柠檬酸和琥珀酸提取牡蛎匀浆液中镉的研究

以琥珀酸和柠檬酸提取牡蛎匀浆液中的镉,并利用单因素试验和正交试验优化提取条件。结果表明,有机酸的pH对牡蛎匀浆液中镉的提取率影响最大,其次是料液比和时间。浓度和温度的影响因有机酸类型不同而有差异。琥珀酸提取镉的最佳条件如下：时间为2 h,温度为35 ℃,酸浓度为0.02 mol/L,料液比为1∶15,pH为2.0;柠檬酸提取镉的最佳条件如下：时间为2 h,温度为35 ℃,酸浓度为0.04 mol/L,料液比为1∶15,pH为2.5。在最佳条件下两种有机酸对牡蛎匀浆液中镉的提取率达到90.2%～91.8%。     

琥珀酸丝状杆菌RT-PCR方法的建立

[目的]了解牛瘤胃内微生物的变化。[方法]以琥珀酸丝状杆菌为对象,根据16S rRNA序列分别设计引物。从牛瘤胃液提取总DNA,扩增琥珀酸丝状杆菌的DNA片段,并连接在pDM-18T载体上,经PCR和测序鉴定后,以不同稀释度的重组质粒为模版进行RT-PCR。[结果]扩增的目的片段与已知的菌种相应片段的同源性为100%。以不同稀释度的重组pMD-18T为模板建立的RT-PCR扩增曲线有明显差异,绘制标准曲线的相关系数接近1,熔解曲线呈单一峰值。[结论]成功建立了琥珀酸丝状杆菌的实时荧光定量PCR方法,为进一步研究瘤胃内微生物变化奠定基础。     

饲粮添加琥珀酸对滩羊肉品质及肌纤维类型的影响北大核心CSCD

为探究饲粮添加琥珀酸对滩羊肉品质及肌纤维类型的影响,选择年龄(5月龄)和体重[(33.00±0.69)kg]相近的健康滩羊公羔36只,随机分为4组,每组9只,单栏饲养。在干物质基础上,4组滩羊饲粮琥珀酸添加水平分别为:0(对照组)、0.5%(试验Ⅰ组)、1.0%(试验Ⅱ组)和2.0%(试验Ⅲ组)。饲喂期为70 d,其中预试期10 d,正试期60 d。饲养试验结束后对每组屠宰5只滩羊,取背最长肌检测。结果显示:试验Ⅰ组和试验Ⅱ组的蒸煮损失和脂肪亮度(L)值显著低于对照组(P<0.05)。3个试验组的Ⅰ型、Ⅱa型和Ⅱb型肌纤维直径以及Ⅰ型和Ⅱa型肌纤维横截面积均极显著低于对照组(P<0.01),Ⅰ型肌纤维密度显著高于对照组(P<0.05),Ⅱa型肌纤维比例极显著低于对照组(P<0.01)。3个试验组4种类型的肌球蛋白重链(MyHCs)基因MyHCⅠ、MyHCⅡa、MyHCⅡb和MyHCⅡx的mRNA相对表达量均极显著低于对照组(P<0.01)。综上可知,饲粮添加琥珀酸可以降低滩羊背最长肌肌纤维中MyHCs基因的表达,调节肌纤维类型的转化,并通过调节肌纤维组织学特性影响肉品质。     

顺式环氧琥珀酸水解酶酶活的快速测定方法

在对产顺式环氧琥珀酸水解酶（ESH）的细胞超声破碎的基础上,通过正交实验对细胞中ESH生物转化生产L(+)-酒石酸过程中的底物浓度、酶浓度、转化时间进行了分析,建立了一种快速测定ESH酶活的方法,即1 g湿细胞,30 mL 0.2 mol/L的顺式环氧琥珀酸二钠（ES）,置于37℃保温转化10 min后,利用 HPLC测定酒石酸含量。此方法具有快速、准确和细胞用量少的特点,可用于菌种选育、发酵过程检测、发酵条件优化及工业生产。     

