人参胚后熟期间核酸、蛋白质、糖的变化及激素的影响

人参种子需经形态后熟和生理后熟才能萌发。在整个胚后熟期间,每粒种子总核酸、RNA量逐渐增加,DNA含量逐渐下降、类脂、总糖,淀粉含量也逐渐下降,胚缓慢增长。经激素处理后、总核酸,RNA量在形态后熟阶段快速增加,胚率迅速增长。在生理后熟期,出现一个淀粉的含量高峰,随后出现一个还原性糖的含量高峰,因此,认为生理后熟的作用可能是为种子萌发积累能量。     

一种快速低廉的PCR探针标记方法

【研究目的】探针标记技术是分子生物学和基因工程研究中常用实验技术,需要发展高效、快速、低成本、安全、简捷的DNA探针标记方法;【方法】利用普通的Taq酶进行PCR探针标记,电泳和Southern杂交检测探针标记结果;【结果】电泳检测发现标记产物在电泳时相对非标记的对照表现明显滞后,表明探针标记成功;电泳条带清晰明亮,表明探针标记效率高;Southern杂交条带清晰,说明该方法标记的探针可用于Southern等分子杂交实验;【结论】利用普通的Taq酶进行PCR探针标记,是一种低成本、高效、快速的DNA探针标记方法。     

实时荧光PCR技术定量检测转基因大豆方法的研究

以转基因大豆Roundup Ready为材料，通过特异性引物和探针，对转基因大豆中外源基因cp4-epsps进行了定量检测。研究发现Taqman荧光探针法和SYBR荧光染料法均可作为转基因大豆定量检测的方法，但前者比后者具更高的检测灵敏度和精确度，其检测阈值可降到0.05%，变异系数为0.09%~0.53%。在此基础上，建立和优化了Taqman探针实时荧光定量PCR检测技术体系，有助于提高转基因作物及产品的生物安全性定量检测的准确度和可靠性。     

甜菜黑色焦枯病毒核酸特性,RNA2的cDNA克隆和部分序列分析

以感染甜菜黑色焦枯型病毒新疆及宁夏分离物的苋色藜为材料提纯病毒，提取其ＲＮＡ，经琼脂糖凝胶电泳后分别回收不同的ＲＮＡ组分，以不同组合接种苋色藜，证实新疆分离物ＲＮＡ１能单独侵染并复制，但ＲＮＡ２组分必须依赖ＲＮＡ１才能完成其侵染和复制过程。同时发现，宁夏分离物ＲＮＡ可以代替新疆分离物ＲＮＡ１支持ＲＮＡ２的复制。通过核酸酶保护试验和对ＢＢＳＶ新疆及宁夏分离物ｃＤＮＡ标记探针与两者的ＲＮＡ进行的Ｎｏｒ     

核酸混配氨基酸在大棚草莓上应用的研究

介绍了核酸混配氨基酸在大棚草莓上的应用效果。试验结果表明，喷施核酸与氨基酸的混合液，草莓植株株高增加1．8cm，茎基宽增加0．43cm，大果率增加15％，糖度增加0．60，Vc含量增加120mg/kg，明显改善了草莓果实的品质，同时比常规对照增产幅度可达12．5％。以上说明核酸混配氨基酸在农业生产上具有很好的应用前景。     

抗福美双假单胞菌株的NTG化学诱变及分子探针鉴定

利用微生物的抗药性筛选抗福美双的假单胞菌株Ｔ４６，然后通过亚硝基胍（ＮＴＧ）化学诱变获得了对福美双敏感的三株突变株Ｔ４６Ｎ１０、Ｔ４６Ｎ７和Ｔ４６Ｎ１７。利用这三个突变株作受体，通过基因克隆的方法筛选到了可使三个突变株恢复抗性的克隆，抗性基因分别被定位在７ｋｂ、２．５ｋｂ和２０ｋｂ的ＥｃｏＲⅠ片段上。将这三个克隆分别用（３２）Ｐ标记后制成分子探针，然后分别与三个突变菌株的总ＤＮＡ进行ＤＮＡ－ＤＮＡ分子杂交，结果表明，各突变株均存在与菌株Ｔ４６的抗福美双基因克隆的高度同源性，经结合形态、生理生化等分析后证实这三株突变株均源自于出发菌株Ｔ４６。     

用生物素标记核酸探针检测鸭瘟病毒DNA的研究

用生物素-11-脱氧尿苷三磷酸(Biotin-11-dUTP),通过缺口平移法标记提纯的鸭瘟病毒 DNA,制备生物素化鸭瘟病毒 DNA 全基因组探针;以斑点杂交检测固定在硝酸纤维膜上的样品鸭瘟病毒 DNA 同源序列,杂交后用亲和素-碱性磷酸酶孵育,底物显色,阳性反应呈蓝紫色斑点。试验结果表明,生物素标记核酸探针可检出10pg 提纯的鸭瘟病毒DNA,并检出稀释10~5倍和肝组织鸭瘟病毒 DNA;对鸡马立克氏病毒 DNA,鸡痘病毒DNA 和噬菌体 DNA 无杂交反应;对鸭瘟病毒弱毒 DNA 产生微弱杂交。该技术具有快速、敏感、特异和无放射污染等优点。     

少动鞘氨醇单胞菌ZX4儿茶酚2,3-双加氧酶基因的克隆与序列分析

利用PCR扩增分离得到了少动鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas paucimobotis)ZX4菌株的儿茶酚2，3-双加氧酶基因(c230-ZX4)。核苷酸序列测定与分析表明，该基因片段全长924bp且具有一个完整的阅读框，编码306个氨基酸残基。序列分析结果表明，该基因与已报道的来自菌株Sph.yanoitcuyae B1和Sphingomonas sp．KMG425的xylE基因(编码产物均为C23O)具有较高的核酸序列同源性，分别为94．37％和94．05％；与研究较多的Pseudomonas putida的TOL型质粒pWWO上的xylE基因同源性仅为57．79％。与其同源性较高的xylE基因编码的多肽氨基酸序列比较发现，c23O-ZX4编码产物的第86、92、113、125、126、182、185、186、216及218位的氨基酸残基均有所不同。     

南方根结线虫DNA指纹探针的分离

南方根结线虫ＤＮＡ指纹探针的分离徐建华１付鹏１杨金水２（１南京农业大学植物病原生物研究所，南京２１００９５；２复旦大学，上海２００４３３）ＩＳＯＬＡＴＩＯＮＯＦＰＲＯＢＥＳＦＯＲＤＮＡＦＩＮＧＥＲＰＲＩＮＴＩＮＧＯＦＭＥＬＯＩＤＯＧＹＮＥＩＮＣＯＧＮ...     

用DNA—RNA杂交检测新城疫病毒的研究

用光敏生物素标记鸡新城疫鸡ｃＤＮＡ，制备核酸探针，经斑点交和碱性磷酸酶为色后，探针同该ｃＤＮＡ的ＰＣＲ产物、ＰＣＲ产物重组子和新城疫强弱毒株呈现阳性反应，与ＩＢＶ、ＩＬＴＶ、ＭＧ和正常尿囊液等均呈阴性杂交反应，该ｃＤＮＡ探针是敏感且特异的检测方法。