撑绿杂交竹快繁育苗体系研究

撑绿杂交竹是广西柳州林科所通过杂交选育的一个优良新种。它的快繁育苗体系包括切口带兜埋秆育苗、埋杆(埋多节)育苗、埋节(埋单节或双节)育苗、主枝次生枝扦插育苗、侧枝扦插和组织培养育苗等几个重要组成部分。通过几年在四川引种试验研究，现已圆满完成并获得成功。     

撑绿杂交竹分株生物量估算

【目的】能够更好地估算丛生竹的生物量。【方法】以撑绿杂交竹为研究对象,通过查询已有文献和实地调查,对不同径级、不同年龄和不同地域的撑绿杂交竹分株生物量进行了研究。【结果】结果表明,2～3a生竹秆生物量分配比例极显著(P<0.01)高于4a生竹秆生物量分配。其中,2～3a生竹秆生物量占分株地上生物量的63.74%～79.99%,竹枝占8.63%～27.16%,竹叶占4.04%～11.38%。竹秆生物量占分株地上生物量的比例随着径级的增加而升高,竹枝生物量所占比例随着径级的升高而降低,但是不同研究地点生物量分配格局的变化趋势不尽相同。四川长宁撑绿杂交竹竹枝生物量分配比例高于四川雅安的竹枝生物量分配比例,叶生物量比例则低于四川雅安的。撑绿杂交竹分株生物量可以通过模型进行较好的拟合,地上部分生物量和竹秆生物量用多项式(y=a0+a1x+a2x2+a3x3)拟合较好,竹枝生物量用线性模型(y=a+bx)拟合较好,竹叶生物量用指数模型(y=axb)拟合较好。通过对实测数据与不同地点撑绿杂交竹分株生物量模型模拟值的比较,四川长宁县两个数据点模拟值和实测值的差异未达到显著水平,而与云南水富县的模拟值差异达到极显著(P<0.01)水平。【结论】撑绿杂交竹分株年龄和径级对分株生物量分配格局有重要的影响,且不同地域间的生物量分配格局也存在差异,反映了撑绿杂交竹具有较强的形态可塑性。应用生物量模型模拟的方法对不同地域撑绿杂交竹分株生物量进行预测时,要首先进行模型的选择和回归系数的校正。     

杂交竹梢枯病菌毒素蛋白纯化及致病力

撑×绿杂交竹(Bambusa pervariabilis×Dendrocalamopsis grandis)梢枯病是长江中上游退耕还林毁灭性病害之一,可造成严重的生态和经济损失。由于该病是近年来四川栽培区新发现的病害,相关研究较少,目前仅对该病的病原及发生规律(朱天辉等,2009a)、症状特点及空间格局(朱天辉     

A蛋白间接酶联免疫法对杂交竹梢枯病菌蛋白毒素的检测

采用A蛋白双抗夹心法,在包被抗血清前先用A蛋白包被微量测定板,利用A蛋白抗血清中免疫球蛋白的FC部位结合,以F(ab’)2部位吸附抗原毒素,在被吸附的毒素上再加一层相同的抗血清和酶标记的A蛋白,以检测杂交竹梢枯病菌毒素蛋白。结果表明:A蛋白预包被能提高检测效价,降低本底值。抗原浓度对酶联检测有显著影响,纯毒素稀释倍数大于10-6,检测结果与对照接近,不适宜用于检测。OD值随抗原稀释倍数的增加下降,且下降幅度受测定抗血清浓度的影响;当检测液稀释1∶5(1∶50时,测定抗血清浓度在10-4(病株汁液)和10-6(含毒素发酵液)时可测出显著差别。抗血清浓度为10-4下,含毒素发酵液在标记A蛋白浓度为1∶10(1∶640范围内有较好测定结果,而病株汁液在标记A蛋白浓度为1∶10(1∶160才能测出。本研究首次将此技术用于真菌毒素检测中,该方法对杂交竹病株汁液中的致病毒素有高度的特异性和灵敏度,能早期诊断暗孢节菱孢菌引起的杂交竹梢枯病。     

杂交竹梢枯病菌毒素蛋白的质膜结合位点

为探明杂交竹梢枯病菌毒素蛋白的质膜结合位点及在不同品种的结合活性,在低压层析分离纯化毒素蛋白的基础上,以该蛋白免疫新西兰大白兔制备毒素特异性抗血清,并将该蛋白用不同浓度的抗体吸附后处理杂交竹幼嫩枝条。结果表明:毒素所引起的症状有不同程度的减轻,说明所制备的抗体在与毒素发生特异性免疫学反应的同时,可部分封闭毒素分子上与毒素受体结合的位点;利用竞争酶联免疫吸附试验(ELISA)测定杂交竹嫩枝的质膜制剂与毒素蛋白的结合活性显示,质膜制剂与毒素结合后能部分阻断毒素与其抗体的免疫学反应,即质膜制剂中含有毒素的结合位点,且不同品种的结合活性有差异;用胰蛋白酶或加热处理质膜制剂后,质膜制剂对毒素与其抗体反应的抑制作用消失,证实质膜制剂中与毒素结合的是蛋白类物质。     

