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91.
海岛棉NBS-LRR类抗病基因同源序列的克隆与定位 总被引:3,自引:0,他引:3
植物R基因产物存在非常类似的结构域,如NBS、L,RR、STK、LZ、TM、TIR等。依据保守序列设计引物寻找抗病基因类似物(Resistance Gene Analog,RGA),从而定位或克隆抗病基因在理论上是可行的,这种方法称为R基因同源克隆法。RGA往往与已知抗病基因具有很高的相似性,均含有LRR、NBS或蛋白激酶中的保守基序,有的与已知抗病基因连锁,或是抗性基因家族中的成员,抑或与已知抗病基因无关,它们最有可能参与植物抗病反应过程中的信号识别、信息传导等途径,并且与植物抗病基因具有密切的关系,但RGA并非等同于植物R基因。将RGA作为分子标记整合到植物分子连锁图谱中,或将其作为探针筛选基因组文库,获得候选抗病基因则不失为一条克隆基因的捷径。利用已知R基因的保守序列设计引物进行PCR扩增,已经在植物中分离到了许多与已知R基因同源的DNA序列,并且有很多RGA作为标记定位在抗病位点附近,有点被证明与抗病性状共分离。小麦抗叶锈基因Lrl0的分离是利用该方法进行抗病基因克隆的首次报道。本研究依据N,L6,RPS2等NBS类抗病基因的NBS保守区设计简并性引物扩增棉花基因组DNA,在517bp左右获得特异性扩增条带。回收PCR产物,连接转化共得到800个克隆。经酶切筛选、嵌套引物鉴定获得252个候选RGA克隆。测序后获得11条RGA序列,这些序列的大小在500—527bp之间,其中3条序列中含有1或2个终止子。所有11个RGA序列都含有NBS保守区的Kinase海岛棉1a(GGVGKTT)、kinase-2(VLDD)、kinase-3a(GSRII)及跨膜区(GLPLA)等保守结构域,与已知抗病基因的保守结构具有较高的吻合程度。本研究所获得的RGA与大豆、棉花、腰豆等作物中已经克隆的NBS类RGA的核苷酸序列有很高的相似性。其中8条可通读的RGA序列推导出的氨基酸序列同已知抗病基因L6、RPMl、SRPS2、N表现出从25%——58%的相似性。本研究以海陆杂交F2群体作为定位群体,应用RFLP方法将获得的7条RGA序列定位在棉花基因组中。Gbrga2和Gbrga8定位于第11同源群的三个位点:连锁群1302的端点及连锁群A03距端点59.2cM处。在连锁群1302中与pAR286E4C标记定位在同一位点,与Unig22d03bE6D标记相距5.6cM在连锁群A03中与pARlllE3C标记共同定位在端点,同时定位在Unig26804E5D(22D)标记下游1.7cM处和Gate4DB08bE3D(14D)标记上游8.6cM处。Gbrga508和Gbrga535定位于第4同源群的两个位点,D染色体组的第20号染色体上距端点175.3eM处,与Unig27A04E5C标记和M16—118E1C标记分别相距2.7cM和3.8cM;Gbrga508和Gbrga535同时还定位于A染色体组第5号染色体上距端点142.9cM处,与G1025aE5C标记和Gate2CFllE3C标记相距2.6cM和1.2cM。Gbrga522,Gbrga568和Gbrga39定位于第4连锁群D染色体组的第20号染色体上距端点5.5cM处。与Unig24H03E6C标记和P13—6E3D标记分别相距1.0cM和2.0cM。海岛棉RGA的获得、在基因组的定位,对于棉花NBS类R基因的起源和进化,利用分子标记辅助育种以及棉花抗病基因的克隆,提供了重要的背景。 相似文献
92.