三种粗精比日粮对产琥珀酸优势放线杆菌体内外发酵的影响

用从健康奶牛瘤胃液中分离的产琥珀酸放线杆菌3株即HL1、HL2、HL3,进行体内外发酵试验。体外发酵试验是按瘤胃液是否添加菌株分为对照组(C),添加HL1组(T1),添加HL2组(T2),添加HL3组(T3),以便筛选出产酸能力最强的菌株。体内发酵试验是将筛选出产酸能力最强的菌株添加到粗精比60∶40组(T4),粗精比50∶50组(T5),粗精比40∶60(T6)日粮中,对照组(C)为不添加菌株的各自日粮,检测该菌株在日粮变化的情况下在瘤胃中产酸的能力。试验结果显示:(1)在体外发酵试验中,三组pH均呈先下降后上升的趋势,均明显低于C(p0.05);T1组中乙酸、丙酸、丁酸浓度均显著高于C、T2和T3(p0.05),而T2和T3却不显著高于C(p0.05);T1组和T3组乳酸浓度明显低于C(p0.05)。(2)在体内发酵试验中,T4组与自C相比,pH显著降低(p0.05),丙酸、丁酸浓度显著升高(p0.05),乙酸和乳酸浓度无明显变化(p0.05);T5组与自C相比,pH未明显降低(p0.05),乙酸、丙酸、丁酸浓度显著升高(p0.05),乳酸浓度显著减少(p0.05);T6组与自C相比,pH明显降低(p0.05),乙酸、丙酸、丁酸浓度显著升高(p0.05),乳酸浓度未显著降低(p0.05)。研究结果表明,筛选出的最强的产琥珀酸放线杆菌(HL1)体内外均能提高乙酸、丙酸、丁酸等挥发性脂肪酸浓度,降低乳酸的浓度,对反刍动物的能量代谢和酸中毒具有一定的调节作用。     

Changes of Reactive Oxygen Species and Related Enzymes in Mitochondria Respiratory Metabolism During the Ripening of Peach Fruit

The fruits of peach cultivar Yuhua 3 were used as materials to investigate the changes of active oxygen and related enzymes in mitochondria respiratory metabolism during ripening of peach fruit, involving their influence on the proceeding of peach fruit senescence. The results showed that the large decrease in firmness occurred between maturity II and IV. The decrease in firmness coincided with an increase in respiratory intensity. Obvious peaks of respiratory intensity lagging to the rapid change of fruit firmness could be shown during peach ripening. Reactive oxygen species （ROS） had a cumulative process and positively correlated with respiratory intensity. During peach ripening, the content of Ca^2＋ increased, the activities of succinic dehydrogenase （SDH）, cytochrome C oxidase （CCO）, H＋-ATPase, and Ca^2＋-ATPase decreased varying in different degree at the later step of ripening. These suggested a close relationship existed between ROS metabolism and mitochondrial respiration, namely, both ROS metabolism and mitochondrial respiration probably played important roles in ripening and senescing of peach fruit.     

不同油脂日粮中添加RRR-α-生育酚琥珀酸酯对肉鸡生产性能、抗氧化和免疫功能的影响

本试验旨在研究不同油脂日粮中添加RRR-α-生育酚琥珀酸酯(α-TOS)对肉鸡生产性能、抗氧化和免疫功能的影响.选用600只1日龄AA肉鸡,随机分为10个处理,每个处理6个重复,每个重复10只鸡.试验采用2× 5因子设计,即2种油脂(新鲜油脂和氧化油脂)和5种α-生育酚类型,分别为30 mg/kg all-rac-α-生育酚醋酸酯(ToA1)、30 mg/kg RRR-α-生育酚醋酸酯(TOA2)及15、30、60 mg/kg α-TOS(TOS1、TOS2和TOS3).试验期为42 d.结果表明:1)α-TOS和氧化油脂显著影响1～21日龄肉鸡的料重比,对其他生产性能无显著影响(P>0.05);2)随着α-TOS添加量的增加,不同油脂日粮肉鸡血清中三碘甲状腺原氨酸(T3)和促甲状腺激素(TSH)水平均升高,皮质醇显著降低,血清的抗氧化能力不同程度提高(P<0.05或P<0.01),丙二醛(MDA)含量显著降低和新城疫抗体效价升高(P<0.05);3)氧化油脂日粮使肉鸡血清激素水平、抗氧化酶活性和新城疫抗体效价均下降,低于同水平添加α-TOS新鲜油脂组(P>0.05).结果提示,氧化油脂日粮能诱导肉鸡产生免疫应激,并导致生产性能和抗氧化功能下降;日粮中添加α-TOS能一定程度上提高肉鸡生产性能、血清抗氧化功能及机体免疫功能,且在不同油脂日粮中均以60 mg/kg α-TOS添加组的作用效果最佳.     

