五日热巴尔通体RPA检测方法的建立

五日热巴尔通体(B. quintana)病原通过人虱的叮咬在人群中传播,导致间歇性发热,头痛及杆菌样血管瘤等临床症状。本研究以五日热巴尔通体gltA为靶标基因,建立重组聚合酶快速扩增方法(RPA)。通过与Bartonella henselae, Bartonella tribocorum, Bartonella vinsonii, Bartonella washoensis及Bartonella grahamii等不同菌种进行对比检测,证实本研究建立的RPA检测方法仅特异性识别五日热巴尔通体,无种间无交叉反应,该方法检测敏感性为10¹ copies/μL,与实时荧光PCR检测敏感性相同。因此,本研究建立的五日热巴尔通体RPA检测方法具备高特异性及敏感性的特点,对五日热巴尔通体菌的检测及疾病临床诊断具有重要意义。     

长期施肥对南方红壤碳库管理指数的影响

了解田间施肥措施对南方红壤碳库管理指数的影响具有重要意义,以湖北贺胜桥镇建立19 a的长期施肥试验小区为研究对象,研究了不施肥(CK)、施用有机肥(T1)、施氮磷钾肥(T2)和氮磷钾肥与秸秆配施(T3)4种处理对南方红壤有机碳和碳库管理指数的影响及差异.结果表明:(1)长期施肥能显著降低土壤容重,显著增加毛管孔隙度、毛...     

SWAT模型灵敏性分析模块在中尺度流域的应用——以密云县红门川流域为例

SWAT模型是基于水文过程的、具有很强物理机制的流域分布式水文模型。基于AVSWAT2005模型灵敏性分析模块,在典型中尺度流域——北京密云县红门川流域应用与验证。通过灵敏性分析,得到影响该流域产流模拟结果精度的主要参数因子,SCS径流曲线系数(CN2)、土壤可利用水量(SOL_AWC)、基流α系数(ALPHA_BF)的影响是显著的,是最敏感因子。同时调整参数值,采用1991-2006年的实测月流量数据对模型进行了校准和验证,结果表明:模型对月流量模拟的相对误差在模型校准期和验证期均小于15%,决定系数R2大于0.8,Nash-Suttcliffe系数Ens高于0.7,SWAT模型对红门川流域产流的模拟结果良好。因此,SWAT模型中的灵敏性分析模块可以应用在面积较小的中尺度流域,具有一定的推广意义。     

汽车侧门下垂性数值模拟及优化分析

针对车辆轻量化设计出现的门下垂的问题,提出了分析方法和判断标准。以某款轻量化设计的轿车出现抗下垂性能降低的问题为例,提出了优化小板件厚度并结合灵敏度方法来补偿性能的降低,对优化后结构分析显示侧门的抗下垂性能得到改善,并保证了改进结构的质量增加为最小。     

数字RT-PCR技术检测H3N2亚型猪流感病毒方法的建立

试验旨在利用新型荧光探针--分子信标,建立一种检测猪流感病毒的新方法。根据H3N2亚型猪流感病毒（swine influenza virus,SIV）的H3和N2基因的保守基因序列,分别设计并合成了特异性引物和分子信标探针,利用数字RT-PCR技术检测H3N2亚型SIV。结果显示,该数字RT-PCR检测方法与其他主要相关病毒均不发生交叉反应,重复性良好;对猪H3N2流感病毒而言,最低可检测到10⁶倍稀释的病毒株。数字RT-PCR方法能够对RNA模板定量分析。在H3N2 SIV的鉴定上,数字RT-PCR方法较实时荧光定量PCR方法更灵敏、准确。     

丽格海棠细菌性叶斑病病菌检测技术

对丽格海棠细菌性叶斑病菌基因组DNA进行PCR扩增,获得其ITS序列.依据该病菌与该属其他细菌ITS 序列的差异,设计特异性引物对XCB(2)/XCB(3),其扩增片段为400bp,由此建立了快速高效检测该病菌的PCR 技术体系.研究根据抗原抗体特异性结合的特点,制备了兔疫细菌抗体血清,建立了体外检测病原细菌的血清学方 法如琼脂糖双向扩散法及间接ELISA法,为丽格海棠细菌性叶斑病的诊断提供了新的重要手段.该研究还比较了 PCR和血清学检测技术的灵敏度差异,结果显示PCR技术检测灵敏度可达27pg/μL,高于血清学检测技术.     

四川省几种常见养猪生产系统经济效益的分析与比较

【目的】分析四川省3种养猪生产系统,DLY、PIC和土二杂的经济效益。【方法】通过建立利润方程计算和比较各生产系统的经济效益,同时对影响各生产系统的因素用差额法进行灵敏性分析。【结果】得出PIC系统的单位产品经济效益为375.72元,高于DLY系统的336.81元和土二杂系统的273.31元:得出影响系统的重要因素为,商品猪育肥期,育成期和保育期的饲料价格和饲料转化率,商品猪哺乳期成活率、父母代母猪妊娠期饲料价格、父母代母猪年产胎次、父母代母猪单胎产活仔数和商品肥猪价格。【结论】PIC系统获得的经济效益更高,本研究既分析了影响养猪经济效益系统的自身因素,又分析了市场行情对经济效益的影响,可为四川养猪生产提供一定的参考。     

胸膜肺炎放线杆菌诊断抗原的制备及初步临床应用

利用14个血清型的胸膜肺炎放线杆菌的标准菌株制备诊断抗原，通过玻片凝集试验，琼脂扩散试验和对流免疫电泳，以标准抗血清作为参考，检验各种诊断抗原的灵敏性和特异性。分别用凝集抗原、超声波处理抗原和酚水抗原对来自湖北、湖南、江西、河南、安徽5省猪场的155份送检血清进行检测。结果表明可以对送检血清快速、准确地进行鉴别诊断和血清分型。     

大熊猫轮状病毒可视化LAMP检测技术的建立及应用

根据大熊猫轮状病毒CH-1株VP4基因设计3对引物,建立大熊猫轮状病毒可视化环介导等温扩增(LAMP)检测技术,对其反应条件进行优化及特异性和灵敏度进行验证.结果 表明:用可视化LAMP方法检测大熊猫轮状病毒时,在62℃条件下,反应体系中加入终浓度为8 mmol/L Mg2+、0.6 mol/L甜菜碱、12 U Bst...     

非洲猪瘟病毒荧光定量PCR的建立及4种检测试剂盒的比较

为评估目前常用商品化非洲猪瘟荧光定量PCR检测试剂盒,参考OIE推荐的非洲猪瘟病毒(ASFV)荧光定量PCR方法合成引物和探针,建立非洲猪瘟病毒qPCR检测方法(OIE-qPCR);并与市面4种ASFV检测试剂盒进行了比较.以人工合成的ASFV p72基因TA克隆重组质粒为阳性标准品,OIE-qPCR可以检测到10～1...