印迹基因Igf2r的甲基化进程与兔卵母细胞直径关系的研究

本研究以3～4月龄兔为研究对象,收集卵母细胞,按直径将其划分为75～95μm、95～105μm、105～115μm3个组,通过亚硫酸盐测序法检测了印迹基因Igf2r的甲基化程度,并运用RT-PCR对Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b、Dnmt3l、Lsh的表达量进行检测。结果表明,在3组卵母细胞内,Igf2r的甲基化比率依次为15.7%、60%、91.5%,甲基化程度随卵母细胞直径的增加而不断提高。     

小鼠卵泡颗粒细胞分化不影响卵母细胞印迹基因DNA甲基化进程

雌性生殖细胞印迹的获得发生于小鼠的卵子发生过程中,本研究以颗粒细胞分化前后的卵泡卵母细胞为研究对象,利用重亚硫酸盐测序法,对卵泡腔形成前后的卵母细胞中Igf2r和Peg3两个印迹基因的甲基化状况进行了分析。颗粒细胞分化前,卵母细胞Igf2r和Peg3两个印迹基因DMR区CpG位点的甲基化比率分别为80.67%和82.78%;颗粒细胞分化后的早期有腔卵泡卵母细胞中,卵母细胞Igf2r和Peg3两个印迹基因DMR区CpG位点的甲基化比率分别为82%和83.89%。可见,卵泡腔的形成对于直径相同的卵泡卵母细胞印迹基因甲基化的建立没有影响。     

植物DNA甲基化研究进展

DNA甲基化是一种重要的表观遗传修饰,能够有效调控基因组稳定性.为了了解DNA甲基化对植物生长发育的影响,本文归纳了近年来植物DNA甲基化的模式,总结了植物DNA甲基化的生物学功能,概括了DNA甲基化的研究方法,最后总结了植物DNA甲基化研究中存在的问题,并指明了研究方向,为后续植物基因组研究提供理论依据.     

一种用于测定乳中脂肪酸组成的快速方法

英国诺丁汉大学的科研人员近来建立了一种从牛乳中迅速分离乳脂并经转甲基化产生脂肪酸甲酯的方法。脂肪经一种非溶解方法离心分离。将上述方法与己烷：isopropanol溶剂抽提方法进行比较，并使2种方法中的脂肪酸比例完全相同。对108个样品测定结果比较发现，该方法准确、简单、迅速、安全、经济，特别适合于大量样品的测定。     

体细胞克隆猪皮肤和毛发色素脱失的研究

利用杜洛克猪供体细胞已成功培育了9头克隆猪,其中1头在初情期皮肤和毛发出现明显的色素脱失,本试验对该头克隆猪的体细胞核移植异常的病因进行了研究。假设Waardenburg综合征的相关基因(Mitf、Pax-3、Sox-10、Slug和Kit)与克隆猪体细胞核移植(scNT)所致的色素脱失密切相关。试验从受scNT影响和未受scNT影响的猪耳组织中分别提取总RNA,运用反转录聚合酶链反应扩增Mitf、Pax-3、Sox-10、Slug的转录体和Kit基因,测序并分析。cD-NA序列反转录结果表明,毛发逐渐褪色的scNT猪的这些基因并没有发生突变。尽管没有发现任何突变,但与未受scNT影响的猪相比,Waardenburg氏综合征相关的这些基因在受scNT影响猪中的表达出现明显的负调控。基因表达的负调控可能产生一种黑素细胞不稳定的新表型,并最终导致色素沉着逐渐消失。     

CpG寡聚核苷酸的免疫激活机理及生物学活性

脊椎动物能够识别入侵的微生物是基于病原体的特定分子结构，这些被认为是病原体相关分子模式（pathogen—associated molecular pattern，PAMP）的结构能够被宿主体内模式识别受体（pattern recognition receptor，PRR）所识别，从而产生免疫应答。细菌和病毒基因组中所携带的非甲基化CpG（胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸）至少是脊椎动物中的20倍，并且脊椎动物的DNA甲基化程度比较高。细菌和脊椎动物这种在DNA上的显著差别使得细菌基因组在进化过程中成为PAMP从而被脊椎动物识别为“危险的入侵信号”，并做出相应的免疫应答。     

DNA甲基化及其作用意义

DNA甲基化修饰是表观遗传学领域的一个重要组成部分,它有助于基因的表达调控,对哺乳动物胚胎的发育调节起着重要的作用。主要概述了DNA甲基化的机制、生物学功能及生物学意义等,并提出今后对DNA甲基化进行深入的研究是必然趋势,它将有可能成为医学中治疗某些疾病的常规技术指标。     

荷斯坦奶牛β-氧化关键酶ECHS1基因甲基化分析

为了检测烯脂酰辅酶A水合酶短链1(ECHS1)的甲基化状态,以同源比对克隆的方法获得荷斯坦奶牛ECHS1部分片段的序列,首先预测甲基化数目,然后采用重亚硫酸盐转化测序(BS-Seq)的方法检测了所获得片段的甲基化状态。结果表明,该试验成功获得了ECHS1 459 bp的序列,其C+G含量为53.88%,含有28个Cp G岛,其中1号、2号、9号、11号、13号、14号、17号、22号、24号、27号位点所有个体都发生了甲基化。     

用高效液相色谱法检测鸡胚组织基因组DNA甲基化水平变化规律

本试验旨在优化用于基因组DNA甲基化水平检测的高效液相色谱法,并初步探索鸡胚发育过程中不同组织基因组DNA甲基化水平的变化规律。首先,试验从DNA酶解体系和高效液相色谱仪检测条件2个方面改进基因组DNA甲基化水平检测方法;然后,以孵化第8、11、14和17天的科宝500肉鸡胚胎为材料,利用改进的高效液相色谱法测定心脏、肝脏和肌肉的基因组DNA甲基化水平。结果表明:3种组织的基因组DNA甲基化水平均随胚龄增加而升高,且鸡胚发育后期(孵化第17天)肝脏的甲基化水平显著高于心脏和肌肉(P0.05);各胚龄心脏和肌肉的基因组DNA甲基化水平均差异不显著(P0.05)。结果提示,优化后的高效液相色谱法为快速、准确地获取组织基因组DNA甲基化水平奠定了基础;随着鸡胚发育的进行,基因组DNA甲基化水平逐渐升高,且在胚胎发育后期肝脏甲基化水平较高。