温度对中华鲟精子、卵子短期保存的影响

研究了中华鲟精子和卵子在低温(8,12℃)、中温(16,20℃)和高温(24,28℃)条件下短期保存的效果。结果发现:精子保存时间随着保存温度的升高逐渐缩短,8℃下可保存146 h以上,而28℃下只能保存32 h。低温下保存精子的活力强于高温下保存的精子,表现为快速运动时间和总活动时间较长;卵子适合在中温(16,20℃)下保存,高温或者低温对卵子的保存都不利,28℃下只能保存4~8 h,8℃下只能保存4~10 h,而在16℃和20℃下可保存18~20 h。     

脂质体法介导山羊精子转染外源DNA最适条件的研究

研究了阳离子脂质体介导山羊精子转染外源DNA的方法、效果及其影响因素以确定其最适转染条件,为进一步用此方法生产转基因动物提供参考.结果显示:①脂质体介导法可用于山羊精子转染外源DNA;②脂质体介导转染1、2、3号公羊的精子消化后阳性率分别为25.2%,22.6%,27.5%,差异不显著(p＞0.05).③脂质体介导转染的精子消化前后阳性率在充分洗涤组为41.3%和25.5%,极显著高于原精液直接加入1:10:1转染液不洗涤处理组的25.6%和11.4%及原精液加入不含缓冲液的转染液处理组的17.2%和7.8%(p＜0.01).④离心洗涤后精液分别与在转染缓冲液中加入0、0.1%、0.3%、0.6% BSA(质量/体积)的转染液共同孵育后的消化前后阳性率分别为41.3%和25.5%、35%和21.4%、27.5%和15.3%及11.2%和8.2%;⑤用不同缓冲液配制的转染液进行脂质体介导山羊精子转染外源DNA的效率有差异,其中以mDM液转染精子的消化前、后阳性率最高(为41.3%和25.5%).研究表明:脂质体介导转染外源DNA的独特机制使供精个体间精子转染效率趋于一致;精子与脂质体-DNA复合物混合前将精子充分离心洗涤可显著提高脂质体介导精子转染外源DNA的效率;血清白蛋白能降低脂质体对精子介导的转染效率;脂质体法介导山羊转染外源DNA的最适转染条件为用mDM液充分洗涤精子后再与脂质体-DNA复合物混合转染.     

转基因猪研究进展与前景展望

转基因动物是指用实验手段,将外源基因导入动物生殖细胞,由此稳定整合到动物基因组中,并能遗传给子代的动物.自1982年Palmiter等[11]将含小鼠金属巯因启动子的DNA片断与生长激素基因融合的质粒用微注射法导入小鼠受精卵,并移植给受体而产生6只比同窝仔鼠生长快一倍的超级小鼠后,即引起世界轰动,使得转基因动物的内在潜力由此而得以证实,随即世界各国普遍开展了转基因动物的研究.     

精浆中催乳素浓度与精子活动力的关系及临床意义

目的 :探讨精浆中催乳素 (PRL)浓度与精子活动力和活动率的关系。方法 :选择不育症门诊中 6 0例男子进行精液分析 ,按精子活动力和活动率分成 A组 (活动力 ～ 级 ,活动率 >5 0 % )和 B组 (活动力 ～ 级、活动率≤5 0 % )。应用磁分离酶联方法测定其精浆中 PRL 浓度。结果 :A组精浆中 PRL 浓度为 (14.85± 4.0 5 ) μg/ L,B组为 (19.5 5± 4.85 ) μg/ L,A组与 B组之间 PRL 浓度差异有显著性 (P<0 .0 0 1)。精子活动力和活动率与精浆中 PRL 浓度呈负相关。结论 :血清和精浆中 PRL以不同方式进行调节 ,精浆中 PRL 来源于精囊 ,其浓度的高低影响着精子活动力和活动率。临床上不育症患者 ,采用分步射精法 ,摒弃后半部分精液 ,可能提高精子功能状态和受孕率     

