鸡IL-4和IL-2重组融合基因佐剂对鸡球虫活疫苗的增效作用研究

为了研究鸡白细胞介素4(IL-4)和IL-2重组基因佐剂pCI-chIL-4-chIL-2-EGFP对鸡球虫活疫苗的增效作用,试验采用基因佐剂配合鸡球虫活疫苗对雏鸡进行免疫攻毒试验,测定该基因佐剂的最小有效剂量、给药途径,使用该基因佐剂对鸡球虫活疫苗的最短免疫间隔时间和免疫产生期的影响。结果表明：抗球虫指数(ACI)和相对增重率(RWG)随着基因佐剂剂量增高而升高,肌肉注射100μg/只时,ACI(189.32)和RWG(90.35%)达到高峰;口服基因佐剂300μg/只组的ACI(188.41)与肌肉注射基因佐剂100μg/只组接近;肌肉注射佐剂免疫攻毒组的两次免疫最短间隔时间(6 d)较不加基因佐剂组(7 d)缩短1 d;肌肉注射佐剂免疫攻毒组的免疫产生期为二免后第5天,较无基因佐剂免疫攻毒组提前1 d。说明肌肉注射IL-4和IL-2重组基因佐剂pCI-chIL-4-chIL-2-EGFP 100μg/只可提高鸡球虫活疫苗的免疫效果,缩短免疫产生期和免疫间隔。     

牛冠状病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用

为了建立一种敏感、特异的牛冠状病毒(BCoV)实时荧光定量RT-PCR检测方法,试验利用GenBank中BCoV参考毒株N基因序列,设计引物及小沟结合物(MGB)探针,建立实时荧光定量RT-PCR方法,对方法的特异性、灵敏度和稳定性进行检验。利用建立的方法对采集自7个省份31个发病牛场的925份临床样本进行检测,并用基于BCoV N基因的普通RT-PCR结合测序的方法对部分阳性样品进行验证。结果表明：建立的实时荧光定量RT-PCR方法的扩增体系为上下游引物(10μmol/L)各1μL,探针(10μmol/L)0.8μL,2×One Step RT-PCR BufferⅢ10μL,Ex Taq HS (5 U/μL) 0.4μL,Prime Script RT Enzyme MixⅡ0.4μL,总RNA 2μL,ddH₂O 4.4μL;扩增程序为,42℃5 min; 95℃10 s; 95℃5 s, 55℃35 s, 40个循环。标准曲线方程为y=40.979-3.512x,可信度(R²)为0.999,扩增效率(E)为92.6%,最低检测限为4...     

缙云茭白绿色安全栽培技术

缙云县茭白种植历史悠久,且享有"浙江茭白之乡""中国茭白之乡"的称号,2016年,缙云茭白栽培体系入选全国农业文化遗产普查名录;2017年,缙云茭白全产业链被认定为浙江省示范性农业全产业链;2018年,缙云茭白通过农业农村部地理标志农产品认证.至2018年底,全县茭白种植面积4 386.7 hm2,产量126 000 ...     

粉绿狐尾藻（Myriophyllum aquaticum）对景观池浮游植物群落结构的影响

为探究粉绿狐尾藻(Myriophyllum aquaticum)对景观池浮游植物群落结构的影响,选取粉绿狐尾藻在景观池进行培养,对水样中浮游植物进行定性和定量分析。通过多样性指数、均匀度指数以及浮游植物功能群,探究浮游植物群落结构的变化规律。结果显示：种植粉绿狐尾藻后,景观池浮游植物总生物量由最初的1.27×10⁵ mg/L降低到6.0×10⁴ mg/L,总生物量明显降低;种植区Shannon-Wiener多样性指数由0.88增加到1.05,均匀度指数由0.55增加至0.66;浮游植物功能群共10个,分别为：W1、G、X1、J、L0、M、MP、W2、Y、X3,粉绿狐尾藻种植后,浮游植物功能群由代表超富营养型和高富营养型水体的J、M向代表中营养型或富营养型水体的W2、L0转变。     

营养小肽对黄金鲫血清生化指标、肠和肝组织的影响

为研究营养小肽对黄金鲫(Carassius auratus)血清生化指标和肠、肝组织的影响,在饲料中添加2.0%营养小肽,试验为期128 d。试验结果显示：试验组血清总蛋白和白蛋白均高于对照组。血清碱性磷酸酶和尿素氮试验组均低于对照组(P≥0.05)。血清脂肪酶试验组略高于对照组(P≥0.05)。血清血糖试验组高于对照组(P≤0.01)。病理观察：试验组肠绒毛层非常丰厚,平滑肌结构排列紧密,内层环形肌层较为发达。对照组基膜结构不清晰,固有层和黏膜下层细胞成分增多。肝组织结构较清晰,肝细胞形状规则,细胞界限分明。肝细胞围绕中央静脉呈放射状排列,细胞间可见肝血窦,中央静脉和血窦中可见血细胞。因此,营养小肽可促进氨基酸的吸收,使养殖鱼类表现出良好的营养状况和健康水平。     