母体妊娠期和哺乳期蛋白限饲对后代育肥猪肌纤维特性的影响

为探讨母猪妊娠期和哺乳期蛋白限饲对后代育肥猪肌纤维特性的影响,试验选用16头配种日期、系谱、体重、日龄等相近的纯种小梅山初产母猪(80 kg左右),采用单因子试验设计,根据在整个妊娠期和哺乳期饲喂不同蛋白水平(正常水平和限饲水平,限饲蛋白水平为正常蛋白水平的50%)的日粮,将16头母猪随机分为2组:限饲组和对照组,每组...     

温度对蜕壳后期三疣梭子蟹能量代谢酶活力的影响

为研究温度对三疣梭子蟹雌蟹钙化过程中丙酮酸激酶(PK)、己糖激酶(HK)和琥珀酸脱氢酶(SDH)活力的影响,在实验室条件下设18、22、26 ℃ 3 个温度水平,分别在梭子蟹蜕壳后1、2、8、16 h及完全硬化5个时间点取样,测定其肝胰脏、肌肉和鳃中HK、PK、SDH的活力。结果显示:①与22 ℃条件下相比,高温(26 ℃)和低温(18 ℃)下三疣梭子蟹肌肉中PK的活力在蜕壳后1～8 h明显升高,说明高温和低温条件下梭子蟹肌肉中的糖酵解速率加大;而肝胰脏和鳃中的PK活力的峰值出现在梭子蟹蜕壳后1～2 h,表明蜕壳后1～2 h这2种组织中有较大的糖酵解速率;②3个温度水平下,梭子蟹肝胰脏中HK的活力随钙化过程的进行而降低,蜕壳后1～16 h的活力显著高于完全钙化时的活力,说明蜕壳后的梭子蟹肝胰脏对葡萄糖的利用能力逐渐减弱,而其鳃中HK活力的变化趋势与肝胰脏中相反,说明梭子蟹的鳃对葡萄糖的利用能力随钙化过程的进行而提高,这种差异可能与不同组织在梭子蟹钙化过程中对葡萄糖的利用能力不同有关;③梭子蟹肝胰脏中SDH的活力在3个实验温度下蜕壳后16 h内呈逐渐升高的趋势,说明肝胰脏在钙化过程中三羧酸循环作用逐渐加强。此外,其肌肉和鳃组织中SDH的活力在3个实验温度下的峰值均出现在前8小时,并且低温(18 ℃)的峰值明显低于高温(26 ℃),说明在这段钙化时间中,相对于低温而言,梭子蟹的肌肉和鳃中有氧代谢的加强在高温条件下更显著。在钙化过程中,低温条件下三疣梭子蟹的糖酵解作用没有明显的变化,而三羧酸循环有较明显的减弱趋势,其中三疣梭子蟹肌肉和鳃中SDH的活力明显低于高温条件,表明低温确实可以延长其蜕壳后的软壳时间。     

母猪限饲对后代断奶仔猪肌纤维特性的影响

选用16头配种日期、系谱、体重和日龄等相近的纯种小梅山初产母猪,采用单因子试验设计,根据在整个妊娠期和哺乳期饲喂不同蛋白水平的日粮(正常水平和限饲水平,限饲蛋白水平为正常蛋白水平的50%),将16头母猪随机分为2组:限饲组和对照组,比较了2组母猪后代断奶仔猪背最长肌的肌纤维类型及面积、肌糖原含量、乳酸脱氢酶活性以及琥珀酸脱氢酶活性。结果显示:限饲后仔猪Ⅰ型、ⅡA和ⅡB型肌纤维面积均低于对照组,但差异不显著(P>0.05);限饲后仔猪Ⅰ型和ⅡA型肌纤维比例升高,但ⅡB型肌纤维比例降低,差异均不显著(P>0.05)。限饲后仔猪背最长肌中糖原含量显著高于对照组(P<0.05)。限饲后仔猪乳酸脱氢酶活性与对照组相比无显著差异(P>0.05)。限饲后仔猪琥珀酸脱氢酶活性显著低于对照组(P<0.05)。试验结果表明:母猪妊娠期和哺乳期蛋白限饲对后代断奶仔猪肌纤维结构未见显著影响,但降低肌肉有氧氧化能力,对肌肉代谢特性产生不利影响。