卡拉胶广泛地应用于食品、医药、日用化工和纺织等方面,而卡拉胶的成份和结构对它的物理性质有较大的影响,因此海藻多糖的组成和结构的快速分析在实际生产上有重大意义。目前公认利用^13C-NMR谱图对海藻多糖成份和结构的分析是既方便又快速的有效测定方法。利用^13C-NMR谱图对多糖进行结构分析一般需要预先制备一些模型化合物(Model Compound),再把模型化合物的^13C-NMR谱图与结构未知多糖的^13C-NMR谱图进行分析、比较,从而确定多糖的结构。但上述方法还是满足不了商业上的要求,于是ЩaЩKoB A.C.(1976)提出用一些与未知物在结构上相似的多糖^13C-NMR谱图和未知物的^13C-NMR谱图进行分析、比较;然后参阅未知物的IR谱图;最后决定未知物的结构。本文就是采用后者,对琼枝(Eucheuma gelatinae)多糖溶于KCI部分进行结构分析,并鉴定它是一个混合物,即由gamma(γ)-卡拉胶类似物和mu(μ)-卡拉胶类似物组成(图1)。 相似文献
93.
GnRH_A和紫萁抑制大黄鱼性腺早熟的机制 总被引:5,自引:0,他引:5
应用脑垂体组织生理学和免疫组织化学方法,对GnRH-A和紫萁抑制大黄鱼性早熟的作用机制进行了研究。结果表明,性早熟大黄鱼脑垂体许多促性腺激素分泌细胞的胞质出现空泡,提示性早熟的原因可能是由于GtH细胞提早进入分泌活动所致。长期服用促性腺激素释放激素类似物的养殖大黄鱼(没有性早熟),它的脑垂体GtH细胞对GnRH抗独特型发生弱的免疫阳性反应,而对照组性早熟鱼仍出现强的反应,表明实验组大黄鱼脑垂体GtH细胞对GnRH-A的应答能力下降,出现脱敏效应,这可能与GnRH-A抑制大黄鱼性早熟有关。养殖大黄鱼长期服用紫萁,它的脑垂体GtH细胞膜上GnRH受体则没有出现脱敏现象,提示紫萁抑制大黄鱼性早熟的机制不同于GnRH类似物,确切机制有待进一步研究。 相似文献
94.
1胞壁酰二肽类免疫增强剂的生物学活性胞壁酰二肽类免疫增强剂是指包括胞壁酰二肽(Muramyl dipPetide,MDP)在内的一类具有免疫调节活性的MDP衍生物和类似物.MDP是分枝杆菌细胞壁骨架中的主要免疫活性单元,主要成分为N-乙酞胞壁酸-L-丙氨酸-D-异谷胺酞胺.可通过口服、皮下、静脉等多种途径进入体内,在机体内发挥强烈的生物学效应,能够增强机体的免疫应答能力,提高疫苗、菌苗、病毒亚单位及寄生虫苗的保护力.同时,MDP还可通过非特异性免疫应答,激活机体免疫系统中的巨噬细胞、树突状细胞和NK细胞等发挥抗肿瘤免疫作用. 相似文献
95.
合理使用催产剂是鱼类人工繁殖成功的关键之一。目前鱼类人工繁殖中常用的催产剂有三种:即绒毛膜促性腺激素(简称HCG)、促黄体生成素释放激素类似物(简称LRH-A)以及鱼类的脑下垂体PG。本介绍前两种催产剂的使用技术。 相似文献
96.
在豆粕型饲料中添加蛋氨酸羟基类似物(MHA)对虹鳟鱼生产性能的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
试验2本试验的目的是研究MHA在豆粕型实用配方中的最适添加量。 相似文献
97.
<正> 鲻科鱼类的研究,近年来发展得很快。但对梭鱼脑垂体的研究报道较少。本文就梭鱼脑垂体及盐度、促黄体生成素释放激素类似物(LRH—A)对梭鱼脑垂体的作用提 相似文献
98.
以香茅醛为起始原料.首先与丙酮进行羟醛缩合反应.继而在金属锌的存在下与α-溴乙酸乙酯进行Reformatskii反应得到目标碳链.然后再经水解、酯化和醚化.最终成功地全合成了具有保幼激素活性的昆虫生长调节剂ZR-515及其异构体.即[1-甲氧基-3,7,11-三甲基-(2E,4E)-十二碳二烯酸异丙酯。其中具有较高生物活性的(2E,4E)-异构体(ZR-515)的含量达56%。各步所合成化合物的结构经IR、MS、^1H NMR证实。 相似文献
99.
肽核酸是一类新型信息分子,具有不带电荷的类似肽链的骨架结构并带有碱基,能与DNA和RNA特异性杂交,能调节基因的复制、转录(或逆转录)和翻译过程,在疾病的分子诊断和治疗方面有着广泛的应用前景. 相似文献
100.