HPLC法测定商品苦荞茶中槲皮素和山柰酚含量

目的:采用高效液相色谱法测定商品苦荞茶中槲皮素和山柰酚的含量.方法:回流提取法,色谱柱为 DIKMAdiamonsil(4.6mm×250mm,5μm),检测波长260nm,柱温25 ℃,流动相为乙腈0.1%磷酸水, 梯度洗脱,流速为1mL/min.结果:不同类型苦荞茶中黑苦荞全胚茶的槲皮素和山柰酚含量最低(0.704~ 1.089mg/g),不同生产地苦荞茶中槲皮素和山柰酚含量差异较大.结论:本试验可为苦荞茶的研究和质量标 准建立提供科学依据.     

槲皮素对地塞米松和A β25～35联合诱导PC12细胞损伤的保护作用

目的研究槲皮素对地塞米松和Aβ联合诱导PC12细胞损伤的保护作用,并对其作用机制进行初步探讨。方法培养PC12细胞,取对数生长期细胞分为五组,空白对照组、模型组、把槲皮素分为高、中、低剂量组,剂量分别为10 umol/L、5.0 umol/L、2.5 umol/L.药物预处理2 h后,然后孵育地塞米松与Aβ联合24 h诱导氧化损伤。24 h后MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡。结果与空白对照组相比,损伤组细胞活力明显低于空白对照组,细胞凋亡率明显升高;与模型组相比,槲皮素能明显改善地塞米松联合Aβ诱导的细胞氧化损伤,可提高细胞活力,明显降低细胞凋亡率。结论槲皮素对地塞米松和Aβ联合诱发PC12神经细胞损伤有显著的保护作用,其机制可能与抗细胞凋亡有关。     

槲皮素对Aroclor1254诱导的孕鼠肝细胞CYP450表达的影响

采用胶原酶二步灌流法获取怀孕大鼠的原代肝细胞,以Aroclor1254诱导肝细胞损伤,用不同剂量的槲皮素分别处理损伤的肝细胞24～72h,RT—PCR及Western—blot法检测肝细胞中细胞色素酶P450（CYP450）的表达。结果显示,槲皮素处理损伤的肝细胞后,肝细胞CYPIAl、CYP281及CYP2E1的表达随槲皮素浓度的增加和处理时间的延长而呈先升高后降低的趋势。10mg／LAroclor1254是诱导体外培养的原代肝细胞损伤的最适质量浓度,10μmol／L槲皮素是对损伤的怀孕大鼠肝细胞的最佳保护浓度。结果表明,槲皮素对损伤的怀孕大鼠肝细胞具有保护作用。     

用反相高效液相色谱-紫外检测法测定桑叶中芦丁、槲皮素和1-脱氧野尻霉素的含量

为高效检测桑叶中的药用活性成分,进行了用反相高效液相色谱-紫外检测法(RP-HPLC-UV)综合测定桑叶中芦丁、槲皮素和1-脱氧野尻霉素(1-DNJ)含量的试验。采用85%乙醇超声辅助萃取桑叶中的芦丁和槲皮素,以0.05 mol/L HCl为溶剂提取1-DNJ,并在pH8.5的硼酸盐缓冲液中进行衍生化反应,生成具有紫外吸收的1-DNJ-FMOC络合物。色谱柱为Alltima C18(4.6 mm×250 mm,5μm),检测波长分别为360、360、254 nm,流动相分别为V(四氢呋喃)∶V(0.02%磷酸)=25∶75、V(乙腈)∶V(pH4.0、0.5 mol/L醋酸缓冲液)=27∶73、V(乙腈)∶V(0.1%醋酸)=36∶64。检测结果显示:芦丁、槲皮素和1-DNJ的色谱图分离效果良好,峰面积与浓度呈高度正相关,回收率(n=3)分别为99.14%、98.89%、100.85%,相对标准偏差(RSD)分别为1.01%、0.33%、1.24%。试验显示建立在以上条件下的检测方法精密度高,检测结果准确可靠。     

高效液相色谱法测定漆姑草中芦丁和槲皮素含量

建立了漆姑草(Sagina japonica)中芦丁和槲皮素含量的反相高效液相色谱—二极管阵列检测法,采用乙醇—超声波提取,以Shim-pack VP-ODS (200 mm×4.6 mm)为色谱柱,以甲醇∶水(含0.2％磷酸)=60∶40(V/V)为流动相,流速为0.8 mL/min,柱温为30℃,检测波长为255 nm.芦丁和槲皮素能得到较好的分离,分别在0.03～15,00 μg/mL(r=0.999 0)和0.04～20.00 μg/mL(r=0.999 4)的浓度范围内与峰面积成良好线性关系,检测限分别为12.6和15.2 ng/mL.本方法操作简单、准确度高、重现性好,可用于漆姑草药材的质量控制,为漆姑草质量标准的制定提供依据.     

