种公猪年龄与精液品质的关系

对 6头大约克夏种公猪 8月龄至 5岁期间进行人工采精 ,研究不同年龄对公猪精液品质的影响。1　材料与方法1 .1　盐都县家畜改良站 6头大约克夏种公猪于 7月龄调教 ,8月龄开始采精。平均每头公猪采精次数为1 2 3次 ,至 5岁时 6头公猪共采精 3890次。1 .2　6头大约克夏公猪饲养在同一幢猪舍 ,由一名饲养员专职饲养 ,饲养管理和环境条件完全相同。1 .3　每头公猪每天饲喂 2 .5千克自配全价配合饲料和 2千克优质青饲料。每千克混合饲料含消化能1 2 .1 3兆焦 ,粗蛋白质 1 8%。自动饮水器饮水。种公猪每天运动 1小时。1 .4　每次采精的精液经两层…     

伪狂犬病病毒Ea株UL18基因的克隆、序列分析及表达

本研究以伪狂犬病病毒Ea株基因组DNA为模板,PCR扩增含ULl8全长基因的片段并克隆至pMDl8-T载体,采用双脱氧末端终止法测序.序列分析显示ULl8全长891 bp,可编码297个氨基酸.将该基因亚克隆到原核表达栽体pQE.82L的6×His标签下游,获得原核表达质粒pQE-UL18,转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导在大肠杆菌中成功表达,表达的融合蛋白6 × His-UL18的分子量约为33 ku.Western blot证实,表达的融合蛋白能与抗6×His的单抗发生特异性反应.进一步将UL18基因插入真核表达栽体pEGFP-N1中EGFP基因的5'端,获得与EGFP融合表达的真核表达质粒pEGFP-UL18,转染HeLa细胞,通过激光共聚焦显微镜观察发现,转染后24 h融合蛋白EGFP-UL18主要定位于细胞浆,仅有部分定位于细胞核,而48 h时则主要定位在细胞核.但对照载体pEGFP.N1转染细胞的荧光一直呈弥散型分布于整个细胞中.     

棉铃虫精子的超微结构及对其辐照后变化的初步观察

利用透射电子显微镜技术,研究了棉铃虫（ＨｅｌｉｃｏｖｒｐａａｒｍｉｇｅｒａＨｕｅｂｎｅｒ）真核精子和无核精子的超微结构,比较了在经γ射线照射的棉铃虫精子与未照射虫精子结构的差异,结果表明,棉铃虫真核精子和无核精子的顶体结构有较大差异。真核精子有核,呈半月形,鞭毛线粒体衍生物与微管系统紧密结合,从头到尾在质膜上都覆盖许多特定结构的外长物;无核精子没有核,顶体和鞭毛通微管连接,鞭毛缄粒体衍生物与微管系     

犬精液冷冻稀释液配方优化试验

<正>犬是最早被驯化的一个物种,人们根据需要培育了许多不同的犬品种。犬业在国内外已经发展成为重要的产业,犬精液冷冻保存技术在犬种资源的保护、品种选育和加快良种进程等方面都能发挥关键作用。发达国家对犬的冷冻精液研究与推广启动早、发展快,而且制定了冷冻精液的采集、运输和贮存等操作规则,并由专门组织或机构进行负责。在我国,随着养犬业越来越受到人们的青睐,犬的冷冻保存技术也已逐渐被人们熟识,在10多年当     

线粒体损伤对山羊-绵羊异种核移植胚早期发育的影响

【目的】研究线粒体损伤对核移植胚早期发育的影响。【方法】用经光敏化染料罗丹明-123损伤的山羊胎儿成纤维细胞和绵羊卵母细胞,构建山羊-绵羊异种体细胞核移植胚,于38.5℃、相对湿度100%、体积分数5%CO2条件下培养,统计其2-细胞期、8-细胞期和囊胚期的发育率。【结果】山羊核供体线粒体损伤并不影响囊胚期前核移植胚的发育率(P0.05);绵羊卵母细胞线粒体损伤,使核移植胚2-细胞期的发育率下降(P0.05),但不影响8-细胞期和囊胚期的发育率(P0.05);核供体和卵母细胞线粒体都损伤的核移植胚发育率的变化规律与卵胞质受体线粒体损伤的核移植胚一致。【结论】在异种核移植胚的早期发育中,核供体线粒体损伤不影响核移植胚的发育,但卵母细胞受体线粒体损伤明显影响核移植胚的发育率。     

