基于RPA技术对转CP4-EPSPS基因产品的快速检测

核酸检测在农产品安全检测中的应用十分广泛,随着转基因作物的商业化种植,迫切需要一种快速、特异、灵敏的转基因作物检测方法。利用重组酶聚合酶扩增（recombinase polymerase amplification,RPA）技术对含有转基因产品及其制品中CP4-EPSPS基因进行检测,共设计5对引物来筛取最佳引物,并对反应体系和反应温度进行优化。结果表明,该方法采用20 μL体系在37 ℃恒温反应15 min即可对CP4-EPSPS基因进行快速检测。该方法检测转基因的灵敏度阈值为45拷贝,灵敏度高、特异性强,为大规模筛查CP4-EPSPS基因提供了一种新的途径。     

Polymorphism in Mitochondrial DNA of Six Fowl Breeds Revealed by Restriction Endonuclease

The patterns of cleavage of mtDNA by restriction endonucleases was analysed for six fowl breeds and of .Hyline White,Hyline Brown,ISA Brown,Hisex Brown,Lohmann White,Abor Acres and mtDNA polymorphisms were detected in the restriction patterns with the following eight enzymes,Ava Ⅰ,AvaⅡ,EcoRⅠ,HindⅢ,BamHI,PvuⅡ,PstⅠ,HincⅡ.The restriction cieavage patterns were identical among these breeds.Hyline White,Hyline Brown,ISA Brown,Hisex Brown,Lohmann White-A type.The patterns of Abor Acres were Btype.Based on their mtDNA restriction types,all the breeds were classified into two groups.Genetic distances among these groups were calculated in roder to define their phylogenetic relationships.The relationship among five egg line breeds is close,while Abor Acres(Broiler fow)is relatively far from them.The results suggest that the difference of mtDNA could result from the different origins.The polymorphic sites in mtDNA of Hyline White bas been located on a restriction map.     

2004-2012年国内猪圆环病毒Ⅱ型流行状况报告简

本文对近十年来国内猪圆环病毒Ⅱ型的流行状况进行了综述,包括感染抗体的检测和病原学的检测,并对可利用数据进行了统计分析;总结出近十年来国内猪PCV2g染的流行特点。     

第三方检验检测机构PCR检测室防核酸污染措施

随着社会的需求,第三方检验检测机构的数量日益增多。检测数据的准确性不仅关乎检测机构的检测水平,也直接影响行政机关的执法效力,因此检测实验室必须确保其检测数据科学公正、准确可靠。核酸检测是第三方检验检测机构中最常见的检测项目,而气溶胶污染是核酸检测中最主要最常见的污染,也是困扰绝大多数实验室的难题,必须要加以重视。本文就本中心在核酸检测防污染方面的体会进行初步总结。     

人参胚后熟期间核酸、蛋白质、糖的变化及激素的影响

人参种子需经形态后熟和生理后熟才能萌发。在整个胚后熟期间,每粒种子总核酸、RNA量逐渐增加,DNA含量逐渐下降、类脂、总糖,淀粉含量也逐渐下降,胚缓慢增长。经激素处理后、总核酸,RNA量在形态后熟阶段快速增加,胚率迅速增长。在生理后熟期,出现一个淀粉的含量高峰,随后出现一个还原性糖的含量高峰,因此,认为生理后熟的作用可能是为种子萌发积累能量。     

动物核酸疫苗研究近况

核酸疫苗已显示出强大的优越性和生命力,其发展前景巨大。随着研究的不断深入,核酸疫苗的作用机制也在不断地被阐明。外源目的基因的选择、载体的选择、接种组织的预处理等都是影响着核酸疫苗在体内表达的主要因素。由于核酸疫苗具有常规疫苗所没有的优点,但同时核酸疫苗也存在一些尚未解决的问题。随着人们对核酸疫苗的不断改进,相信核酸疫苗无论是在疾病预防还是基因治疗中,将起着更加重要的作用     

华北紫丁香花芽分化期营养物质与核酸含量的变化

为制定合理的花期调控措施.进一步揭示华北紫丁香花芽分化的生理特性,以不同时期的华北紫丁香花芽、叶芽及其叶片为材料,研究在花芽分化过程中可溶性糖、淀粉、可溶性蛋白质及核酸含量的变化.华北紫丁香在生理分化期花芽中可溶性糖、可溶性蛋白质、淀粉及核酸含量都达到最大值.且花芽的积累远远大于叶芽,说明以上物质的高浓度均有利于花芽的孕育;形态分化期间花芽中可溶性糖、淀粉、蛋白质、核酸含量下降后,又逐步回升,且其各个时期含量均高于叶芽.初步明确了华北紫丁香花芽分化期的主要营养物质及其核酸含量的变化规律.     

小伞山羊草染色体的FISH核型分析

采用荧光原位杂交(Fluorescence in Situ Hybridization,FISH)技术分析小伞山羊草染色体的核型特点。结果表明,小伞山羊草共包含7对染色体,其中1 U和5 U染色体各含有1对随体。分别以Oligo-pSc 119.2-1(绿色)与(GAA)7(红色)重复序列为探针对小伞山羊草根尖细胞染色体进行FISH分析,发现Oligo-pSc-119.2-1信号主要分布在染色体的端部及近端部,不同染色体之间的信号强度有所差别。(GAA)7信号主要集中于染色体着丝点附近,不但比Oligo-pSc-119.2-1信号的亮度高,分布丰富,而且在染色体上的分布可与Oligo-pSc-119.2-1信号互补。因此,同时采用Oligo-pSc-119.2-1与(GAA)72种探针能准确地辨别小伞山羊草的每对染色体,建立了小伞山羊草的FISH核型。     

肉苁蓉种子带菌检测研究

为研究不同产地肉苁蓉种子携带真菌优势菌群和带菌率的差异,采用平皿法对肉苁蓉种子进行外部（洗涤法和干种子法）、内部（种子消毒法与种仁消毒法）带菌检测。结果表明,肉苁蓉种子携带菌群主要为曲霉属（Aspergillus spp.）、交链孢属（Alternaria spp.）、镰孢属（Fusarium spp.）、青霉属（Penicillium spp.）及少量的散囊菌属（Eurotium spp.）。不同产地肉苁蓉种子携带菌群及带菌率差异不显著,但分离频率有一定差异。研究结果为肉苁蓉种子标准的制定提供参考。