PEF辅助快速提取非特异性奶牛脾脏转移因子的实验研究

应用PEF成功从奶牛脾脏中提取非特异性转移因子，并与常规提取法和复合酶提取法进行了比较.经理化特性分析，奶牛脾脏转移因子是以低分子多肽（〈10kD）为主的混合物，含有少量核酸和氨基酸.实验表明，将物料溶解于6倍质量的磷酸盐（pH7．0）缓；中液中，在脉冲电场强度为25kV／cm，脉冲数为16μs，和流速为2mL／min的条件下，提取液中低分子多肽的含量有最大值9．85mg／mL.PEF提取率是常规方法的2倍，复合酶法的1．47倍.PEF法耗时短，操作简单，成本低，因此，PEF提取是一种很有希望的提取非特异性奶牛脾脏转移因子方法.     

表达新城疫病毒融合蛋白基因禽痘病毒重组体的构建

通过RT-PCR扩增新城疫病毒F基因,利用禽痘病毒复合启动子、SV40 PolyA终止信号序列构建F基因表达盒。将F基因表达盒与loxp-GFP-loxP序列串联插入禽痘病毒重组臂,构建了禽痘病毒转移质粒载体。在脂质体介导下转染CEF,获得了带有绿色荧光信号的重组病毒rFPVFGFP。通过二次转染,利用Cre-loxP位点特异性重组将重组病毒基因组的GFP自动去除,结果获得了只含新城疫病毒F基因表达盒的重组禽痘病毒rFPVF。试验结果表明,rFPVF复制稳定,表达的F蛋白具有免疫原性,能够刺激鸡只产生抗新城疫病毒的中和抗体。     

消除鹅禽流感血凝抑制试验中的非特异性凝集的方法探讨

将20份性状良好、抗体水平较高的皖西白鹅待检血清分成A、B、C三组，A组不作任何处理为对照组；B组56℃水浴30min；C组加入红细胞。试验结果是：对照组待检血清的抗体水平稍高于B、C组，但A组全部出现非特异性凝集，90％凝集达到第5孔；B组10％消除非特异性凝集，其余90％都凝集至第2孔；C组90％消除非特异性凝集，其余10％凝集至第1孔。     

鸡白痢沙门菌等位基因特异性PCR检测方法的建立

根据鸡白痢沙门菌与鸡伤寒沙门菌的rfbS基因在第237和第598位碱基的不同，设计和合成了等位基因特异性PCR引物，建立了快速检测鸡白痢沙门菌的PCR方法，并应用该方法对鸡白痢沙门菌临床分离样品进行了PCR鉴定。结果显示，该PCR方法能够特异性地鉴定鸡白痢沙门菌，检测灵敏度达100PgDNA。对35个经常规方法鉴定的鸡白痢沙门菌分离株应用等位基因特异性PCR方法进行鉴定，鉴定出33株鸡白痢沙门菌，符合率为94．3％。表明，建立的等位基因特异性PCR方法能够准确而快速地鉴定鸡白痢沙门菌。     

pH值胁迫下维生素C对大口黑鲈非特异性免疫的影响

用不同维生素C水平(添加量分别为0、500、1000、2000、4000mg/kg)的5种饲料喂养初始体重为19g左右的大口黑鲈45d,每个处理4尾,各处理3个重复,研究24h不同pH值胁迫下维生素C对大口黑鲈非特异性免疫的影响。结果显示:在酸性pH值(pH值为5.5)胁迫下,饲料中添加维生素C能促进大口黑鲈血清中溶菌酶和超氧化物歧化酶活力,与对照组相比差异不显著(P>0.05);在碱性pH值(pH值为10.5)胁迫下,饲料中添加维生素C能显著促进大口黑鲈血清中溶菌酶和超氧化物歧化酶活力,且随着饲料中维生素C添加水平的提高,大口黑鲈溶菌酶和超氧化物歧化酶活力显著上升。试验证明,维生素C作为抗应激增强剂能有效地提高大口黑鲈的非特异性免疫能力,从而提高其抗应激能力。     

猪应激带来的危害与诊治

近年来,猪因应激而引发的猝死、应激综合症等给养猪业带来的危害越来越被兽医界重视。应激是当畜体受到外界应激原的刺激时引起的一种非特异性生理反应。猪应激综合症是猪长期处在应激状态下,引起急性猝死或生产性能下降、免疫力减退、容易继发感染的一种病理症状。该症病猪屠宰后肉品质低劣,口感极差,不受市场欢迎,给养殖户造成很大的经济损失。1.1应激敏感型猪在临床实践中证实,该病与猪的品种有直接关系,多见于良种猪、瘦肉型和长速快的猪。1.2应激原常见的引起应激反应的应激原有细菌病毒感染、药物中毒、创伤疼痛、疫苗注射、惊恐、电…     

动物应激中的糖皮质激素辨析

应激(Stress)是指动物机体受到体内外环境变化的刺激时,机体所产生的非特异性全身反应。刺激只要达到一定强度,都能使机体产生两种反应:一种是针对刺激原的特异性反应;另一种是全身性的非特异反应。这种非特异的全身反应表现为:以交感-肾上腺髓质系统和下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴兴奋为主的神经内分泌系统的兴奋,从而影响整体代谢。近年,研究发现动物在内外环境变化的刺激下产生的一组特殊蛋白质———热应激蛋白(heatshockproteins,HSPs)。任何应激均可诱导机体细胞的HSPs合成增加,它能使动物迅速适应环境的变化,保护机体不受或少受损害…     

动物乳腺生物反应器的研究、发展及产业化

动物乳腺生物反应器(mammary gland bioreactor),又称动物个体乳腺表达系统,它属于转基因动物的范畴,其核心内容是通过各种转基因技术,将乳腺组织特异性启动子驱动的外源基因,在动物乳腺组织高效表达,在乳汁中生产目的产品。它是20世纪90年代初才出现的生物技术,通过回收奶就可以提取有重要价值的生物活性蛋白。在一般情况下,这种特异性表达方式更安全、可靠。本文主要简单介绍动物乳腺生物反应器的一些基本情况,以及我国的研究和产业化发展情况。1动物乳腺生物反应器的基本情况1.1定义乳腺生物反应器一般指用重组DNA技术和转基因技术,将…     

用鸭红细胞悬液消除非特异性凝集因子对鸭禽流感HI试验的影响

禽流感自1878年在意大利首次发生以来不断蔓延,近年来,在许多国家和地区出现暴发和流行,成为严重危害养禽业健康发展的一种主要家禽传染病。因此,加强禽流感的检测是预防和控制禽流感的重要措施。目前,基层单位大都采用微量红细胞血凝抑制试验(简称HI试验)来检测家禽禽流感血清     

兽用生物制品的分类及使用注意事项

兽用生物制品是利用微生物、寄生虫及其组分或代谢产物以及动物的血液、组织等材料为原料,通过生物学、生物化学及生物工程学的方法加工制成的,用于传染病或其他有关疾病的预防、诊断和治疗的生物制剂。广义的生物制品还包括各种血液制剂,肿瘤免疫、移植免疫及自身免疫病等非传染性疾病的免疫诊断、治疗及预防制剂,以及提高动物机体非特异性免疫力的免疫增强剂等;而狭义的兽用生物制品包括疫苗、免疫血清和诊断液。1兽用生物制品的分类本文所指的兽用生物制品是狭义上的,即为疫苗、免疫血清和诊断液。1.1疫苗根据制备方法和原料的不同,疫苗…