禽弱毒疫苗中REV低剂量污染检测方法的比较

使用污染有禽网状内皮组织增生症病毒(REV)的弱毒疫苗是REV感染途径之一,而通常弱毒疫苗中REV的污染剂量较低,难以检测,本研究对不同方法在检测弱毒疫苗中REV低剂量污染进行了比较研究。将定量好的REV以不同剂量分别人为污染一批商品化新城疫病毒(NDV)弱毒疫苗,提取核酸后分别以TaqMan探针荧光定量RT-PCR检测、常规RT-PCR检测以及PCR产物结合核酸斑点杂交检测等不同方法进行检测。结果显示常规RTPCR检测仅可检测到10TCID50/羽份的REV污染,而另外两种方法均检测到1TCID50/羽份的低剂量REV污染。将人为污染1TCID50/羽份和2TCID50/羽份REV的NDV弱毒疫苗各接种10只SPF鸡,定期针对REV抗体及其核酸进行检测,结果显示在免疫污染疫苗后7周内REV抗体全部为阴性,而核酸检测均可以检测到一定比例的阳性,提示通过接种SPF鸡检测弱毒疫苗中REV污染时,仅仅通过抗体判定可能会对一些剂量较低的REV污染造成漏检,通过结合对病原的检测有助于降低漏检率。     

反义核酸技术及其应用

反义核酸技术是20世纪70年代末继基因克隆和重组技术后,分子生物学领域兴起的一种全新的技术。该技术由于其核苷酸具有与DNA意义链相同的序列且可以选择     

水稻GA20ox-2基因mRNA的TaqMan荧光定量RT-PCR检测

成功建立了一项基于TaqMan 实时荧光定量的RT-PCR技术,定量分析水稻半矮化关键基因之一GA20ox-2转录水平.该技术体系中重组质粒标准品的制备方法具有很好的实用性;质粒标准品对基因GA20ox-2表达的实时定量准确、可靠、便捷.标准曲线表明,所建立的GA20ox-2基因mRNA表达实时荧光定量PCR检测方法,特异性好,灵敏度高,可达102拷贝;线性范围广,可达102～107拷贝;扩增效率高(E=100.3%);稳定性、重复性好,可靠性高,批内和批间变异系数仅分别为0.12%～0.31%和0.21%～0.34%;循环阈值与PCR 体系中起始模板量的对数值之间有着良好的线性关系(r＝0.999),可对GA20ox-2基因表达进行准确实时定量.     

酵母核酸对断奶仔猪生产性能的影响

已有研究证实,断奶仔猪对核苷酸的需要量很高,但核苷酸以及合成核苷酸的前体物摄人量却很低.添加酵母核酸能够增加断奶仔猪采食量,改善消化吸收,提高生长速度,但酵母核酸对处于夏季热应激情况下断奶仔猪生产性能的影响还未见报道.     

核酸疫苗的研究进展

核酸疫苗（nucleic acid vaccine），也称基因疫苗（genetic vaccine），是指将含有编码的蛋白基因序列的质粒载体，经肌肉注射或微弹轰击等方法导入宿主体内，通过宿主细胞表达抗源蛋白，诱导宿主细胞产生对该抗源蛋白的免疫应答，以达到预防和治疗疾病的目的。核酸疫苗是利用现代生物技术免疫学、生物化学、分子生物学等研制成的，     

Polymorphism in Mitochondrial DNA of Six Fowl Breeds Revealed by Restriction Endonuclease

The patterns of cleavage of mtDNA by restriction endonucleases was analysed for six fowl breeds and of .Hyline White,Hyline Brown,ISA Brown,Hisex Brown,Lohmann White,Abor Acres and mtDNA polymorphisms were detected in the restriction patterns with the following eight enzymes,Ava Ⅰ,AvaⅡ,EcoRⅠ,HindⅢ,BamHI,PvuⅡ,PstⅠ,HincⅡ.The restriction cieavage patterns were identical among these breeds.Hyline White,Hyline Brown,ISA Brown,Hisex Brown,Lohmann White-A type.The patterns of Abor Acres were Btype.Based on their mtDNA restriction types,all the breeds were classified into two groups.Genetic distances among these groups were calculated in roder to define their phylogenetic relationships.The relationship among five egg line breeds is close,while Abor Acres(Broiler fow)is relatively far from them.The results suggest that the difference of mtDNA could result from the different origins.The polymorphic sites in mtDNA of Hyline White bas been located on a restriction map.     

马传染性贫血病毒弱毒株LTR的克隆及序列分析

从马传染性贫血病毒（ＥＩＡＶ）弱毒株感染的驴胎皮肤（ＦＤＤ）细胞中提取前病毒ＤＮＡ，以其为模板，通过ＰＣＲ扩增出ＥＩＡＶ弱毒株的ＬＴＲ，并将其克隆到载体质粒ｐＵＣ１９中。经酶切分析，ＰＣＲ及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交筛选、鉴定，获得含有ＥＩＡＶ弱毒株ＬＴＲ片段的重组质粒ｐＬＴＲ。对该质粒的序列分析发现，在中国ＥＩＡＶ弱毒株ＬＴＲ的Ｕ３区含有４个与细胞转录因子结合的位点，其中有３个ＰＵ．１位点和１个ＡＰ－１位点，Ｕ３区还存在１个ＴＡＴＡＴＡＡ启动子序列；Ｒ区长为８１ｂｐ，含有１个帽位点ＧＧ和１个Ｐｏｌｙ（Ａ）信号序列ＡＡＴＡＡＡ；在帽位点下游是１个病毒Ｔａｔ蛋白结合位点，即ＴＡＲ位点；Ｕ５区长为３９ｂｐ。中国ＥＩＡＶ弱毒株ＬＴＲ序列与国外发表的其他毒株序列相比，在ＬＴＲ的一些调控部位有变异发生，中国ＥＩＡＶ弱毒株与美国ＥＩＡＶ原型株（Ｗｙｏｍｉｎｇ株）ＬＴＲ区核苷酸序列有１８．７２％的差异。     

鸭瘟病毒及其核酸的电镜观察

对鸭瘟病毒及共核酸进行了电镜观察。纯化病毒经核酸酶降解杂核酸后，加入８５ｍｏｌ／Ｌ的尿素释放病毒核酸，经水相法展开后用碳膜铜网点样，再经染色和真空喷镀，于电镜下观察。鸭温病毒呈典型的疱疹病毒形状，其核酸分子量估算约为９１１×１０６道尔顿。     

生长抑制剂对美味猕猴桃幼树控长促花及其核酸、蛋白质代谢的影响

1983－1986年在美味猕猴桃幼树上进行了喷布生长抑制剂试验，结果表明：猕猴桃幼树在新梢期（5月上旬－5月下旬）喷布2000－3000ppmB91-2次，1000－1500ppmCEPA2次，2000p[mPP333 2次以及2000ppmB9 500ppm CEPA2次，2000pmPP333 500ppmCEPA 2次，均能有效地控制营养生长，促进花芽分化，其中两个混喷处理控长促花尤为显著，喷布生长抑制剂后，叶内总核酸，DNA，RNA，蛋白质的含量增加，表明生长抑制剂促进了核酸，蛋白质和生物合成，这样可使叶部的核酸代谢活化，影响遗传信息的表达，调节和推动生理代谢过程，促进成花基因的活化，从而显示出促进花芽的效果。