全文获取类型
收费全文 | 5382篇 |
免费 | 132篇 |
国内免费 | 337篇 |
专业分类
林业 | 237篇 |
农学 | 475篇 |
基础科学 | 194篇 |
246篇 | |
综合类 | 2430篇 |
农作物 | 265篇 |
水产渔业 | 120篇 |
畜牧兽医 | 1652篇 |
园艺 | 156篇 |
植物保护 | 76篇 |
出版年
2024年 | 29篇 |
2023年 | 87篇 |
2022年 | 108篇 |
2021年 | 154篇 |
2020年 | 110篇 |
2019年 | 147篇 |
2018年 | 77篇 |
2017年 | 122篇 |
2016年 | 171篇 |
2015年 | 170篇 |
2014年 | 267篇 |
2013年 | 264篇 |
2012年 | 415篇 |
2011年 | 445篇 |
2010年 | 435篇 |
2009年 | 431篇 |
2008年 | 440篇 |
2007年 | 345篇 |
2006年 | 304篇 |
2005年 | 288篇 |
2004年 | 225篇 |
2003年 | 157篇 |
2002年 | 125篇 |
2001年 | 107篇 |
2000年 | 93篇 |
1999年 | 56篇 |
1998年 | 40篇 |
1997年 | 32篇 |
1996年 | 26篇 |
1995年 | 19篇 |
1994年 | 29篇 |
1993年 | 28篇 |
1992年 | 25篇 |
1991年 | 21篇 |
1990年 | 21篇 |
1989年 | 14篇 |
1988年 | 4篇 |
1987年 | 4篇 |
1986年 | 3篇 |
1985年 | 4篇 |
1983年 | 1篇 |
1981年 | 1篇 |
1980年 | 1篇 |
1957年 | 3篇 |
1955年 | 1篇 |
1953年 | 2篇 |
排序方式: 共有5851条查询结果,搜索用时 155 毫秒
991.
EPSPS基因的克隆及油用亚麻表达载体的构建 总被引:2,自引:2,他引:0
以抗草甘膦油菜基因组DNA为模板,PCR扩增抗草甘膦油菜的5-烯醇式丙酮酸莽草酸-3-磷酸合成酶(EPSPS)基因,构建植物表达载体pBI121-EPSPS,并导入农杆菌进行检测.结果表明:扩增获得EPSPS基因全长1 377bp,共编码459个氨基酸.测序结果表明,其与美国Monsanto公司获得的专利(US5633435)中已知的CDS序列完全一致,表明成功构建了EPSPS植物表达载体,并将其导入农杆菌菌株LBA4404中. 相似文献
992.
马铃薯光诱导型茎叶特异表达启动子ST-LS1的克隆与功能分析 总被引:1,自引:0,他引:1
叶片是植物光合作用器官,在能量固定和利用中具有重要作用,研究光诱导型茎叶特异表达启动子的作用元件及其功能对于其调控基因的表达研究具有重要的理论意义和应用价值。本研究用PCR技术从马铃薯(Solanum tuberosum L.)基因组中分离了光诱导型茎叶特异表达启动子ST-LS1的1556bp序列,序列分析表明,该片段与已报道的ST-LS1启动子(Gen Bank accession No.X04753.1)有99.68%的同源性,包括参与芽的特定表达和光反应顺式作用元件as-2-box、光效应顺式作用元件G-box等。将该片段与GUS基因融合,构建了植物表达载体pBⅠ121-ST-LS1,应用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法转化烟草(Nicotiana tabacum)获得了转基因植株。用qRT-PCR和GUS活性组织染色检测转基因烟草植株,结果表明,在ST-LS1启动子驱动的GUS转基因烟草植株的叶和茎中能够检测到GUS基因的表达,根中则检测不到;对黑暗、恒温光照培养、自然光条件处理20d后的转基因植株分析表明,在黑暗处理的转基因植株中GUS基因无表达,而在自然光条件处理转基因植株的叶和茎中GUS基因的表达高于恒温光照培养的转基因植株。结果可为应用基因工程改良农作物品种提供理论和应用依据。 相似文献
993.
