中西医结合治疗犬细小病毒性肠炎

犬细小病毒性肠炎是由细小病毒(CPV)引起的以呕吐、腹泻、便血为特征的急性传染病.常见于3岁以下的犬发病,尤其是8月令以内的犬最易感染.     

鹅细小病毒VP2基因在大肠杆菌中的表达及纯化

将鹅细小病毒 (GPV) VP2基因插入原核表达载体 p PROEX- HTb,获得重组表达质粒 p PROEX- HTb- VP2。将其转化大肠杆菌 DH5α,用 IPTG诱导表达 ,表达菌体蛋白中可产生与预期大小相符的约 72 0 0 0的蛋白。以光密度扫描对该表达产物进行定量分析 ,表达产物约占菌体总蛋白的 14 %。经 His- tag金属螯合层析纯化 ,获得纯度较高的 6 His- VP2融合蛋白。 Western- blot结果表明 ,所得蛋白与鹅抗 GPV高免血清有较好的免疫反应性 ,说明在 VP2的 N端融合 6个组氨酸不影响其与特异抗体结合的活性。     

通过自制PCR试剂盒确诊雏鹅细小病毒感染

通过 PCR条件选择 ,组装了可用于确诊鹅细小病毒 (goose parvovirus,GPV)感染的试剂盒。首先根据 Gen Bank中已发表的鹅细小病毒不同株的核苷酸序列 ,设计并合成了 GPV特异性简并引物 ,利用该引物确定 PCR扩增条件 ,并鉴定了扩增产物的特异性。根据上述扩增条件 ,组装 GPV诊断试剂盒。试剂盒共有 3个反应管 ,贮于 - 2 0℃ ,应用时取 1号管 ,加入煮沸的肝脏悬液上清 ,2、3号管分别为阴性和阳性对照。按固定条件扩增 ,结果显示 ,待检病料的检出率在 96 %以上。该试剂盒操作简单 ,效果稳定 ,可用于 GPV感染的确诊     

猫细小病毒NS部分基因的克隆及序列分析

将疫苗用猫细小病毒(FPV)株提取基因组DNA,针对NS特定片段设计引物,利用PCR扩增出了部分基因并将该基因克隆到pMD18-T Vector中测序.结果表明,该基因长613bp,编码204个氨基酸.分离株基因与犬的细小病毒(CPV)、貂的细小病毒(MEV)毒株核苷酸同源性均为99%.氨基酸同源性达到97%、98%以上,与犬、貂的肠炎病毒有密切的亲缘关系.     

貉附红体和细小病毒病混合感染的诊治

滦县安各庄镇有一养貉专业户,2004年2月6日爆发附红体病和细小病毒病。报告如下。1发病情况 该养殖户饲养貉228只,其中仔貉158只,成年貉70只。仔貉首先发病后波及全群。仔貉死亡38只,成年貉死亡26只,发病貉均表现体温升高,精神不振,食欲减退或废绝,被毛粗乱,呼吸困难,呕吐,腹泻,粪呈黄色、灰黄色,有粘液、血液、气味腥臭。仔貉病程短,症状明显。发病开始曾用青、链霉素,庆大霉素,安乃近混合肌注,效果不明显。经我们采血化验,初步诊断     

马动脉炎病毒RT-PCR检测方法的建立

根据已报道的马动脉炎病毒基因组保守基因核苷酸序列，设计并合成了1对引物，通过对影响PCR扩增因素的筛选，成功地从病毒感染的细胞中扩增出约200bp的片段，与理论设计值(204bp)大小一致。而正常的RK-13、BHK-21和Vero细胞和同为动脉炎病毒科的猪繁殖与呼吸道综合征病毒(PRRSV)作为对照的扩增结果均为阴性。敏感性试验表明，该方法可以检测出10^-4个TCID50的病毒含量，说明具有较好的敏感性。