红鳍笛鲷视杆蛋白和长波敏感视蛋白的基因克隆及表达规律分析

【目的】克隆红鳍笛鲷（Lutjanus erythropterus）视杆蛋白（RH1）基因和长波敏感视蛋白（LWS）基因,并分析其在早期发育不同阶段和成鱼不同组织的表达规律,为探究笛鲷属鱼类适应从表层浮游逐步转为下层底栖光环境生活的过程提供理论基础。【方法】利用RACE克隆红鳍笛鲷RH1基因和LWS基因cDNA全长,利用生物信息学软件对2个基因序列及编码的氨基酸序列进行分析,并利用实时荧光定量PCR检测其在红鳍笛鲷6个胚胎发育时期（原肠下包1/2期、胚孔封闭期、视囊期、晶体出现期、心脏跳动期、孵化出膜期）和5个仔鱼发育时期（1、3、10、15和20 d）,以及成鱼不同组织（脑脏、心脏、肝脏、肌肉、黑色皮肤、红色皮肤、胃和视网膜）的表达规律。【结果】红鳍笛鲷RH1基因和LWS基因cDNA全长分别为1723 bp和1302 bp,其中RH1基因具有465 bp的3’-UTR和196 bp的5’-UTR,开放阅读框（ORF）长度为1062 bp,编码353个氨基酸残基;LWS基因具有213 bp的3’-UTR和15 bp的5’-UTR,ORF长度为1074 bp,编码357个氨基酸残基。系统...     

Cu^2＋、Zn^2＋对蓝点笛鲷幼鱼急性及联合毒性研究

[目的]为蓝点笛鲷人工育苗中药物的施用提供参考。[方法]采用半静水法生物测试,研究Cu2＋、Zn2＋对蓝点笛鲷急性毒性及联合毒性。[结果]Cu2＋的安全浓度为0.103 8 mg/L;Zn2＋的安全浓度为3.347 8 mg/L。Cu2＋对蓝点笛鲷幼鱼24和48 h的LC50分别为0.422 3、15.888 5 mg/L;Zn2＋对蓝点笛鲷幼鱼24和48 h的LC50分别为0.395 2、14.123 2 mg/L。等毒性配比的2种重金属离子混合液对蓝点笛鲷幼鱼的毒性大于单一毒性。[结论]Cu2＋为剧毒物质,Zn2＋为低毒物质,两者混合表现为协同作用。     

斜带髭鲷和紫红笛鲷早期发育阶段的行为选择

采用实验生态学方法研究斜带髭鲷(Hapaologenys nitens)和紫红笛鲷(Lutianus argentimaculatus)幼鱼早期发育阶段的行为选择,旨在从行为学角度为优化种苗生产管理提供科学依据。结果显示,斜带髭鲷回避红色底质,对黑色底质的选择则是随着生长而逐渐增加,1 cm体长组的隐匿习性最强,为50.67%;2 cm和3 cm组的隐匿率分别为40.67%和35.33%;4 cm组仅25.00%。1 cm组的顶流率为3.35%,4 cm达71.65%。1 cm和2 cm组在1 760~2 210 lx照度下的分布率分别为41.67%和35.00%,在39~59 lx为8.33%和16.67%,4 cm组在38~53 lx的分布率达41.67%,在2 780~2 980 lx仅为8.33%。体长1 cm的紫红笛鲷喜栖息于白色底质,约占总群体的61.00%,随着生长,对黑色底质的喜好明显增强;4 cm组对白色底质无选择,而对黑色底质的选择达到63.67%。1 cm组的隐匿百分率为55.67%,4 cm组仅为25.00%。在流速1 cm/s的情况下,趋流率比较低,为50.00%左右,1 cm组在流速3 cm/s时的趋流率最高,达到98.67%;1 cm组的顶流率为96.65%,3 cm和4 cm组的顶流率仅为6.65%和3.35%。研究表明,斜带髭鲷和紫红笛鲷行为特征随着个体的发育而变化。     

红笛鲷头肾消减cDNA文库的构建与分析

应用抑制性消减杂交技术(SSH)构建红笛鲷(Lutjanus sanguineus)头肾消减cDNA文库,筛选红笛鲷免疫相关基因的EST.以哈氏弧菌(Vibrio harveyi)灭活疫苗体内诱导红笛鲷为实验组,以注射无菌生理盐水的红笛鲷为驱动组,通过SSH技术构建红笛鲷头肾消减.DNA文库.利用PCR技术和斑点杂交对文库进行筛选,从2 424个含插人片段的阳性克隆中筛选了680个克隆在上海生工进行了序列测定.使用BLASTx和BLASTn工具对获得的ESTs与GenBank数据库进行同源性比较并根据相似性序列的名称通过GO法对ESTs进行注释.结果获得了30个与红笛鲷免免疫防御相关基因的EST,如组织相容性抗原复合物基因(MHC I和MHCII),免疫球蛋白基因(IgH和IgL)、热休克蛋白基因(HSP10,HSP70和HSP90)等.本研究构建了哈氏弧菌灭活疫苗免疫后与正常组织差异表达的消减cDNA文库,并获得一批与红笛鲷免疫防御相关的ESTs,旨在为探讨红笛鲷分子免疫防御机制、筛选参与免疫防御调控相关的功能基因,揭示红笛鲷免疫抗病机制、提高机体抗病力、实现遗传改良奠定基础.     