不同坡向和海拔对撑绿杂交竹生长的影响研究

通过对云南省昭通市绥江县的材用撑绿杂交竹的调查，测定其在不同坡向、海拔条件下的胸径和高度等生长因子，并分析与坡向、海拔的关系。结果表明：坡向对高度有极显著影响，阴坡竹子比阳坡竹子平均高0．5m；海拔对撑绿杂交竹的胸径和高度都有显著的影响；同因子类型组合对撑绿杂交竹胸径的影响不显著，但是对高生长有显著影响，平均竹高变化范围在7．57-8．36m之间。     

杂交竹抗梢枯病诱导因子筛选及其持续期研究

本文利用病原毒素同源异质的特点诱导杂交竹抗病潜力,筛选出抗梢枯病的最佳诱导因子并排除其对病原菌的直接作用,经琼脂玻片萌发法测定3种诱导因子(温度灭活毒素、蛋白酶降解毒素和细胞壁成分)对杂交竹梢枯病病原菌暗孢节菱孢菌孢子萌发的抑制作用,结果显示经过60℃灭活毒素浓度为40μg/mL处理的孢子萌发效果最为理想。通过最佳诱导因子对杂交竹不同品种诱导持续期进行测定,采用针刺法先接种诱导因子后挑战接种病原菌,1～40 d内观察抗感品种对诱导因子响应的差异,症状上杂交竹8#的感病程度重于3#和6#,40 d时叶片和枝干变黄干枯,病情指数结果表明,3个杂交竹品种接种诱导因子后感病程度降低,诱抗效果显示杂交竹6#的诱抗指数高于3#和8#。以上结果证明诱导因子使不同杂交竹品种均产生了一定的抗性且抗性越强的品种诱导抗性越好。     

撑篙竹×大绿杂交竹栽培技术

撑篙竹产自广东、广西以及四川等地区,大绿竹产自广西地区,二者均喜阴性湿润环境,经过多年的试验研究,相关林业科技学者已经选育出了撑×绿3、6、8、30几个不同的杂交品种,这些不同的杂交品种都是以撑篙竹和大绿竹为父母本杂交选育而成的。本文融合了笔者的实际工作经验,从几个不同的方面对撑篙竹×大绿竹杂交竹的栽培技术进行了具体的研究和分析,以期为相关人士的研究带来一些借鉴与参考。     

浅谈杂交竹枯萎病

最近，在我区柳州等地的杂交竹枯死较多，且具有明显传染扩展趋势，经病原菌的分离鉴定，诊断为杂交竹枯萎病。该病表现的症状为：部分枝条慢慢黄化枯死，最后整株枯死。病竹枝梢基部可见有赤褐色的条斑，病原菌子实体在病部表现不明显。剖开病竹根部或茎部，均可见木质部变黑褐色。我们利用病竹的根、茎部分别进行病原菌的组织分离培养（培养基为pDA）。7天后，培养皿上长满白色棉絮状菌丝，置显微镜下镜检，菌丝有隔分枝，冬季观察还可看见菌丝上单生或串生厚垣孢子，且有两种类型的无性孢子：大型孢子，半月形或镰刀状，两端尖，无色，…     

绛红褐链霉菌YSSPG3的鉴定及其抗菌蛋白纯化

 从四川碧峰峡撑×绿杂交竹健康植株根际分离到对杂交竹梢枯病菌(Arthrinium phaeospermum)有强拮抗作用的放线菌菌株YSSPG3,该菌株的无菌发酵液对多种真菌和细菌具有抗菌活性。通过对菌株YSSPG3的形态特征、培养特性、生理生化特性、细胞壁组分与16S rDNA 序列分析,确定为绛红褐链霉菌(Streptomyces purpeofuscus)。采用硫酸铵沉淀和柱层析法对发酵液中起主要抑菌作用的抗菌物质进行分离纯化,获得单一的抗菌蛋白AMP,分子量为5 075.619 Da,等电点为6.77。抗菌蛋白在温度≥60℃和pH＜7,以及紫外线照射时间≥12 h的环境下抑菌活性均明显下降,但受蛋白酶K、胰蛋白酶和氯仿影响不大,无几丁质酶、葡聚糖酶等水解酶活性。利用Edman降解法测定抗菌蛋白N末端25个氨基酸序列,与来自 Streptomyces tendae  Tü901 的chitin-binding protein AFP1的同源性较高,为81.00%。