白杨细胞质遗传的细胞学机理(Ⅱ)——质体和线粒体在生殖细胞和营养细胞中的分布与变化

应用电子显微技术,观察白杨派树种毛白杨、毛新杨、银腺杨、中国山扬花粉发育中质体和线粒体在生殖细胞、营养细胞中的分布与变化.结果表明:在小孢子第1次有丝分裂时质体由于极性分布,导致早期生殖细胞的细胞质内缺少质体,为白杨派树种质体母系遗传提供了确切的细胞学证据;线粒体在花粉发育过程中一直存在.同时,细胞学观察发现银腺杨少数...     

鸡 CVH启动子调控的绿色荧光蛋白报告载体的构建及鉴定

探索建立一种用绿色荧光蛋白对鸡原始生殖细胞进行标记分离的方法.克隆并测序鸡原始生殖细胞特异表达基因cvh1.6kb启动子序列.序列分析表明它含有类似于TATAbox和CAATbox的元件,在其远端上游区域还有多个GC富含区.将cvh基因启动子亚克隆到绿色荧光蛋白表达栽pegfp-1的多克隆位点,成功构建表达栽体pcvh-egfp.重组质粒在脂质体Lipofectamine<''TM>2000介导下分别转染鸡X期胚盘细胞和鸡胚成纤维细胞,并于转染后12h在荧光显微镜下观察转染效果.实验结果显示:在胚盘细胞转染后12h可观测到绿色荧光表达,转染后24h荧光细胞增多,细胞形态均呈圆形、体积较大;在鸡胚成纤维细胞未检测到gfp表达.实验结果说明,由cvh基因启动子控制下的gfp可在X期胚盘细胞特异表达,为利用流式分离技术PGCs标记分离、纯化研究奠定基础.     

鹌鹑早期原始生殖细胞迁移和聚集规律的研究

本研究旨在观察鹌鹑早期原始生殖细胞的迁移和聚集规律,为分离PGCs,并将其应用于转基因技术提供依据。运用QH1单抗标记特异性的识别鹌鹑的PGCs,检测早期各个阶段PGCs的分布和数量。研究表明:鹌鹑的原始生殖细胞(PGCs)起源于胚盘暗区,而后逐渐迁移至明区、生殖新月区。孵化27h,已有少量PGCs分布于明区的血管中。到孵化36h时,有大量的PGCs聚集在明区血管网中,左右两侧都有。孵化45h时,从头部到脐肠系膜PGCs均有散在和聚团分布,并主要聚集在头部间充质的血管中。PGCs在各个时期的数量存在差异,有2个增殖高峰期,即原条期(孵化6h)和十体节期(孵化36h)。QH1单抗可鉴定早至未孵化期的鹌鹑原始生殖细胞,PGCs在早期胚盘中是随机散在分布的,而且具有2个增殖高峰期。     

离心对蒺藜苜蓿花药愈伤组织生长和分化的影响

以蒺藜苜蓿杂交F1代花药为材料,检测了离心力、离心时间对不同基因型花药愈伤组织诱导、生长及分化的影响。结果表明：离心能促进花药愈伤组织的形成;对A基因型花药的诱导作用更明显;不同离心力处理的花药愈伤组织诱导率差异极显著（P<0.01）,其中1000×g,2 min的效果最好;离心对愈伤组织的生长无明显影响,但对抗氧化酶的活性强弱有影响;随离心力的增大,过氧化物酶（POD）的活性逐渐增强,其变化趋势与过氧化氢酶（CAT）和超氧化物歧化酶（SOD）的相反。     

抗苗勒氏管激素(AMH)对卵巢功能的调节

1947年有实验证实，在雄性胎儿的发育过程中有一不同于睾酮的因子引起苗勒氏管的退化，此物质即为抗苗勒氏管激素(AMH)。AMH是与转化生长因子(TGFβ)相关的分子量为140KDa二聚糖蛋白，并与抑制素(Inhibins)、活化素(Activins)、骨形态形成蛋白(BMPs)、生长分化因子((JDFs)等，共同构成TGFβ超家族。在雄性，从胎儿至发情期的睾丸     

