基于转录组分析筛选牛心朴子响应低温胁迫的转录因子家族

[目的]从转录水平分析牛心朴子在低温胁迫下的差异表达基因,筛选响应低温胁迫的转录因子家族,鉴定出牛心朴子低温胁迫响应的关键调控基因,为全面解析逆境胁迫响应分子调控网络及有效挖掘关键调控基因提供理论参考.[方法]通过高通量测序技术对低温胁迫(CT组)和常温处理(对照,CK组)的牛心朴子cDNA文库进行转录组测序分析,对差异表达基因进行功能注释和富集,鉴定出响应低温胁迫的转录因子家族,并选取4个差异表达的转录因子基因进行实时荧光定量PCR检测,以验证转录组测序结果的可信度.[结果]从CK组和CT组共获得30.50 Gb的原始数据,Cycle Q20平均值在96%以上,经数据过滤及去冗余后,拼接组装获得100006条Unigenes,但其功能注释率较低,有47082条至少在一个数据库中被功能注释,占Unigenes总数的47.07%;而在NR、NT、KO、SwissProt、PFAM、GO和KOG数据库中均被注释的Unigene有7070条,仅占Unigenes总数的7.06%.GO功能富集分析筛选到5545个差异表达基因,其中,上调表达基因2039个,下调表达基因3506个,分别富集到生物过程、细胞组分和分子功能三大类别中.从牛心朴子Unigene中共鉴定到83个转录因子家族的1826个转录因子,其中,以MYB转录因子家族成员数目最多,为136个(占7.45%).从差异表达基因中筛选到与低温胁迫有关的66个转录因子家族的550个转录因子,其中MYB、C3H、bHLH、AP2-EREBP、C2H2、NAC、bZIP、CCAAT和WRKY等转录因子家族均有大量转录因子能被低温胁迫诱导表达.基于实时荧光定量PCR的牛心朴子低温胁迫下转录因子基因表达水平检测结果与转录组测序分析结果基本一致.[结论]MYB、C3H、bHLH、AP2-EREBP、C2H2、NAC、bZIP、CCAAT和WRKY等转录因子家族成员在牛心朴子响应低温胁迫时发挥主导作用,同时各家族转录因子间存在共表达性或协同作用,通过复杂的转录调控网络发挥重要调节作用,进而提高牛心朴子对低温胁迫的耐受性.     

牛心朴子的光谱差异特征参量分析

牛心朴子(Cynanchum komarovii)是分布在西北干旱半干旱荒漠草原的主要毒害草之一。近年来,牛心朴子快速蔓延对当地畜牧业发展和草原生产力的影响日益严重。采用内蒙古阿拉善左旗典型样区内牛心朴子和其它沙地植物的野外实测光谱,通过叶片光谱、冠层光谱及群落样方光谱的对比分析,探讨牛心朴子与其它沙地植物的光谱差异性。结果表明,在350-2 500nm波段,牛心朴子叶片的光谱反射率均高于花的反射率,花的反射光谱未出现明显的蓝谷和绿峰。沙地背景对牛心朴子冠层光谱的影响强烈,冠层光谱是沙地与牛心朴子叶片光谱的综合表征。最大的红边斜率以及800-1 300nm明显的高反射率是牛心朴子与其它沙地植物冠层光谱的主要差异特征。根据不同盖度牛心朴子群落样方光谱的变化规律,选取4个特征参量与群落盖度进行线性回归分析表明:利用红边斜率进行群落盖度反演的效果最好,R~2为0.781 5。本研究可为牛心朴子分布遥感监测及其盖度定量反演提供科学依据。     

牛、马心脏血管铸型标本的制作与观察

用红蓝两种颜色的塑胶液,对心脏的心大、心中静脉,左、右冠状动脉进行灌注。凝固定型后,对左心房,左心室,肺静脉,主动脉及臂头动脉用红色塑胶进行铸型。用蓝色塑胶对右心房,右心室,肺动脉,前、后腔静脉进行铸型,待完全凝固定型后又经盐酸腐蚀,冲洗,修剪等过程制作出的牛、马心脏血管铸型标本保持了心脏原有的基本形态和血管立体结构。观察并与人的心脏血管铸型标本相比较,马、牛心脏血管铸型标本与人心脏血管铸型标本外观形态和血管立体构筑基本相同,有助于相关疾病的研究和教学。     

