龙眼体胚发生早期miR166初级体的克隆与表达分析

为了解龙眼miR166初级体基因Pri-miR166 S53结构特点及其前体和成熟体在龙眼体胚发生早期的表达模式,采用SMART~(TM) RACE试剂盒和PCR扩增技术克隆龙眼体胚早期miR166基因的初级体(Pri-miR166 S53),确认其转录起始位点,并预测其含有的潜在ORF;利用龙眼基因组数据库提取其启动子序列,预测其含有的顺式作用元件;用实时荧光定量PCR对龙眼体胚发生早期及不同激素处理下的胚性愈伤组织中miR166基因的前体(Pre-miR166 S53)和成熟体(miR166a.2)表达模式进行分析。结果表明:获得长317 bp的Pri-miR166 S53基因初级体序列,对其进行翻译,得到一条长13个氨基酸序列的miPEP(MLCFVDALFLIST)。利用生物信息学软件分析Pri-miR166 S53基因的启动子序列发现,除了具有TATA/CAAT-box外,还含有生长素、脱落酸、乙烯、水杨酸、茉莉酸甲酯及spl、HSE等特异作用元件。实时荧光定量PCR分析表明,在2,4-D调控的龙眼体胚发生早期过程中,从胚性松散型愈伤组织发育到球形胚的过程中,Pri-miR166 S53基因的前体pre-miR166 S53和成熟体miR166a.2都表现为下调趋势;而在无2,4-D调控的龙眼体胚发生早期中,pre-miR166 S53和miR166a.2表达模式不同。此外,pre-miR166S53随ABA和乙烯处理浓度升高呈下调表达,而对不同浓度2,4-D处理无应答;miR166a.2随2,4-D、ABA处理浓度升高呈下调表达,而在乙烯处理下呈上调表达。上述研究结果提示miR166前体和成熟体在对外源激素应答的模式上并不呈简单线性相关,可能存在多层次、多方位的调控。     

重大检疫性害虫玉米根萤叶甲的种特异性SS-COⅠ快速检测技术研究

玉米根萤叶甲在欧洲和美国是一种严重为害玉米的入侵性害虫,传播速度快,侵入我国的可能性极高。本文针对其难以快速准确进行形态鉴别的问题,以玉米根萤叶甲为研究对象,以其他9种/生物型叶甲总科常见害虫为参照,采用基于COⅠ基因的种特异性PCR方法(species-specific COⅠ, SS-COⅠ),研究其快速分子检测鉴定技术。通过提取10种/生物型叶甲DNA和通用型引物扩增测序,获得其基因片段的碱基序列,并比对分析设计1对玉米根萤叶甲特异性引物(DvvZCE1/DvvZCF1),其扩增片段为462 bp。种特异性检验结果显示,该对引物只对玉米根萤叶甲的COⅠ基因具有扩增能力,对其他常见叶甲类害虫,包括玉米双斑长跗萤叶甲、榆黄毛萤叶甲、黄曲条跳甲、油菜蚤跳甲、黄点直缘跳甲、莲草直胸跳甲、枸杞负泥虫以及褐足角胸叶甲的棕黄型和蓝绿型没有扩增能力,该对引物不仅对成虫有很好的扩增效果,对单粒卵、2龄幼虫以及成虫残体(包括触角、头部、胸部、腹部、前足、后足)也具有同样的扩增效果,其最低检出阈值为102.73 pg/μL(相当于1/122 880头雌性成虫)。玉米根萤叶甲特异性SS-COⅠ检测技术在其口岸检疫,以及有效阻截中具有重要意义。     

奶牛热应激的防治措施

奶牛热应激综合征是指奶牛受到高温刺激时,所引起的机体非特异性防御反应和特异性障碍的全身性适应症。热应激可使奶牛的新陈代谢紊乱,生产性能、繁殖力、免疫防御机能下降,容易感染疾病。严重的热应激可导致奶牛中暑,甚至死亡。长期以来,奶牛热应激综合征一直影响着奶牛业的发展,给奶牛业带来很大损失。因此,夏季应采取必要的措施来防止奶牛热应激的发生。     

反义核酸的研究进展

反义核酸是近几年发展起来的抗病毒、抗肿瘤药物。反以核酸以其合理设计药物的可能性和精确的特异性广泛吸引了人们的注意,但反义核酸的研究并非如人们最初预想的那样简单。本文主要对反义核酸的作用机理、合成、必备条件、应用及发展前景等方面进行了综述,并就研究中需要解决的问题进行了讨论。相信伴随这些问题的解决,反义核酸很可能成为药典的一部分,为动物乃至人类疾病的治疗做出不可估量的贡献。     

羊应激性疾病的防治

应激是机体受到各种强烈的或有害刺激后出现的非特异性防御反应.生理情况下,应激反应持续时间短,有利于提高机体对外界环境的适应能力和维持内环境的相对稳定.在病理情况时,由于应激反应过强和持续时间过久,则可给机体造成病理性损害.由应激引起的以非特异性损害为主的疾病,称为应激性疾病.羊因运输应激诱发的主要疾病为感冒、支气管炎、腹泻、流行性眼炎、口疮等.     

两种怀药对黄河鲤幼鱼非特异性免疫的影响

<正>中草药富含多种营养物质、微量元素及生物活性物质,有提高动物机体的免疫力,抑菌、杀菌,保肝、保肾的作用,在鱼类集约化养殖中是一种新型的具有较大开发潜力的饲料添加剂。有研究表明,能增强动物     

饲料中添加核苷酸混合物对凡纳滨对虾幼虾非特异性免疫和抗氧化指标的影响

本试验旨在研究外源核苷酸混合物对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)幼虾非特异性免疫和抗氧化指标的影响.选取960尾初始体重为(0.43±0.01)g的凡纳滨对虾,随机分为8组(每组设3个重复,每个重复40尾虾),分别投喂在基础饲料中添加0(对照)、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0和1....