水牛原始生殖细胞(PGCs)的分离培养及生物学特性的研究

以水牛胎儿为材料,从生殖腺中分离培养出牛原始生殖细胞,并对水牛原始生殖细胞的分离与克隆的影响因素进行了探讨。结果发现:(1)分离培养出的原生殖细胞(PGC s)呈集落状生长,细胞堆积密集,细胞之间界限不清,细胞与周围的成纤维细胞界限明显;未分化的细胞表达碱性磷酸酶(AKP)以及O ct-4转录因子;(2)收集妊娠29~100 d牛胎儿28例,从生殖嵴(腺)或类似物中分离克隆水牛PGC s,23例出现PGC s细胞集落。其中胎龄小于45 d(<3.0 cm)和45~55 d(3.0~5.0 cm)各7例,全部出现PGC s细胞集落;55~70 d(5.0~9.0 cm)9例,有7例出现PGC s细胞集落,大于70 d的5例,有2例出现出现PGC s细胞集落。结果表明,水牛原生殖细胞具有多能性特性,胎龄小于55 d的水牛胎儿易于分离培养形成PGC s集落。     

胚胎生殖细胞体外培养体系研究进展

本文简述了胚胎生殖细胞(Embryonic GermCells，EG细胞)生物学特性，原始生殖细胞生存的维持需要有饲养层或应用条件培养基，现在大多数的培养要加入细胞因子以维持其生存和增殖。本文作一简述。     

微量元素对种畜繁殖性能的影响

微量元素是相对于常量元素来说的,它们在动物日粮组成中占的比重很小,但却是动物机体行使正常的功能所不可缺少的营养成分。其对动物的整个生殖生理过程(从生殖细胞的形成到幼畜的生长发育)有着极重要的影响。缺乏微量元素的成年动物的生殖器官会发生病理学变化,种畜出现性机能减退和精液质量下降,母畜不易妊娠、乳腺损害、产下无生命力幼仔等不利现象。研究认为,微量元素缺乏对繁殖力的影响主要是引起内分泌系统激素分泌失调、酶活性降低以及生殖器官的组织结构变化,从而导致繁殖力下降。微量元素分为无机态矿物元素和有机态微量元素。1无…     

H2A变体在小鼠不同时期雄性生殖细胞核质区的分布

【目的】了解小鼠雄性生殖细胞中macro H2A、H2A.Z和H2A.X 3种组蛋白变体变化与其发育特征间的联系,为揭示原始生殖细胞（PGCs）的发育机理及其分子调控机制奠定基础。【方法】以C57BL/6J小鼠胚胎的中肾和生殖嵴为试验材料,通过免疫荧光染色技术检测11.5dpc、12.5dpc和13.5dpc不同发育时期含有PGCs的组织石蜡切片及单细胞中macro H2A、H2A.X和H2A.Z变体的分布情况。【结果】macro H2A变体在11.5dpc胚胎时主要存在于细胞质中,12.5dpc时在细胞质中的表达增强,但进入生殖嵴后（13.5dpc）表达消失;H2A.X变体在11.5dpc和12.5dpc时存在于PGCs的核质区,13.5dpc时主要存于细胞质,且呈聚集分布;H2A.Z变体在11.5dpc时在PGCs的核质区均有存在,12.5dpc和13.5dpc时主要分布在细胞核,且表达明显增强。【结论】随着PGCs的不断迁移、增殖与分化,macro H2A、H2A.X和H2A.Z 3种组蛋白H2A变体在细胞核质区的分布及表达情况也发生变化,即H2A变体分布特征与PGCs的性别分化及其有丝分裂停止相关。     

鸡的原生殖细胞(PGCs)体外操作及其研究进展

鸡的PGCs作为生殖细胞的原始细胞在最近几十年里已成为世界和科技开发的热点之一。目前，国际上已有比较成熟的PGCs的提取技术、鉴定技术、冷冻保存技术和移植技术，随着对PGCs的研究的深入，它将会有更为广阔的应用前景。