染色体原位杂交技术及其在麦类作物遗传研究中的应用

介绍了染色体原位杂交技术的原理和探针及其标记检测系统的发展,以及染色体原位杂交技术与其它技术的结合应用情况,并综述了近年来染色体原位杂交技术在麦类作物的外源染色体或染色体片段的检测、基因定位、染色体组同源性的鉴定和染色体组空间分布等研究中应用的进展情况。     

普通小麦花发育基因 TriFVE 的克隆与染色体定位

植物自主开花途径花发育基因FVE对植物营养生长向生殖生长的转变起重要的调控作用。为了进一步研究该基因在小麦中的调控功能,利用小麦基因组数据和二穗短柄草基因组数据,通过RT-PCR和PCR技术对小麦花发育基因FVE的DNA序列和cDNA序列进行了克隆和序列分析,分别获得了7 034bp(TriFVE1,Gene Bank JQ317687)和6 910bp(TriFVE2,Gene Bank JQ317688)的两个FVE基因序列。基因结构分析表明,FVE基因由15个外显子和14个内含子组成,TriFVE1和TriFVE2基因的内含子序列存在大片段的插入/缺失,同源性仅为79.87%。TriFVE1和TriFVE2的cDNA编码区序列均为1 368bp,存在4个SNP位点,编码455个氨基酸的FVE蛋白序列完全一致。利用"中国春"和21个缺四体将TriFVE1和TriFVE2分别定位于小麦3A和3D染色体上。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术分析了FVE基因在单棱期、二棱期和穗分化时期的小麦茎尖组织表达模式,发现二棱期和穗分化期TriFVE的转录水平显著高于单棱期,表明FVE在小麦花发育由营养生长到生殖生长过程中起重要作用。基于FVE蛋白序列的系统进化树分析表明,苔藓植物、单子叶和双子叶植物被明显分为不同类群,该基因随着物种的进化而进化,可以为研究植物分子进化关系提供参考。     

茶树染色体组型分析

采用去壁、低渗、火焰干燥制样法分析了18个茶树品种的染色体组型,结果表明:茶树染色体以 X=15为基数,一般为二倍体,但也有非整倍体和多倍体细胞。不同品种、同一品种不同细胞的染色体组型不尽相同,其主要核型为2n=2x=30=18m+6sm+2sm~(sat)+4st~(sat)和2n=2x=30=18m+6sm+4sm~(sat)+2st~(sat)。根据组型分析结果,认为茶树起源于我国的西南地区,其品种间具有相近的亲缘关系,乔木型、大叶品种核型的对称性较高,是进化上较原始的品种。     

A new gamete gene locus ga14 in rice （Oryza sativa L.）

Ｕｐｔｏｎｏｗ,１３ ｇａｇｅｎｅｓ,ｇａ１ｔｏｇａ１３ｆｏｒｓｅｇｒｅｇａｔｉｏｎｄｉｓｔｏｒｔｉｏｎｈａｖｅｂｅｅｎｌｏｃａｔｅｄｏｎｖａｒｉｏｕｓｒｉｃｅｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓ．Ｗｅｄｅｔｅｃｔｅｄａｎｅｗｌｏｃｕｓｇａ１４ｗｈｉｃｈｃａｕｓｅｓａｓｅｇｒｅｇａｔｉｏｎｄｉｓｔｏｒｔｉｏｎｏｆａｎｉｓｏｚｙｍｅｍａｒｋｅｒＰｇｉ１ｏｎｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ３．Ｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｒｅｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｖａｌｕｅｆｏｒｇａ１４ａｎｄｔｈｅｍａｒｋｅｒｇｅｎｅＰｇｉ１,ａｔｏｔａｌｏ…     

文蛤染色体核型及三倍体诱导的初步研究

文蛤染色体核型及三倍体诱导的初步研究ＡＰＲＥＬＩＭＩＮＡＲＹＳＴＵＤＹＯＮＴＨＥＫＡＲＹＯＴＹＰＥＡＮＤＴＲＩＰＬＯＩＤＩＮＤＵＣＴＩＯＮＩＮＭＥＲＥＴＲＩＸＭＥＲＥＴＲＩＸ常建波魏利平杨建敏宫向红孙逢贤（山东省海洋水产研究所，烟台２６４０００）Ｃｈ...     

SNP Markers Discovery in Soybean with Use of Degenerate Oligolucleotide Primed PCR

There are several strategies that can be applied in SNP discovery, as for example the locus-specific amplification of target genome regions （Primmer et al., 2002; Van et al., 2004） or simultaneous assembly of anonymous sequences which are the product of whole genome shotgun sequencing （Webber and Myers, 1997） or reduced representation shotgun sequencing （Altshuler et al., 2000）. The majority of these methods are highly cost-prohibitive, however, and there is a necessity for development of new strategies that would be more suitable for small and medium-scale laboratories.     

Pseudomonas cepacia脂酶的分子克隆

本研究从Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｃｅｐａｃｉａ染色体文库中分离到了４个酯酶基因的阳性克隆，限制性酶切分析发现脂基因位于一个３．０ｋｂ的ＤＮＡ片段上。脂酶基因的部分核苷酸序列进行了测定，并与已报道的酯酶基因序列作了比较分析，此外，还对不同物种的脂酶底物结合区域进行了讨论。     

用荧光原位杂交技术检测黑麦染色质

荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization ,FISH）是一种快速、准确、直接检测和定位外源染色质的新技术。本研究荧光原位杂交用毛地黄毒苷-11-dUTP标记黑麦总DNA作探针,以检测小麦中黑麦染色质。结果如下：八倍体小黑麦（2n=8x=56）有丝分裂中期有14条染色体显示黄色,42条染色体显示红色,红色间期核显示有14个黄色亮点,表明这八倍体小黑麦含14条黑麦染色体。八倍体小黑麦中黄色黑麦染色体显C-带和H-带的末端有绿色的带。这是由于黑麦染色体末端结构异染色质含量高所致。黑麦附加系2R的间期细胞核中有1 ～ 2个黄色亮点。这表明2R含有1至2条黑麦染色体。     

水稻米香基因的染色体定位研究

以标记基因系、ＩＲ３６三体以及粳稻易位系为材料，通过杂交研究了我国香稻品种所携米香基因在染色体上的位置，以咀嚼法测定双亲、Ｆ１、Ｆ２及Ｆ２植株上Ｆ３种子的米香。结果表明，米香基因与分属水稻１１个染色体的３６个标记基因表现独立遗传，而与位于第８染色体上的标记基因ｖ－８表现连锁，估算２基因之间的重组值约为（３７．５５±２．８６）％，推定控制水稻米香的基因位于第８染色体上。