红笛鲷LITAF基因的克隆与表达分析

通过同源克隆和RACE PCR技术从红笛鲷脾脏中鉴定得到了脂多糖诱导的肿瘤坏死因子(LITAF)基因,命名为Ls-LITAF。该基因c DNA全长815 bp,开放阅读框为447 bp,编码148个氨基酸,理论分子量为15.7 ku。序列分析显示Ls-LITAF蛋白具有保守的LITAF结构域,其中包含一个CXXC基序与一个(H)x Cxx C基序。Ls-LITAF蛋白与其他鱼类LITAF蛋白相似度较高,在系统进化树中也与其他鱼类该蛋白聚为一支。Ls-LITAF基因在健康鱼体多种组织均有表达,其中鳃、脾脏、皮肤与头肾的表达量较高;且哈氏弧菌刺激鱼体后,Ls-LITAF在脾脏和头肾中的表达量显著上调。以上研究结果为进一步了解Ls-LITAF在红笛鲷免疫反应中的作用提供了参考。     

斜带髭鲷和紫红笛鲷早期发育阶段游泳能力的研究

研究斜带髭鲷和紫红笛鲷在早期发育过程中游泳能力,以及盐度、光照、昼夜时间、饥饿和再投喂对游泳能力的影响,旨在为优化其苗种培育工艺提供技术支撑。结果显示,斜带髭鲷游泳能力指数为:1 cm:48.60;2 cm:122.40;3 cm:242.40;4 cm:397.20。最大巡游速度出现在25~35的盐度区间,盐度越高,影响越显著;不同体长组紫红笛鲷幼鱼的游泳能力指数分别为:1 cm:111.90;2 cm:258.00;3 cm:285.00;4 cm:318.00;且随着游泳时间延长,巡游速度线形下降。在15~35的盐度范围内,紫红笛鲷巡游速度最大,且随着生长,盐度越低对巡游速度的影响越显著;在0~2 460 lx的光照范围中,1,2,3 cm规格的斜带髭鲷巡游速度随着光照度的增加而增加;最大巡游速度出现在清晨,最低巡游速度出现在午夜,且差异显著;而光照对巡游速度的影响随紫红笛鲷生长而减弱;紫红笛鲷的最大巡游速度出现在清晨,其次为傍晚,最低巡游速度出现在午夜。2种鱼在饥饿的前2 d里巡游速度相对对照组有所上升,但随即下降明显。再投喂组的巡游速度随补偿生长的出现相对对照组略有上升。     

三种笛鲷的野生群体和养殖群体遗传多样性的微卫星分析

摘要：利用微卫星标记技术,采用10对微卫星引物对南海海域红鳍笛鲷、星点笛鲷、紫红笛鲷3种笛鲷鱼的野生种群（HYE、XYE、ZYE）和养殖种群（HYA、XYA、ZYA）进行了遗传多样性分析。10对微卫星引物在6个群体中共检测到78个等位基因,每个位点的等位基因数目在1~8个之间。6个群体的观测杂合度(Ho)为0.2500~1.0000,平均观测杂合度为：ZYE(0.9550)> ZYA(0.8900),HYE(0.8950)> HYA(0.8400),XYE(0.8450)>XYA(0.8100) ;平均多态信息含量(PIC) 为0.3648~0.7964,各野生群体均大于养殖群体;三种笛鲷鱼的野生群体和养殖群体遗传距离HYE与HYA,XYE与XYA,ZYE与ZYA分别为0.1029,0.0371,0.0135,基因分化系数分别为0.0371,0.0211,0.0352。群体遗传结构分析结果表明：红鳍笛鲷、星点笛鲷和紫红笛鲷的遗传多样性较丰富,养殖群体的遗传多样性较野生群体均有一定程度的降低,野生群体和养殖群体分化较弱。     

内陆咸淡水主养紫红笛鲷创高效

紫红笛鲷属笛鲷科，别名银斑笛鲷、银纹笛鲷、红鲅、海鲤。分布于太平洋中西部、印度洋、我国南海及东海南部，主产于印度、西太平洋。上世纪70年代以来已开展养殖和育苗试验。紫红笛鲷体长一般15～35厘米，为体高的2．51～2．84倍，体紫红色，腹部银白色。该鱼属暖水性中下层鱼类，栖息于近海岸礁或泥沙底质、水深80米的海区     

饥饿与恢复投喂对红鳍笛鲷血液生化指标的影响

对红鳍笛鲷(Lutjanus erythopterus)进行不同时间的饥饿处理后恢复投喂，研究其血液生化指标的变化。结果表明饥饿4周后，血糖、血脂含量均下降，而血蛋白含量则维持较恒定的水平。其中，血糖含量在饥饿第1周后就显著降低，而血脂含量在饥饿第2周后显著下降，二者下降趋势均持续到饥饿第4周。恢复投喂8周后，血糖、血脂含量均上升，血蛋白含量仍保持较恒定的水平。其中，血糖、血脂分量在恢复投喂8周舌均恢复到对照组水平。