牛传染性鼻气管炎病毒gE基因SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立

目的 建立1种特异、灵敏、高效的检测IBRV gE基因的荧光定量PCR方法,并为鉴别IBRV野毒株和gE基因缺失疫苗株的感染提供技术手段.方法 根据IBRV gE基因保守序列,设计一对引物,建立荧光定量PCR反应体系和反应条件,利用10倍梯度稀释病毒DNA进行荧光定量PCR扩增,以检测本试验建立的荧光定量PCR的灵敏度.用IBRV、牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒、MDBK细胞、牛血清等进行特异性检测.用模拟样品进行临床应用试验.结果 本试验建立的荧光定量PCR方法,其灵敏度约为70 DNA拷贝/μL,除了IBRV从其他病毒和样品未扩增出曲线,临床模拟样品检测结果为0.03TCID50.结论 本试验建立的荧光定量PCR方法具有特异性强、灵敏性高、快速,低污染等优点,因此临床上可以用于IBRV的检测和病原学调查.     

免疫学诊断试验结果的评估

介绍了一种合理评估免疫学诊断技术结果的教学方法。基于不同诊断技术的灵敏性、特异性以及某种疫病的经验感染率，分别给出了排除假阳性、假阴性及评估个体与群体诊断结果真正感染率的方法。     

鉴别液压油质量的几种简易方法

1对液压油的选择在整个液压传动系统中,其工作油液具有双重作用,一是作为传递能量的介质,二是作为润滑剂润滑运动零件的工作表面,因此油液的性能会直接影响液压传动的性能:如工作的可靠性,灵敏性,工况的稳定性,系统的效率及零件的寿命等。一般在选择油液时应满足下列几项要求:(1)粘温特性好。在使用温度范围内,油液粘度随温度的变化愈小愈好。(2)具有良好的润滑性。即油液润滑时产生的油膜强度高,以免产生干摩擦。(3)成分要纯净,不应含有腐蚀性物质,以免侵蚀机件和密封的元件。(4)具有良好的化学稳定性。油液不易变质,以防产生粘质沉淀物影…     

数字RT-PCR检测鲤春病毒血症的方法建立与应用

[目的]通过实时定量RT-PCR和数字RT-PCR两种方法的比对试验,建立快速检测鲤春病毒血症的数字RT-PCR方法。[方法]利用同一对引物和探针,以梯度稀释的方法测定两种方法针对SVCV的灵敏性、特异性及重现性。[结果]两种方法均能够检测出104倍稀释的SVCV,而数字RT-PCR可以检测出单个微滴中的SVCV,其灵敏度性高于实时定量RT-PCR。同时,两种方法的特异性都很强,对其他病毒,如传染性胰腺坏死病毒（IPNV）、传染性造血器官坏死病毒（IHNV）、病毒性出血败血病毒（VHSV）均未有扩增反应。两种方法的重现性也较好。[结论]数字RT-PCR方法比实时定量RT-PCR具有更高的灵敏度,在鲤春病毒血症的早期快速诊断方面具有重要作用。     

牛传染性鼻气管炎病毒的荧光PCR检测方法

为利用荧光定量PCR技术建立一种快速检测牛传染性鼻气管炎病毒的方法,根据牛传染性鼻气管炎病毒保守基因gB和gE分别设计2对引物及相应的Taqman探针,建立、优化反应体系后,利用10倍稀释法检验方法的灵敏度,建立相对定量标准曲线,并进行特异性检验.结果表明,2组荧光PCR的标准曲线相关性好,相关系数均为0.99,此方法特异性、灵敏性好.     

快速检测鲤春病毒血症荧光RT-PCR方法的建立与应用

本文建立快速检测鲤春病毒血症的荧光RT-PCR方法.利用同一对引物和探针,以梯度稀释的方法测定荧光RT-PCR法针对SVCV的灵敏性、特异性及重现性.荧光RT-PCR方法能够检测出104倍稀释的SVCV,灵敏度性高.同时,该方法的特异性很强,对其他病毒,如传染性胰腺坏死病毒(IPNV)、传染性造血器官坏死病毒(IHNV)、病毒性出血败血病毒(VHSV)均未有扩增反应.方法的重现性也较好.荧光RT-PCR具有较高的灵敏度特异性和重现性,在鱼类疫病的早期快速诊断方面具有重要作用.     

跨膜蛋白39A基因SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立及评价

为建立一种快速检测跨膜蛋白39A(TMEM39A)基因的方法,根据GenBank中登录的不同种属TMEM39A基因序列的保守区域,设计并合成1对荧光定量通用性引物,经过条件优化,建立了检测TMEM39A基因的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法。结果显示:标准品模板在3.937×10⁸~3.937×10³拷贝·μL^-1范围内呈良好的线性关系,R²可达0.999;该方法特异性较好,检测灵敏度可达3.937×10² 拷贝·μL^-1;组内和组间变异系数均小于1%,具有较高的重复性和稳定性;利用该方法能够检测出不同细胞中的TMEM39A含量,具有种属通用性。该研究方法的建立为临床上提供了一种TMEM39A的快速检测和定量分析技术。     

硝呋烯腙在畜禽饲料中的应用效果及特点

硝呋烯腙是７０ 年代中期发现的一种新型抗生素, 用于畜禽饲料中可促进畜禽生长,防治畜禽腹泻,促进色素沉积,而且可以和多种抗生素合用。硝呋烯腙抗菌灵敏性高,使用安全。     

SWAT模型灵敏性分析模块在云州水库流域的应用

SWAT模型是基于水文过程的,具有很强物理机制的流域分布式水文模型.介绍了AVSWAT2005灵敏性分析模块,并在华北土石山区云州水库流域得到较好的应用与验证.通过灵敏性分析,辨析出影响该流域产流模拟结果精度的主要参数因子.SCS径流曲线系数(CN2)、土坡可利用水量(SOL-AWC)、土壤饱和导水率(SOL_K)的影响是显著的,灵敏性等级高;平均坡度(SLOPE),浅层地下水径流系数(GWQMN)有一定影响,灵敏性等级中;依据上述结论调整参数值,采用连续10 a的实测月流量数据对模型进行了校准和验证.结果表明,模型对月流量模拟的相对误差在模型校准期和验证期均小于15%,Nash-Suttcliffe系数Ens高于0.7,SWAT模型对云州水库流域产流的模拟结果良好.因此,灵敏性分析模块的应用极大地提高了模型在华北土石山区的可用性,具有一定的推广意义.     

6050X1型时域反射仪的测定原理与灵敏性

介绍了６０５０Ｘ１型时域反射仪（ＴＤＲ）的基本结构和测定土壤含水率的原理，通过试验分析了它对导棒材料性质及导棒长度的灵敏性。结果表明，用铜和不锈钢做波导棒效果基本一致，导棒实际长度与输入长度的微小偏差对含水率的测量结果影响很小，且导棒越长影响越小