超高效液相色谱串联质谱法测定玉米中莠去津及其代谢物的残留量和风险评估

分析莠去津(ATZ)及其代谢物脱乙基莠去津(DEA)、脱异丙基莠去津(DIA)、脱乙基脱异丙基莠去津(DDA)与2-羟基莠去津(HYA)在玉米中残留特性和安全性。采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同时检测ATZ、DEA、DIA、DDA、HYA在玉米中残留量。样品用乙腈-甲酸溶液(体积比,9:1)提取,经二氯甲烷液-液分配净化,用Agilent EC-C18色谱柱分离,电喷雾电离串联质谱正离子多重反应监测(MRM)模式进行测定。ATZ、DEA、DIA、DDA、HYA在0.005～0.5μg/m L范围内线性关系良好,相关系数均 0.99;在鲜食玉米、玉米、玉米秸秆中的定量限均为0.01mg/kg;不同添加水平下,鲜食玉米、玉米、玉米秸秆中ATZ的平均回收率分别为95%～102%、95%～103%、94%～104%,RSD分别为2%～5%、2%～4%、1%～4%; DEA的平均回收率分别为90%～97%、93%～97%、94%～100%,RSD分别为4%～6%、3%～4%、3%～6%; DIA的平均回收率分别为86%～106%、101%～107%、99%～106%,RSD为3%～7%、2%～10%、4%～8%; DDA的平均回收率分别为90%～107%、88%～107%、99%～106%,RSD分别为2%～7%、2%～6%、2%～5%; HYA的回收率分别为88%～102%、90%～105%、91%～103%,RSD分别为3%～5%、3%～8%、3%～7%。膳食风险评估结果表明:普通人群莠去津的国家估算每日摄入量是0.084μg/(kg·d),占日允许摄入量的0.4%。该方法操作简单,回收率和精密度均较高,可同时检测玉米中莠去津及其代谢物的残留量,能满足玉米中莠去津的监测及该药的登记试验需求。玉米中莠去津的长期膳食摄入风险可以接受。     

三倍体长牡蛎浅海筏式养殖试验

2020年6月—2021年12月在北戴河新区洋河口浅海进行了三倍体长牡蛎(Crassostrea gigas)筏式养殖试验,经过1年半的养殖,三倍体长牡蛎平均体质量达到(263.20±29.01)g;平均壳高(127.63±14.69)mm。吊绳与笼养阶段的养殖存活率分别为91.5%、89.6%,肥满度最高达到21.48%,平均单笼产量38.2 kg。     

百合AP2/ERF家族转录因子基因LoERF4的克隆和生物信息学分析

【目的】研究AP2/ERF家族成员ERF基因在百合休眠解除过程中的作用。【方法】以百合品种西伯利亚(Lilium oriental ‘Siberia’)的小鳞茎为试验材料,从前期试验获得的转录组测序数据中筛选得到1个在小鳞茎休眠解除过程中显著上调表达的ERF转录因子,结合RT-PCR技术扩增得到西伯利亚小鳞茎的ERF基因c DNA全长序列,命名为LoERF4;通过多种生物信息学软件对LoERF4的基因结构和理化性质等进行分析;利用荧光定量qRT-PCR技术检测LoERF4基因在小鳞茎休眠解除过程中的相对表达量。【结果】通过克隆得到LoERF4基因全长,该基因开放阅读框全长为606 bp,编码201个氨基酸,含有1个典型的保守AP2结构域;蛋白相对分子量约为21.52 ku,理论等电点为6.43,为亲水性蛋白,没有跨膜结构。qRT-PCR分析结果显示：在西伯利亚小鳞茎休眠解除过程中,该基因的表达量在第20天小鳞茎休眠解除、开始萌发时极显著升高。【结论】在百合中克隆得到的LoERF基因可能是参与调控百合小鳞茎休眠解除进程的关键因子之一。     

建兰花叶病毒广东分离物的全基因组序列分析

【目的】建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,CymMV)是最主要的兰花病毒病原之一,其广泛传播对兰花产业发展造成严重威胁。探究CymMV遗传信息和进化,为广东省兰花病毒病的监测预警和兰花抗病毒病基因工程提供重要科学依据。【方法】对采自广州地区的墨兰疑似病毒病叶片进行CymMV的RT-PCR及DA-SELISA检测鉴定,利用相关分子生物学软件对CymMV分离物进行基因组序列组装、注释、系统进化及选择压力分析。【结果】首次在广东省发现2个CymMV分离物GZV013和ZC-29,基因组全长均为6227 nt,编码5个功能蛋白;GZV013与台湾分离物M2的核苷酸序列一致性为97.03%;ZC29与南京分离物NJ-1的核苷酸序列一致性为97.11%;CymMV各分离物的全基因组序列一致性为86.85%～98.31%,且多样性种群的分化与寄主种类和地理隔离关系密切;CymMV基因组每个区域均受到负选择的影响,并符合中性进化模型;编码RdRp、TGB1和TGB2的基因在基因组中变异率最高。【结论】GZV013与台湾分离物M2的亲缘关系最近,ZC29与南京分离物NJ-1的亲...     

基于ANN的轴流脱粒与分离装置性能指标预测

影响水稻轴流脱粒与分离装置性能指标的因素很多,并且它们之间存在着复杂的非线性关系,用传统方法很难对其进行准确预测。神经网络算法简单、学习收敛速度快、具有线性、非线性逼近精度高等特性。本文以正交旋转组合实验获得的数据作为样本,对人工神经网络(ANN)模型进行训练学习,利用训练后所得到的模型,对性能指标进行了预测。结果表明,网络预测值与实测值之间具有很高的相关性和精确度,为机械性能指标研究提供了一定的理论辅助手段。