江黄颡鱼精子的超微结构

利用组织切片技术和电子显微镜研究江黄颡鱼[Pelteobagrusvachelli(Richardson)]精巢的精细胞结构。未成熟精巢中次级精母细胞的细胞核大,核物质染色浅;次级精母细胞的线粒体向细胞的一侧集中,有囊泡从细胞膜排出;精子细胞的核物质染色深,有明显的外排作用;精子分头部、中段和鞭毛三部分。头部长约1.8μm,有马鞍形的细胞核及不规则的核泡。中段有袖套、核小窝及中心粒复合体;核小窝非常发达,长度约为细胞核长轴的一半;中心粒复合体位于核小窝内。鞭毛长约15μm,其轴丝为典型的"9 2"结构。江黄颡鱼的精子不具顶体。     

珍珠鸡人工授精的研究

用电刺激采精方法 ,对 5只雄性成年珍珠鸡进行 2 5只次试验 ,皆获得精液。与按摩采精法相比 ,电刺激采精法采集的精液量 (0 .5 5 m L )显著高于按摩法 (0 .12 m L ) ,平均每次射出的精子总数 (4.2 2亿个 )比按摩采精法 (2 .4 4亿个 )显著增加 ,但精子活率和受精率无显著差异。冷冻试验结果表明 ,精子的活率为 2 0 %～ 5 0 % ,输精结果表明 ,受精率可达 6 0 %。     

卵黄离心及精液透析预处理对猪精子冷冻效果的影响

从卵黄离心处理和精液透析两方面对现有猪精子冷冻方法进行优化。分别采用两种离心方案除去卵黄中大颗粒物质,研究卵黄离心处理对猪精子冷冻效果的影响;在精液冷冻预处理的第一阶段降温平衡中,将包含精浆的猪精液在大体积稀释液中进行透析,研究透析方法对猪精子冷冻效果的影响。结果发现,对卵黄进行离心以及对包含精浆的精液采用透析处理均能明显改善猪精子冷冻效果(P0.05)。     

哺乳动物精子超微结构研究进展

精子超微结构研究是检验精液品质,揭示精子发生机制,开展受精生物学研究的一项重要内容。从哺乳动物的精子形态结构出发,综述了不同情况下精子变化的特征,论述了国内近些年来在哺乳动物精子超策结构上的一些研究进展,以及开展哺乳动物精子超微结构研究的意义。     

北方山溪鲵精巢中性类固醇激素的免疫细胞化学研究

探讨3种性类固醇激素在北方山溪鲵精子发育过程中的调控作用.用免疫细胞化学方法对3种激素在山溪鲵精子发生周期不同时期在精巢中的细胞定位进行检测.结果表明雄激素分布在精原细胞的胞质中,尔后转移到精母细胞及精子细胞的核中;雌激素一直存在于生精细胞的胞质及核膜周围;孕激素分布在精原细胞及精母细胞的胞质中,随后在精子细胞的核质中有表达.雄激素在早期的精子发生和转型中起作用,而雌激素主要以非基因组效应参与生精细胞的增殖,孕激素在精子发育后期精子细胞的变态中起作用.3种激素以不同的方式调控精子的发生.     

'合作猪'TDRP基因的克隆及生物信息学分析

[目的]丰富猪TDRP1基因研究的基础数据.[方法]以猪NM_001198925序列为参考,设计特异性引物,通过克隆测序获得'合作猪'TDRP1基因完整CDS序列,并进行生物信息学分析,同时采用实时荧光定量PCR方法检测TDRP1基因在不同组织中的表达特性.[结果]获得了TDRP1基因完整的CDS序列(GenBank登录号:KU743254),共684bp,其编码186个氨基酸多肽.与参考序列相比,在编码区第33、348位点处发生了同义突变(C→G、C→T).TDRP1基因分子式为C897H1421N259O287S2,理论等电点(PI)为5.86,不稳定系数为62.66,疏水指数为64.03,平均亲水性为-0.939,属不稳定可溶性酸性蛋白质.二级结构以无规则卷曲和α-螺旋为主,属混合类蛋白质.亚细胞定位结果显示,TDRP1编码的蛋白质在遗传物质复制和转录、翻译过程中发挥功能的可能性分别为26.3%、14.3%,明显高于发挥其它功能的可能性.mRNA表达分析表明,TDRP1基因在垂体和睾丸中高表达,肺、肾、小脑、卵巢中度表达,肝、脾、大脑、胃、小肠中低表达,心脏组织中不表达.[结论]成功克隆了'合作猪'TDRP1基因的完整CDS区序列,并发现了2个SNP位点;多组织转录表达分析表明TDRP1在垂体和睾丸中表达较高,可为深入研究TDRP1基因的功能提供参考.