牛心朴子总生物碱对稻瘟病和灰霉病菌的抑制作用

采用PDA平板生长速率法,测定了牛心朴子提取液对稻瘟病、灰霉病的抑制作用和毒力。结果表明:提取液对两种病菌均有抑制作用,并随着提取液浓度的升高,对病菌菌丝生长的抑制作用也随之增强;添加附着剂的牛心朴子提取液无明显增强其抑制稻瘟病菌生长的作用;附着剂对低浓度牛心朴子提取液有增强其抑制灰霉菌生长的作用,对高浓度牛心朴子提取液则无明显增强其抑制灰霉菌生长的作用。     

加工柿饼优良品种牛心柿的标准化生产技术

1建园1.1园地选择与规划选择砂壤或壤土,肥力较高,浇、排方便,交通便利,水源、空气、土壤没有污染的地片建园。在我县应以西部青石山区为发展重点。以     

牛心朴子中毒病的防治研究

牛心朴子（Cynanchum komarovii)是属于萝摩纲萝摩科鹅绒藤属的多年生植物。近10年来，干旱少雨，少尘暴不断，使牛心朴子大量繁殖，据统计占可利用草场面积的10％。自1997年以来我旗部分苏木（镇）的骆驼，羊采食引起中毒，共计中毒骆驼196峰，中毒率为3．7％左右，死亡15峰，致死率为7．7％，其它的181峰骆驼也由于形成成瘾性，被迫淘汰处理，中毒羊396只，中毒率0．13％左右，死亡32只，致死率8．1％，治疗102只，治愈100只，治愈率98％。     

牛心朴杀鼠活性初报

通过试管和圆形滤纸预试法初步确定了牛心朴(Cynanchum komarovii)乙醇提取液中含有生物碱、酚类物质、鞣质、皂甙、黄酮、甾体(或萜类)、糖、多糖(或甙类)和强心甙等成分。杀鼠活性的测定结果表明,乙醇提取液在饵料中的含量为15％时,小白鼠的平均食毒量为39．04g／kg,对小白鼠的毒杀率为100％;饵料中牛心朴粉的含量为15％和10％时,小白鼠的平均食毒量分别为26．61g／kg和29．27g／kg,对小白鼠的毒杀率分别为100％和90％;提取液中的化学成分基本包括了牛心朴杀鼠的活性成分,且适口性较原粉为好。     

牛心包部分切除术的施行

对中、晚期化脓性心包炎的病牛,在进行心包切开引流术或心包导管引流术之后,待心包减压、循环功能及全身情况有所改善,心包腔感染得到较稳定的控制,能给增厚挛缩的心包创造较理想的手术条件时,方可进行心包切除术。1术前准备、保定与麻醉对病牛首先用粗针头作心包腔穿刺。一旦排出脓汁,采集样品送化验室作细菌检查,以便使用有针对性的抗菌药物,作心包腔冲洗或静脉注射。     

早熟牛心甘蓝新组合栽培技术研究

为给早熟牛心甘蓝新组合的品种审定及推广应用提供理论依据,以贵州省园艺研究所选育的早熟牛心甘蓝新组合(15N10JF-7×8N8CF-1)为试验材料,通过设计不同密度、不同施氮量得出适宜种植密度为40 cm×40 cm,施氮量为65 kg/667 m2,适宜无公害蔬菜的生产。     

牛心朴子细胞学特性的研究

以沙生植物牛心朴子为材料,对其细胞分裂过程进行跟踪观察并作染色体核型分析,结果表明,牛心朴子的染色体数目为2n=2x=24,染色体为二倍体,全组染色体总长度为51.75μm,核型公式为2n=24=24m,有1个随体,其染色体核型属于对称的1A型。