由大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)引起的棉花黄萎病是制约我国棉花生产的首要病害,严重影响棉花的产量与品质。为研究棉花与黄萎病菌互作的分子机制,本研究以国审棉百棉1号为材料,提取被大丽轮枝菌侵染的棉花根部总RNA,检测质量并用DNase Ⅰ处理后,用RNA 5'末端的模板转换方法,即SMART技术合成双链cDNA,再经酶切、过柱纯化去除短片段后,连接至pGADT7载体上构建棉花cDNA文库。VdSCP7是定位于寄主细胞核的大丽轮枝菌效应因子,能激发棉花的免疫反应,增强棉花抗病性。以大丽轮枝菌cDNA为模板扩增VdSCP7,产物纯化后重组到载体pGBKT7上构建诱饵载体pGBKT7-SCP7。诱饵载体经酶切及测序鉴定后,转化到酵母AH109中,鉴定诱饵蛋白毒性并检测诱饵载体是否存在自激活活性。结果表明,获得了库容量为2×106 CFU的棉花cDNA文库,文库片段多样性良好,文库重组率约94%,质粒文库滴度约2.0×109 CFU·mL-1,满足酵母双杂交cDNA文库构建要求。酶切及测序结果表明,诱饵载体pGBKT7-SCP7构建成功且经过鉴定后无毒性、无自激活活性。本研究结果为棉花抗黄萎病基因的筛选及VdSCP7和棉花互作机制的解析奠定了基础。 相似文献
994.
重组基因工程乳酸菌的研究进展 总被引:3,自引:1,他引:2
王春凤 《吉林农业大学学报》2008,30(4)
乳酸菌作为人和动物体内的正常菌群,具有诸多益生功能.随着分子生物学研究的不断深入,重组基因工程乳酸菌研究取得了较快进展.在构建表达外源功能性基因的重组基因工程乳酸菌、表达保护性抗原蛋白质用以递呈黏膜免疫抗原的过程中,乳酸菌质粒载体起到了至关重要的作用.电转化技术的应用,简化了操作过程,推动了重组基因工程乳酸菌的研究与应用. 相似文献
995.
抗菌肽MagaininⅡ基因穿梭表达载体的构建 总被引:2,自引:2,他引:0
采用SOE法人工设计并合成抗菌肽MagaininⅡ基因。按正确的阅读框架定向克隆至高效穿梭表达载体pPICZαA上,经PCR鉴定及序列分析,所转化的大肠杆菌JM109菌落中含有插入MagaininⅡ基因的重组质粒pPICZαA-Mag,结果表明成功构建了抗菌肽MagaininⅡ基因穿梭表达载体pPICZαA-Mag。 相似文献
996.
997.
998.
999.
化学农药防治具有及时、快速、高效、省时、省工、方便、低成本等诸多优点,仍然是当前农作物生产中病虫害防治难以替代的主要手段。但是,化学防治容易造成蔬菜等农作物被农药污染,严重威胁着人民群众的身体健康。如何安全使用农药,既能充分发挥农药在作物病虫害防治中的巨大作用,又可消除农药对农产品的污染是多年来科技界着力研究的课题。 相似文献
1000.
分析番茄的EST数据库,获得一条在番茄果实中表达的EST序列CYP71,通过RT-PCR分析表明,该基因在番茄的叶、花、果实中均有表达,其中幼果中表达最强,并受到乙烯的负调控,推测可能与果实的发育成熟相关.进而通过RACE(rapid amplification of cDNA ends)的方法获得了全长为1 637 bp的番茄CYP71基因(GenBank accession No.GQ370622).该片段包括一个完整的开放阅读框(1488 bp),编码495个氨基酸.通过系统进化树分析,属于CYP71家族.将番茄的CYP71基因定向克隆到植物表达载体pBI121中,获得CYP71基因的正、反义植物表达载体pBI121-CYP71s和pBI121-CYP71as,为深入研究该基因的功能奠定基础. 相似文献