新型穿膜肽介导 p53融合蛋白的表达及其免疫原性分析

目的：原核表达新型细胞穿膜肽RDP介导p53融合蛋白,并检测其免疫原性的强弱．方法：以质粒pET28a‐p53为模板扩增p53基因,并克隆至原核表达载体pET28a‐RDP中,构建重组表达质粒pET28a‐RDP‐p53,转化至大肠杆菌Rosetta ,IPTG诱导表达蛋白并纯化,SDS‐PAGE确定该蛋白准确性．同时,将昆明小鼠分为空白对照组（等容生理盐水）和RDP‐p53融合蛋白高、中、低剂量（4 mg／kg ,2 mg／kg ,1 mg／kg）组,经腹腔注射免疫,每隔2 d给药1次,30 d后眼球取血,用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清中IgG的含量．结果：双酶切及测序结果显示, p53基因已克隆入表达载体中;RDP‐p53融合蛋白在上清和沉淀中均获得表达．ELISA测定结果表明,与对照组比较,低、中剂量组小鼠血清中IgG含量没有明显升高（p＞0.05）,高剂量组显著升高（p＜0.05）．结论：成功表达并纯化RD P‐p53融合蛋白,其免疫原性较弱且与给药剂量相关,为进一步研究RD P‐p53融合蛋白对脑肿瘤的药理作用奠定基础．     

柑橘类果汁中柚皮苷的分析

柚皮苷是柑橘汁中主要的苦味物质之一,其含量高低影响果汁的色泽、口味、稳定性等.通过分光光度法分析了9种柑橘类果汁中柚皮苷的含量,研究结果表明：胡柚汁中柚皮苷含量最高,为3.018 g/L,芦柑汁中柚皮苷含量最低,为0.310 g/L.在此基础上,用数学统计的方法对9种柑橘类果汁中柚皮苷含量差异性分析表明：脐橙汁与象山橘汁,椪柑汁与蜜柚汁柚皮苷含量无差别;椪柑汁比芦柑汁高,蜜柚汁比芦柑汁高,差异显著;其余种类果汁间柚皮苷含量均有极显著差异.     

害虫对新烟碱类杀虫剂的抗药性及其治理策略

烟碱和新烟碱类杀虫剂都是作为后突触烟碱乙酰胆碱受体(nAChRs)的激动剂作用于昆虫中枢神经系统,但这两类杀虫剂存在明显不同的选择毒性:烟碱类对哺乳动物毒性较高,而杀虫活性低;新烟碱类具有高杀虫活性,而对哺乳动物低毒。由于新烟碱类杀虫剂的作用方式独特,对以前使用的如拟除虫菊酯类、氯化烃类、有机磷类和氨基甲酸酯类等杀虫剂很少或无交互抗性,该类杀虫剂为防治一些世界性重大害虫(包括对以前使用的杀虫剂具有长期抗性的害虫)作出了重要贡献。但现已发现不少害虫对新烟碱类杀虫剂产生了抗性。文章就害虫对新烟碱类杀虫剂的抗性概况、抗性机理和抗性治理策略进行了综述。     

栀子苷的降糖作用和对PPARγ受体的激活

葡萄糖消耗试验表明,栀子苷能显著促进前脂肪细胞对葡萄糖的吸收。小鼠荷糖试验和四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖试验证实,栀子苷具有剂量依赖性降低小鼠餐后血糖及糖尿病高血糖的作用。通过基于PPARγ受体信号通路的报告基因诱导表达试验,发现栀子苷在体内外的降糖功效,可能与过氧化物酶增殖体激活受体γ的激活有关。     

古方荆防败毒散物质基准质量标准研究

目的建立古代名方荆防败毒散物质基准的质量控制标准。方法薄层色谱法对独活、柴胡定性鉴别;高效液相色谱法对升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷定量分析。结果独活、柴胡薄层色谱斑点清晰,阴性无干扰。升麻素苷在0.076~0.758μg范围内线性关系良好,5-O-甲基维斯阿米醇苷在0.058~0.577μg范围内线性关系良好,二者总加样回收率为96.57%,RSD为1.95%(n=6)。每1g荆防败毒散物质基准中升麻素苷和5-0-甲基维斯阿米醇苷的总量不得少于0.47mg。结论本研究制定的荆防败毒散物质基准定性与定量分析方法准确可行,专属性与重复性良好,可有效控制物质基准质量。     

