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bar因在大肠杆菌中的高效表达及其表达产物的分离和纯化 总被引:1,自引:1,他引:1
bar基因来源于P3301质粒载体,通过构建PB813测序载体对bar基因进行了测序,与GenBank中bar基因全编码区比较发现:在DNA上有两个碱基不同,但在蛋白质水平上完全相同。用PCR方法从P3301载体上克隆了552碱基的bar基因全长序列插入到大肠杆菌(Escherichia coli)表达载体pET30a( )中,构建了pET30a-bar融合表达载体并转人大肠杆菌宿主菌BL21(DE3)。在异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导下,pET30a-bar融合表达载体在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中以可溶性蛋白的形式高效表达了膦丝菌素乙酰转移酶(PAT),并通过金属鏊和层析一步纯化了目的蛋白。用肠激酶切除了融合蛋白的融合部分之后再一次通过金属鏊和层析,经过透析后获得了PAT纯品。 相似文献
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对虾养殖的工业化发展需要稳定数量和质量的苗种供应。虽然人们已知对虾产卵是受其激素控制并受个体、营养和生理状况的影响,但这个繁殖过程还有待于进一步研究。诱导卵巢发育和产卵的一种常用方法是切除眼柄,即去除眼柄上抑制性腺激素的X-窦腺器官,不过这种方法常会导致卵质和卵量的退化。很明显,有关卵巢发育和繁殖过程的基础内分泌学还需更多了解。 相似文献
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2001年4月20日,笔者曾接诊乳房肿瘤重15kg 的病猪一例,经手术切除,疗养15天痊愈,现报告如下:1 病例简况该患病母猪系通辽市科左中旗架玛吐镇东古村民曹某自养,体重150kg,先后产过两窝仔猪。据主诉,此猪产完第二窝仔猪后始终不发情,仔猪断奶后,乳房渐渐增大,两个月时间已长到拖地的程度,病猪难以行动,饮食欲大减。经诊断,增大之乳系乳房肿胀所 相似文献
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目的:探讨左半结肠癌并发急性肠梗阻一期切除吻合术的治疗方法。方法:回顾性分析我院收治的24例左半结肠癌并发急性肠梗阻病例,综合评价一期左半结肠切除吻合术的治疗效果。结果与结论:一期左半结肠切除吻合术的成功率达95.8%,手术死亡率为5.0%;对左半结肠癌并发急性肠梗阻的患者,只要掌握好适应证,施行一期肿瘤切除吻合术是安全有效的。 相似文献