AIM2在金黄色葡萄球菌皮肤感染中的作用

为了探讨天然免疫模式识别受体黑色素瘤缺乏因子2(AIM2)在金黄色葡萄球菌皮肤感染中的作用,对野生型(WT)小鼠和AIM2基因缺失(AIM2-/-)小鼠皮下注射金黄色葡萄球菌后,应用免疫组织化学法检测皮肤组织中AIM2的表达定位,用游标卡尺测量并计算皮肤脓肿大小,用HE染色法检测皮肤组织的病理损伤情况,用ELISA检测皮肤组织中促炎因子CXCL1、TNF-α和IL-1β的分泌情况,用平板培养法检测皮肤组织荷菌量。结果发现,AIM2表达于皮肤并主要定位于浸润的炎性细胞;与WT小鼠相比,AIM2-/-小鼠脓肿显著增大和病理损伤加剧;AIM2基因缺失促进细菌定殖及CXCL1和TNF-α炎性细胞因子的分泌,但对主要依赖炎性体释放的IL-1β无影响。结果表明AIM2抑制金黄色葡萄球菌皮肤化脓性感染,并揭示该作用可能依赖于AIM2对炎症和病原增殖的调节,为阐明其调节机制和转化应用奠定了基础。     

孕酮对绵羊输卵管上皮细胞β-防御素2表达的影响

研究孕酮(P4)对绵羊输卵管上皮细胞β-防御素2(SBD2)基因表达的影响,探讨P4调节SBD2表达的潜在机制。建立绵羊输卵管上皮细胞体外培养体系,用不同浓度(10^-6、10^-7、10^-8、10^-9、10^-10mol/L)P4分别处理绵羊输卵管上皮细胞0、2、6、12、24、48h,筛选P4诱导绵羊输卵管上皮细胞SBD2mRNA表达的最佳条件。然后使用10-6mol/L孕激素核受体拮抗剂RU486,50μmol/L蛋白激酶C(PKC)信号通路阻断剂H7预处理细胞1h,再使用P4诱导SBD2mRNA表达的最佳条件处理细胞,同时设只添加阻断剂(RU486和H7)处理组、只添加孕酮(P4)处理组和空白对照组,通过RT-qPCR技术检测SBD2mRNA的表达变化。10-9mol/LP4诱导绵羊输卵管上皮细胞6h和24h时SBD2mRNA表达显著高于对照组(P<0.01),且与P4组相比,添加RU486和H7后显著抑制了P4诱导的SBD2mRNA的表达水平(P<0.01)。P4以浓度和时间依赖性方式显著增加SBD2mRNA表达,并且诱导可能通过孕酮核受体(PR)介导的基因组途径以及PKC信号通路来提高绵羊输卵管上皮的先天免疫防御能力。     

雌激素受体与M2mAchR在成年雌兔背根神经节中的共存

为检测成年雌兔背根神经节中是否存在雌激素受体(ER)与M2型乙酰胆碱受体(M2mAchR)的分布与共存,采用免疫荧光双标记染色法对ER与M2mAchR在背根神经节中的分布情况进行了研究。结果显示,在成年雌兔背根神经节中:(1) ER分布主要以神经元为主。其中,ERα主要表达于中小型神经元,而ERβ则多分布于大中型神经元。(2)相较ER而言,M2mAchR分布更为广泛,除神经元外,神经纤维等组织上也有弱阳性表达。(3)两种ER与M2mAchR均有共存现象,但共存情况存在差异,ERα/M2mAchR主要共分布于中小型细胞,ERβ/M2mAchR主要共分布于大中型神经元。结果表明,首先,雌激素具有通过影响背根神经节部分神经元的活动而实现对躯体内脏感觉活动间接调节的条件。其次,在此影响的机制中,雌激素除可以直接作用于神经元上的受体之外,还具有与共表达的M2mAchR交互作用而实现的条件。为研究雌激素影响神经系统调控活动的机制以及背根神经节的神经内分泌调节机制提供了重要的形态学依据。     

Nalp3 MDA5和TLR7受体在青年鸡组织中的表达水平

天然免疫受体在机体抗病毒过程中发挥着重要作用。为了解Nalp3、MDA5和TLR7受体在青年鸡组织中分布特征,首先应用RT-PCR方法从18周龄鸡肝脏中分别扩增目的片段,建立实时荧光相对定量RT-PCR检测多种组织中Nalp3、MDA5和TLR7受体的表达谱及相对含量。结果表明,3种受体在不同组织中转录水平差异较大,其中Nalp3在肝脏和肾脏、TLR7在心、脾和肺脏中表达量相对较高,而MDA5在各组织中表达均较低。该3种受体在不同组织中转录水平的差异提示其识别的相对作用可能不同。     