天然活性物质虎杖苷对过氧化氢诱导的星形胶质细胞增殖及凋亡的影响

虎杖苷(PD)是中药虎杖的主要活性成分,具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤等功效。有报道称,PD可通过激活核转录因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1信号通路抑制过氧化氢(H₂O₂)诱导的心肌细胞凋亡。然而,虎杖苷对星形胶质细胞凋亡的影响和机制还未知。本研究中,我们将不同剂量(25, 50, 100 ng/m L)的PD作用于H₂O₂诱导的星形胶质细胞,采用流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡,CCK-8法检测细胞增殖,蛋白质印迹法检测细胞中caspase3蛋白表达,实时定量聚合酶链式反应技术(RT-qPCR)检测了miR-301a-3p表达。同时,转染miR-301a-3p抑制剂至星形胶质细胞,观察下调miR-301a-3p对H₂O₂诱导的星形胶质细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响。结果显示,PD可促进H₂O₂诱导的星形胶质细胞增殖及细胞周期进程且呈剂量依赖性,而抑制细胞凋亡。此外,PD可促进H₂O     

瘢痕疙瘩不同部位P53的表达及其意义

目的观察瘢痕疙瘩浸润部、增生部和老化部P53蛋白表达差异,以探讨瘢痕疙瘩呈浸润性生长的机理。方法取手术切除的瘢痕疙瘩组织及正常皮肤各16例为标本,对其行P53蛋白免疫组织化学染色,比较瘢痕疙瘩不同病理部位和正常皮肤P53表达差异。结果瘢痕疙瘩浸润部P53表达明显高于增生部、老化部和正常皮肤（P＜0.01）,瘢痕疙瘩增生部P53表达明显高于老化部和正常皮肤（P＜0.01）,而后两者间表达差异无统计学意义（P＞0.05）。结论瘢痕疙瘩不同部位P53的表达差异可能是导致瘢痕疙瘩呈浸润性生长的机理之一。     

银翘复方药渣发酵处理试栽毛头鬼伞及主要药物成分分析

为回收利用生产银翘片废弃药渣,以毛头鬼伞为供试菌株,发酵处理银翘药渣;建堆配料设计原则为控制总料C/N接近40∶1,以玉米芯为主料(配合添加奶牛粪、尿素),逐渐增大银翘药渣用量,以替代玉米芯;堆料共采用4个配方,配方A(CK):玉米芯200kg,牛粪100kg,尿素3.5kg,辅料6%(生石灰2%、石膏2%、过磷酸钙2%);配方B:玉米芯100kg,银翘药渣50kg,牛粪50kg,尿素1.0kg,辅料6%;配方C:玉米芯75kg,银翘药渣100kg,牛粪50kg,辅料6%;配方D:玉米芯50kg,银翘药渣150kg,牛粪50kg,辅料6%。4个配方堆料总干质量均在200kg以上,依墙建堆成半圆锥形(h≥1.0m,r≥1.4m);发酵升温14d(4-3-3-2-2)、经4次翻堆后,摊料降温装袋接种,待菌丝满袋后脱袋覆土出菇。结果表明:以配方C的产出率为最高,其相应生产指标为,初始C/N为41.66、终点C/N为23.71、腐熟度T为0.569、接种满袋率93.7%、菌袋平均产量381.9g·kg~(-1)、生物学效率41.0%。经HPLC检测,配方C发酵料中绿原酸、牛蒡苷含量分别为5.20~5.40、4.49~5.30μg·g~(-1),其栽培所得子实体中绿原酸、牛蒡苷含量分别为0.40~0.45、3.81~4.27μg·g~(-1),其中牛蒡苷从栽培料到子实体的迁移率达84.93%。     

花序花期喷水对“西拉”葡萄果实品质的影响

"西拉"葡萄(Vitis vinifera L.)果穗紧密,果粒挤压变形严重,内部果粒着色差,果实成熟期病害严重,品质难以保证。葡萄开花期连续降雨可导致坐果降低,通过试验模拟葡萄开花期降雨,可以一定程度上降低葡萄坐果率,达到疏松果穗的目的。试验以"西拉"葡萄为试材,设置葡萄开花前期、后期和整个花期3个喷水处理,每天喷一次水,在葡萄果实膨大期调查坐果率;葡萄成熟后调查葡萄发病率,测定葡萄还原糖、总酸、总酚、总单宁、总花色苷、单体花色苷、单体酚类含量。结果表明:花期喷水能提高葡萄浆果品质,且受喷水次数与时期影响较大。整个花期每天喷一次水,"西拉"葡萄品质表现最佳,开花后期喷水比前期喷水的葡萄浆果品质更好。因此,建议在葡萄管理中,若开花期天气连续晴朗,可以通过花序喷水疏松葡萄果穗,提升葡萄品质。