微波辅助木质素脱甲基化改性及结构表征

为提高木质素的反应活性,采用微波辅助加热方式,在HBr/十六烷基三正丁基溴化磷(HBr/TBHDPB)体系下对木质素进行脱甲基化改性。考察了HBr用量、反应温度、反应时间和催化剂用量对木质素改性反应的影响。通过紫外光谱(UV)、核磁共振氢谱(1H NMR)、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)、凝胶渗透色谱(GPC)和元素分析等手段研究了木质素改性前后的官能团及分子质量变化,并由羟甲基化反应和曼尼希反应分析了木质素改性前后的活性变化。结果表明:木质素在微波辅助加热条件下,HBr用量为20 mmol/g,催化剂TBHDPB用量为木质素质量的2%,95℃反应1 h,制备的改性木质素含酚羟基为4.95%,相比原料木质素提高了32.71%,甲氧基为6.11%,相比原料木质素降低了20.44%。与甲醛反应的活性提高了18.15%,胺基侧链增加了7.54%。UV、1H NMR和FT-IR分析也表明,改性木质素的酚羟基含量增加,甲氧基含量降低。     

毛泡桐二倍体及其同源四倍体的AFLP和MSAP分析

分别用AFLP和MSAP分子标记技术,研究了毛泡桐二倍体及其同源四倍体幼苗DNA碱基序列及其甲基化的变化。结果表明,毛泡桐二倍体及其同源四倍体DNA碱基序列在AFLP水平上没有发生变化;在MSAP扩增电泳凝胶上,毛泡桐二倍体及其同源四倍体分别检测到2 262和2 180个扩增位点,DNA甲基化位点占总扩增位点的比例分别为35.32%和38.58%,其中DNA全甲基化比例则为12.86%和14.13%;毛泡桐同源四倍体DNA甲基化和去甲基化频率高于其二倍体,总DNA甲基化多态性低于二倍体。     

烟草烟碱去甲基化研究进展

栽培烟草群体中由于基因突变可出现具有烟碱向降烟碱转化能力的转化株，导致烟叶降烟碱含量增加，烟碱含量降低，TSNA含量大幅度增加，并严重影响烟叶香味品质。在总结笔者近些年研究结果的基础上，对烟碱转化与NNN含量和烟叶香味品质的关系，烟碱转化的遗传控制和生化过程，栽培品种中烟碱转化的频率和时期，以及转化株的早期鉴别等进行了综述。     

干旱胁迫下植物生理生化及DNA甲基化的研究进展

干旱是影响植物正常生长发育的一个最重要的逆境因子,植物为适应和抵御干旱环境所引起的生理生化过程是一个复杂的系统,DNA甲基化在植物干旱胁迫下过程中起了重要作用。从植物形态指标的表现、生理生化水平的调节及DNA甲基化3个方面归纳阐述植物对干旱胁迫的响应,综述植物抗旱响应对策、DNA甲基化及其检测方法等研究进展,为抗旱种质的鉴定、筛选和抗旱生理育种提供参考。     

通过对甲基化敏感的AFLP标记分析辣椒种子在萌发过程中的DNA甲基化

引言植物的DNA甲基化与很多外(后生)遗传现象有关,在植物各种发育与分化过程中,调节机制的变化亦是其中之一(仑德等1995;芬内干等1993)。本文报道的是在辣椒种子萌发过程中,利用甲敏扩增多态性(MASP)——这是一种与AFLP相匹配的技术——来分析辣椒胞嘧啶甲基化的初步结果。MSAP     

双胚苗水稻单倍体及其杂交后代基因组DNA甲基化特异位点的分析及功能探讨

 采用甲基化敏感性扩增多态性技术对水稻单倍体SARⅡ 628及它与蜀恢527、蜀恢363的杂交后代基因组DNA甲基化位点进行了分析。用16对选择性扩增引物在双亲及杂交后代中共检测到765个DNA甲基化位点,与双亲相比,杂交后代DNA甲基化水平均有不同程度的降低。通过分析两个杂交组合与双亲的甲基化带型差异,发现非单倍体遗传及单倍体独立遗传两种甲基化差异位点。对部分甲基化位点的序列进行功能分析,发现这些位点主要涉及细胞构造、代谢途径、应激反应等生物学功能。推测这类功能基因的甲基化修饰调控着相关基因的开启与关闭,为植物的生存、生长、发育及进化提供动力。     

山核桃甲基化敏感扩增多态体系的建立与甲基化初步分析

山核桃Carya cathayensis为浙江省重要的经济树种。近年来细胞生物学及分子标记的研究发现,山核桃中存在无融合生殖,天然群体的多态性不佳,存在印迹数量性状位点（iQTLs）。iQTLs与DNA甲基化有关,而DNA甲基化对生物表观遗传调控起着重要的作用,是可遗传的生物现象。甲基化敏感扩增多态（MSAP）是基于PCR扩增多态性的DNA甲基化检测方法。在建立山核桃MSAP标记体系的基础上对来自3个天然居群的山核桃单株样品进行了分析。结果表明:山核桃存在甲基化,非甲基化相对水平大于总甲基化相对水平,且两者间差异极显著（Wilcoxon Rank Sum检验P < 0.001）,内侧胞嘧啶甲基化相对水平远大于半甲基化相对水平,且两者间差异极显著（分子方差分析及邓肯多重比较,P < 0.001）;天然居群山核桃内侧胞嘧啶甲基化相对水平高,则半甲基化相对水平和非甲基化相对水平则相对较低,反之亦然;居群间存在明显的表观遗传分化,主要变异存在于居群内。此外,山核桃的MSAP体系可用于薄壳山核桃Carya illinoensis,2个物种在位点及位点数上存在差异。     

DNA甲基化、组蛋白修饰与基因沉默

DNA甲基化、组蛋白去乙酰化和H3K9甲基化是3种最典型的与染色质凝聚状态有关的共价修饰方式，它们都与基因的沉默存在着联系，近年来的研究主要集中于DNA甲基化与各种组蛋白修饰之间的关系，以及染色质阻遏状态的自身强化循环关系上。组蛋白去乙酰化和H3K9甲基化可能有助于DNA甲基化模式的建立，此外，研究结果还显示CpG甲基化和其它组蛋白修饰存在相互作用。     

CpG寡聚核苷酸的免疫激活机理及生物学活性

脊椎动物能够识别入侵的微生物是基于病原体的特定分子结构，这些被认为是病原体相关分子模式（pathogen—associated molecular pattern，PAMP）的结构能够被宿主体内模式识别受体（pattern recognition receptor，PRR）所识别，从而产生免疫应答。细菌和病毒基因组中所携带的非甲基化CpG（胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸）至少是脊椎动物中的20倍，并且脊椎动物的DNA甲基化程度比较高。细菌和脊椎动物这种在DNA上的显著差别使得细菌基因组在进化过程中成为PAMP从而被脊椎动物识别为“危险的入侵信号”，并做出相应的免疫应答。     

一种用于测定乳中脂肪酸组成的快速方法

英国诺丁汉大学的科研人员近来建立了一种从牛乳中迅速分离乳脂并经转甲基化产生脂肪酸甲酯的方法。脂肪经一种非溶解方法离心分离。将上述方法与己烷：isopropanol溶剂抽提方法进行比较，并使2种方法中的脂肪酸比例完全相同。对108个样品测定结果比较发现，该方法准确、简单、迅速、安全、经济，特别适合于大量样品的测定。