兽用抗菌药物使用要点(一)

<正>抗菌药物主要是指抗生素和合成抗菌药。抗菌药物能干扰病原微生物细胞壁的合成、损伤菌体的细胞膜、影响菌体的蛋白质合成及核酸合成。合理应用抗菌药物指在明确指征的情况下选用适宜的药物,采用适宜的剂量和疗程,达到杀灭致病微生物和控制感染的目的。应用抗菌药物的同时应采取相应措施增强畜禽免疫力,防止发生各种不良反应。     

苹果梨花芽分化期核酸代谢规律的研究

采用生化测定的方法对苹果梨花芽分化的核酸代谢进行了研究，结果表明：花芽生理分化期核酸总量高，RNA高于DNA，RNA／DNA比值高，其核酸代谢模式为：RNA双峰，第1峰大于第2峰，DNA单峰，在RNA双峰之间，RNA／DNA呈双峰，蜂值出现时间与RNA双峰相同，第1峰远大于第2峰；花芽形态分化过程中，RNA和DNA变化动态相似，一直处于较高水平且呈增加趋势，RNA高于DNA，雄蕊和紫蕊分化期含量最高，形态分化结束时降至最低。     

UV-B辐射增强对水稻蛋白质及核酸的影响研究

盆栽试验研究UV B辐射增强对水稻蛋白质及核酸的影响结果表明 ,UV B辐射增强抑制水稻生长 ,降低水稻生物量和水稻叶片可溶性蛋白质及核酸含量。随UV B辐射的增强 ,水稻叶片蛋白水解酶和核糖核酸酶活性上升 ,硝酸还原酶活性下降 ,叶片总游离氨基酸含量增加。     

共表达γ干扰素的乙型脑炎病毒与猪细小病毒核酸疫苗的构建及其免疫原性研究

为了构建和筛选良好的猪乙型脑炎和猪细小病毒的核酸疫苗,并提高核酸疫苗的免疫效果,用重叠PCR法把PPV VP2和JEV E10连接,再将扩增的IFN-γ连入构建载体pcDNA.VEI使其共同表达.用脂质体将pcDNA.VEI介导入Vero细胞,通过间接免疫荧光法检测目的基因的体外表达.用pcDNA.VEI和不表达IFN-Κ的pcDNAZ.VE分别免疫Balb/c小鼠,同时设立PBS、猪细小病毒灭活疫苗、乙型脑炎弱毒疫苗和pcDNA3.1空白质粒免疫对照组.共免疫两次,间隔2周检测免疫指标.结果表明,通过鉴定核酸疫苗的构建达到了预期目标,并可在荧光显微镜下观察到了其转染的Vero细胞.该核酸疫苗能够诱导脾淋巴细胞增殖.ELISA结果显示,与pcDNA.VE和阴性对照组进行比较,pcDNA.VEI所诱导产生的两种抗体都较高.pcDNA.VEI组能较稳定的诱导产生T细胞亚群,并检测到CD4+/CD8+比例于首免2周后都高于pcDNA.VE.因此表明该核酸疫苗能产生特异诱导体液免疫和细胞免疫且是安全的,证明了IFNγ基因具有免疫增强效果,为乙脑和猪细小病毒核酸疫苗研究提供了实验依据.     

光敏生物素标记总DNA探针对大豆根瘤菌的检测

以光敏生物素标记慢生型大豆根瘤菌USDA110总DNA作为探针，与快生型大豆根瘤菌杂交，没有杂交斑点形成．而与慢生型大豆根瘤菌中的部分菌株能形成杂交斑点，表明该探针具有种和部分菌株特异性．用该探针与压碎的根瘤汁液进行DNA杂交，检测USDA110在不灭菌的盆栽土壤中的竞争结瘤能力，发现USDA110在大豆不同生育期的占瘤率为70％～90％．     

荧光分子信标探针检测双歧杆菌的研究

根据双歧杆菌高度保守的寡核苷酸序列,构建一枚荧光分子信标探针,并对探针的性能进行测定分析,利用实时PCR技术对双歧杆菌进行检测。研究结果表明,所构建的分子信标设计合理,合成正确,性能稳定,S/N>20,其发卡既可以闭合也可以打开,符合实时PCR过程对分子信标的要求;该信标探针对双歧杆菌具有很好的稳定性及特异性,通过实时PCR扩增能有效地将双歧杆菌和非双歧杆菌区别开。因此,荧光分子信标探针可用于对双歧杆菌的检测。     

口蹄疫病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

为建立检测口蹄疫病毒(FMDV)的方法,本研究根据GenBank中FMDV的2B基因序列,设计合成一对引物和一条TaqMan探针,将2B基因克隆到pBlueScriptSK(-)载体中,利用T7体外转录试剂盒制备标准品,通过优化反应条件,建立了TaqMan荧光定量PCR检测方法.结果表明,该检测方法的敏感性达到102拷贝/μL;与其它主要相关病毒均不发生交叉反应,批内和批间试验重复性的变异系数(CV)均小于3％.本研究建立的FMDV TaqMan荧光定量PCR方法对FMDV的快速检测具有重要意义.     

强毒小肠结肠耶氏菌生物素标记基因探针的研究

在构建的小肠结肠耶氏菌毒性质粒DNA基因文库pYB1～8与pYP1～6的基础上,筛选出了pYB7和pYP6克隆株.用限制性内切酶Bam HI消化pYB7,Pst消化pYP6,可分离出3.8kb和6.4kb的插入性DNA片段.以这两个基因片段为目的基因,用生物素化dUTP和光敏生物素标记,获得了生物素标记的基因探针.该探针能检出10pg以上的强毒小肠结肠耶氏菌DNA,不与无毒小肠结肠耶氏菌及大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等18种对照菌反应,具有高度的特异性和敏感性.pYB7与pYP6探针对不同血清型及来源的小肠结肠耶氏菌检测,其结果与自凝性试验、依钙试验等结果相符;对小肠结肠耶氏菌强毒株与无毒株检定的准确率为100%.     

寄生虫半胱氨酸蛋白酶核酸疫苗的研究进展与应用前景

就寄生虫半胱氨酸蛋白酶的一些生理生化与免疫学性质进行了概括,阐述了该酶与宿主免疫应答之间的作用关系,证明了该酶具有作为研制高效核酸疫苗的条件,同时综述了寄生虫半胱氨酸蛋白酶核酸疫苗的发展以及应用前景。     

3种动物源性膜芯片检测方法的构建

斑点杂交技术具有通量高、灵敏度高、检测时间短等优点,且操作方法简单、成本较低、对试验场所和设备要求不高,是适用于广大基层机构的检验技术。目前对于膜芯片的使用和推广还不是特别广泛。本文利用膜芯片技术构建一种肉及肉制品源性食品检测方法,分别设计猪、鸡、兔3种动物的肌细胞线粒体基因的特异性引物,并对3种动物基因组进行PCR扩增,用地高辛对扩增产物进行标记作为膜芯片的标记探针,对标记后的探针进行梯度稀释,选择最适浓度探针与6种动物特异性扩增产物进行斑点杂交试验。结果表明：标记探针在浓度为1pg/μL时仍然显点,与6种动物特异性扩增产物杂交结果显示,标记探针只与对应扩增产物发生显点,不与其他扩增产物反应。说明本研究设计的标记探针灵敏度高、特异性好,可用于猪、鸡、兔3种动物源性膜芯片检测。