水牛精子在胞质内注射后的早期形态变化

应用胞质内精子注射 (intracytoplasmic sperm injection,ICSI)技术探讨了水牛卵母细胞胞质与注射精子间的相互作用以及 ICSI精子的形态变化。ICSI后 13h,5 9.4 %的精子头部已膨大 ,且有 18.8%的精子进入解聚状态。雌雄原核发育不同步 ,雄原核在 ICSI后 16 h和 19h的形成率分别为 3.2 %和 4 0 .0 % ;雌原核在 ICSI后 13h已达到 71.9% ,16 h时提高到 90 .3%。经离子霉素与 6 - DMAP联合激活 ,ICSI后 19h产生的胚胎核型以 2 PN PB1 为主 ,其雌原核形成 (激活 )率为 91.3% ,雄原核形成率为 4 0 .0 % ,5 1.3%为孤雌胚。用 5 mm ol/ L 的 DTT预处理精子 1h,可提高精子的解聚率 (30 .9%比 12 .7% ,P<0 .0 5 ) ,但对雄原核的形成率无显著影响 (33.3%比 32 .7% ,P>0 .0 5 )。结果表明 ,水牛精子 ICSI后的雄原核形成时间晚于卵子雌原核形成时间 ,且其比率低于卵子 ,DTT处理精子能提高其解聚率 ,但对雄原核形成无影响     

不同冻融处理对猪精子顶体膜蛋白表达的影响

为探究不同冷冻解冻方法对猪精子损伤的影响,采用2种常用的冷冻解冻方法处理猪精子,分别对其顶体膜蛋白进行分离,进行SDS-PAGE电泳和总灰度值的检测和分析。结果表明,采用一次稀释法进行猪精液的冷冻保存较二次稀释法解冻后精子活率高,精子顶体膜蛋白组分中除125 ku和90 ku处蛋白表达水平低于二次稀释法外,120 ku、48 ku、36 ku均高于二次稀释法。可见,猪精子在受到更深层次(二次稀释法对精子冷冻解冻损伤大)的冷冻损伤时,伴随着顶体膜蛋白125 ku和90 ku表达水平的升高以及120、48及36 ku表达水平的降低。     

纹缟虾虎鱼精子的主要生物学特性

选取健康成熟的纹缟虾虎鱼(Tridentiger trigonocephalus)进行人工采精,设定不同的盐度和温度梯度,观察其对精子活力及寿命的影响.测定了精子的大小、密度,并观察了精子的超微结构.结果表明,随着盐度和温度的上升,精子的活力和寿命都先增加后降低,在盐度5和温度19 ℃时,精子的活力和寿命分别达到最高.测得精子密度为(1.73×109±0.08×109)/mL,细胞核长径为(0.98±0.12)μm,短径为(0.81±0.08)μm,鞭毛的长度为(7.28±1.06) μm.电镜结果表明:纹缟虾虎鱼精子由头部和尾部(鞭毛)二部分组成,头部的细胞核近圆形,内有核空泡.精子细胞质膜与核膜间有较大间隙,两者之间分布有细胞质和线粒体.中心粒复合体位于植入窝中,由近端中心粒和基体两部分组成.袖套位于核后端,呈一筒状,两侧不对称,袖套腔较为狭窄,两侧分布有线粒体和少量囊泡.鞭毛的核心结构是轴丝,轴丝为典型的"9+2"结构,从轴丝的横切面观察到轴丝外面的质膜呈不规则分布.     

苏太猪肌内脂肪沉积相关基因SRC-1的差异显示反转录PCR鉴定

采取90头180日龄去势苏太猪的背最长肌组织测定肌内脂肪含量,从中选取肌内脂肪含量差异极显著(P<0.01)的最高和最低各6头组成RNA 池,采用差异显示反转录PCR(DDRT-PCR)鉴定两组间差异表达的基因,结果共获得14条表达序列标签(expressed sequence tags),即EST序列,通过GenBank比对发现其中3条为已知序列.为进一步验证这3个已知基因与肌内脂肪之间的关系,从90个个体中选取肌内脂肪最高和最低各15个个体进行实时定量PCR检测.结果表明,细胞核受体共激活因子1基因(SRC-1)mRNA表达水平与肌内脂肪含量存在负相关关系(r=-0.38,P<0.05).提示:SRC-1蛋白有可能参与了肌内脂肪沉积的调节.     

丝核菌细胞核染色技术的研究

比较了5种不同的染色方法对丝核菌（Rhizoctonia)菌株细胞核的染色效果。结果表明，番红O－KOH的染色效果最好，Giemsa、苯胺蓝－甘油次之，染色效果最差的是苯胺蓝－乳酚油及曲利苯蓝－乳酚油。用番红O－KOH染色方法对分离自13种作物的57个丝核菌菌株进行细胞核染色，其中3个菌株为双核丝核菌，其余54个菌株为多核丝核菌。