肺泡上皮细胞减轻巨噬细胞抗结核分枝杆菌感染中TLR信号介导的炎症反应

本研究模拟体内肺泡的气液相环境,采用肺脏上皮细胞与巨噬细胞的气液相共培养模型,探讨肺脏上皮细胞对巨噬细胞抗结核分枝杆菌感染的免疫调节作用。建立人肺泡上皮细胞A549与人单核细胞U937分化而来的巨噬细胞的气液相共培养模型,利用人结核分枝杆菌H37Rv株分别感染A549细胞、U937细胞和共感染A549/U937细胞,然后利用定量反转录PCR(qRT-PCR)、ELISA和Western blot检测巨噬细胞U937中的Toll样受体(TLR)信号分子及其下游炎症因子的表达变化。结果显示,H37Rv分别感染共培养模型中的A549细胞和U937细胞都能明显上调U937巨噬细胞中TLR信号分子TLR2、TLR4、TLR6、TLR8、MyD88和TRAF6,及其下游炎症因子NFκB、TNFα、IL-1α、IL-2、IL-6、IL-10和IL-12α的表达;但当H37Rv共感染上皮细胞和巨噬细胞,H37Rv诱导的U937巨噬细胞的上述因子表达较单独其感染的巨噬细胞显著下降。结果表明,在上皮细胞和巨噬细胞共培养体系中,结核分枝杆菌H37Rv分别感染人A549上皮细胞和U937巨噬细胞都能激发巨噬细胞的TLR信号及其下游的炎症反应,但2种细胞共感染H37Rv,上皮细胞感染后能够降低巨噬细胞的TLR信号活性,并减轻后者的炎症反应。由此可见,肺泡内上皮细胞与巨噬细胞之间可能存在某种相互调控机制,避免抗感染过程中的过度炎症反应以保持肺泡内细胞的组织及其功能的稳态。     

丁酸对乳腺组织基因表达的调控作用及其机制

丁酸是重要的短链脂肪酸,可作为信号分子结合其受体在机体发挥一些重要的生理作用,如调节乳腺、肝脏及脂肪组织的脂质代谢。丁酸的作用机制是多方面的,其中许多机制与其参与基因表达的调控作用有关。丁酸不仅调节某一个基因的表达,还参与信号通路及基因网络的调节。本文综述了丁酸作为重要的乳成分合成前体物、组蛋白去乙酰酶(DHAC)抑制剂、G蛋白偶联受体的配体对乳腺组织基因表达的调控作用及其相关机制。     

猪孕烷X受体基因真核表达载体的构建与表达

为构建猪的孕烷X受体(PXR)基因真核表达质粒,用RT-PCR技术从新鲜猪肝中扩增到猪孕烷X受体(pgPXR)基因,将其连接到真核表达载体pCI-neo中,得到重组质粒pCI-pgPXR。对该重组质粒进行PCR、测序及酶切鉴定后,采用脂质体法将其转染到人肝癌细胞HepG2细胞,用RT-PCR和双荧光素酶检测系统进行鉴定。结果表明,猪孕烷X受体基因真核表达质粒pCI-pgPXR构建成功,可在HepG2细胞中表达,为猪孕烷X受体的药理学和毒理学研究奠定了基础。     

犬嗅觉系统及其受体研究进展

从犬的嗅觉系统形态学特征、嗅觉传导通路、犬嗅觉系统受体等相关领域的研究进展进行了简要综述,并对犬嗅觉系统的科学利用和未来的研究方向进行了探讨和展望。     

RNA干扰抑制ST细胞Ⅰ型干扰素受体-2表达的研究

应用RNA干扰技术建立猪睾丸(ST)细胞Ⅰ型干扰素受体-2(IFNAR-2)基因knock down模型。采用FuGENE HD转染剂将pSiCMVE1、pSiCMVE2和pSiCMVE3干扰载体分别转染ST细胞,经荧光定量PCR和Western blot分别检测IFNAR2mRNA和蛋白水平表达变化。结果显示,与对照组比,转染干扰载体组均可明显降低IFNAR2 mRNA和蛋白的表达(P0.05)。RNA干扰技术能够有效抑制IFNAR2基因的表达,为进一步研究IFNAR2基因的生物学功能提供可靠的手段,为研究IFNAR2在病毒感染中的作用奠定基础。     

Expression Analysis of C-type Natriuretic Peptide and Its Receptor in Buffalo Follicles

In order to investigate the expression pattern of C-type natriuretic peptide（CNP）and its receptors（NPR）in buffalo follicles,firstly,the mRNA expression level of ANP,BNP,CNP,NPR1 and NPR2 in ovary were assayed by Real-time quantitative PCR;Secondly,the protein expression of CNP and NPR2 in buffalo follicles were detected by immunohistochemical stainning method;Lastly,the mRNA expression level of CNP and NPR2 in granule cells and cumulus cells were assayed by Real-time quantitative PCR.The results showed that CNP gene and its receptor NPR2 mainly expressed in buffalo ovary,the protein of CNP and NPR2 expressed in all stages of follicles,CNP mainly expressed in mural granulosa cells and NPR2 primarily presented in cumulus cells,the mRNA expression of CNP gene in granule cells was significantly higher than cumulus cells（P<0.05),whereas the mRNA expression of NPR2 gene in cumulus cells was significantly higher than granule cells（P<0.05).In conclusion,among the main members of natriuretic peptides and its receptors,CNP and NPR2 presented strong expression in buffalo ovary.CNP mainly expressed in mural granulosa cells,but NPR2 primarily presented in cumulus cells which arounding oocytes.