不同采收期番石榴叶中槲皮素的含量分析

采用回流提取法,以槲皮素的提取率为评价指标,以提取时间、料液比、乙醇浓度和提取次数为考察因素,通过正交试验优化提取条件,并以紫外分光光度法进行定量分析.结果表明,番石榴叶中槲皮素的优化提取条件为90％乙醇(V/V)、料液质量比1∶40、每次提取2h、提取3次;槲皮素含量以3月份最高,达到2.95％.该法测定番石榴叶中槲皮素含量稳定、快速、简便,符合方法学考察要求.     

富硒桑葚果酒芦丁和槲皮素含量的分析

利用原子荧光分光光度法测定了桑葚果酒中硒的含量.采用单因素考察法优化桑葚果酒中芦丁、槲皮素的提取条件,采用HPLC法测定芦丁、槲皮素的含量,色谱柱为Kromasil C18(4.6 mm×150 mm,5μm),测定芦丁以乙腈-0.1％磷酸(体积比19∶81)为流动相,测定槲皮素以甲醇-0.4％磷酸(体积比1∶1)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长为360 nm,柱温为30℃.结果表明,所选桑葚酿造的果酒中硒含量为(0.015 3±0.001 2)mg/mL.槲皮素在2.02～40.40 μg呈良好线性关系(R2=0.999 9),平均回收率为98.88％,RSD为1.19％(n=5).试验结果为安康富硒桑葚果酒的开发提供一定的理论依据.     

三种沙棘(海滨沙棘、中国沙棘、蒙古沙棘)果实的黄酮醇苷成分

釆用RP-HPLC-DAD高效液相色谱仪分离出了海滨沙棘果实中的黄酮醇苷並用标准品进行了鉴定。糖苷组分用β-葡萄糖苷酶进行酶水解再用色谱仪和标准品鉴定苷元。所有这3种沙棘都含有同样的黄酮醇苷种类,其中蒙古沙棘果实的总含量最低。主要苷元是异鼠李素,其次是槲皮素及含量低的山萘酚。测定了3种沙棘中的黄酮醇苷例如黄酮醇3-O-芸香苷,3-O-葡萄糖苷,3-O-槐糖苷-7-鼠李糖苷以示它们的区别。     

链霉菌HNS2．2代谢产物对TMV的抑制作用及活性成分分析

为探明链霉菌HNS2．2代谢产物中的抗TMV成分,通过活性跟踪、利用柱色谱分离到其活性成分,然后借助核磁共振和质谱鉴定活性成分的化学结构,并使用半叶枯斑法测定各化合物抗病毒的活性。结果表明,该菌株发酵液粗提物稀释100倍时,对TMV表现出明显的体外抑制作用,在蔓陀罗Daturastramonium上的枯斑抑制率为66．7％。从其代谢产物中共分离鉴定4个化合物,即槲皮素（quercetindehydrate）、对羟基苯丙酸、4’-羟基黄烷酮（4＇-hydroxyflavanone）和3．羟基黄酮（3-hydroxyflavone）。浓度为10mg·mL_的槲皮素对TMV病毒的体外抑制效果最好,在蔓陀罗上枯斑抑制率达到89．12％;其余3个化合物的抑制率分别为19．87％、53．03％和51．20％。     

高效液相色谱法同时测定杜仲叶中芦丁和槲皮素含量的研究

建立反相高效液相色谱法同时测定了杜仲叶中2种黄酮类成分——芦丁和槲皮素的含量。色谱柱为Nova-Pak C18(3.9 mm×300 mm,4μm),流动相为甲醇-0.5%磷酸溶液(505∶0),流速0.6 ml/min,检测波长为356 nm。芦丁和槲皮素的线性范围分别为0.246～4.92μg(r=0.999 93)和0.0846～1.692μg(r=0.999 89),平均回收率(n=5)分别99.8%和102.1%。方法准确、快速、重现性好,适用于同时测定杜仲叶中黄酮类成分的含量。