GPX4失活通过JNK通路缓解LPS诱导巨噬细胞炎症反应

【目的】研究硒蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidases 4,GPX4)失活如何参与调控脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症反应及其潜在的分子机制。【方法】体外培养RAW264.7巨噬细胞,以DMSO为对照,使用0.1～5.0μmol/L GPX4抑制剂FIN56处理,通过CCK-8法检测细胞活力和Western blotting检测GPX4蛋白表达水平,确定抑制剂最适浓度。将RAW264.7巨噬细胞分为4组：对照组,添加DMSO培养24 h; FIN56(GPX4抑制剂)组,添加0.5μmol/L FIN56培养24 h; DMSO-LPS组,DMSO培养24 h后使用LPS(100 ng/mL)刺激3 h; FIN56-LPS组,FIN56培养24 h后使用LPS刺激3 h。各组细胞经培养后,利用荧光探针2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯(2′,7′-dichlorodi-hydrofluorescein diacetate, H₂DCFDA)检测细胞内活性氧(reactive...     

基于网络药理学探究乌梅散加减方治疗猪传染性胃肠炎的作用机制

【目的】借助网络药理学手段探究乌梅散加减方治疗猪传染性胃肠炎(TGE)的作用机制。【方法】利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、Swiss TargetPrediction获取乌梅散加减方的活性成分与作用靶点,应用公共比较毒理基因组学数据库(CTD)获取TGE的相关靶点,使用STRING数据库绘制乌梅散加减方与TGE交集靶点的蛋白互作(PPI)网络图,利用DAVID对交集靶点进行GO功能和KEGG通路富集分析,探究乌梅散加减方治疗TGE的作用机制。【结果】从乌梅散加减方中共筛选到槲皮素、山柰酚、芒柄花素等125种活性成分和JUN原癌基因(JUN)、肿瘤坏死因子(TNF)、信号传导与转录激活因子3(STAT3)等58个作用靶点。GO功能富集分析显示,共得到生物过程138个条目,涉及免疫反应、血管内皮因子生成、RNA聚合酶Ⅱ启动子对pri-miRNA转录的正调控等;细胞组分13个条目,涉及胞外区、细胞外空间、膜筏等;分子功能32个条目,涉及细胞因子活性、生长因子活性、白细胞介素2(IL2)受体活性等。KEGG通路富集分析显示,共得到135条信号通路,其中IL17信号通路、Th1...     

杧果皮不同萃取物抑菌活性初探

采用95%乙醇或95%甲醇粗提,乙酸乙酯或二氯甲烷再提,以抑制菌丝生长速率法测定了杧果皮萃取物对水稻纹枯病菌、小麦纹枯病菌和小麦赤霉病菌等10种病原菌的生物活性。结果表明:95%甲醇提取的萃取物比95%乙醇提取的萃取物对病菌的抑制率高,二氯甲烷萃取物又比乙酸乙酯萃取物的抑制率高;丙酮做溶媒比用无菌水做溶媒对病菌的抑制率高,但其本身对某些菌种的生长有一定程度的影响;95%甲醇提取的二氯甲烷萃取物对小麦赤霉病菌的毒力最强,EC50值为0.005741g/mL,95%乙醇提取的乙酸乙酯萃取物对水稻纹枯的毒力最低,EC50值为0.046160g/mL。     

国产人工打洞沉香中一个新的2-(2-苯乙基)色酮二聚体

为进一步研究国产人工打洞法所结沉香中的化学成分,本研究采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20、半制备高效液相等色谱方法从其乙酸乙酯萃取物中分离纯化得到2个单体化合物.根据核磁共振(NMR)、质谱(MS)等波谱数据分别鉴定为2-(2-苯乙基)色酮二聚体(+)-3′,3′′′-dihydroxy-4′,4′′′-di...     

茶叶中EGCG改善肥胖大鼠肠黏膜屏障损伤的作用研究

为探究EGCG对高脂诱导肥胖大鼠肠黏膜屏障损伤的保护作用,将雄性SD大鼠随机分为正常组、肥胖组、EGCG低剂量及高剂量干预组,每组8只.通过分析大鼠的体重、血清指标、脏器指数及脂肪组织病理切片评估肥胖大鼠脂质聚集与炎症状况及EGCG的干预作用.通过分析肠道病理切片、绒毛长度/隐窝深度值(V/C值)以及血清中脂多糖(LP...     

矮牵牛花香成分的鉴定及相关基因的表达分析

为了研究矮牵牛花香成分与相关基因之间的联系,本研究以杂交选育的3个芳香矮牵牛株系(5, 6,17号)为材料,采用静态顶空进样-气相色谱-质谱联用技术(SPME-GC-MS)和实时荧光定量技术,鉴定芳香矮牵牛鲜花的香气成分,分析花香物质代谢相关基因的表达特征。结果表明：3个株系共鉴定出47种花香组分,其中萜类化合物的种类多且含量较高,株系间花香物质组成差异较大;通过比较看出,6号株系萜类化合物的含量较高,17号株系苯基/苯丙类物质的含量较高,5号株系脂肪酸类物质的含量较高;PAAS、BPBT、PAL都是调控苯基/苯丙类化合物合成的关键酶,EOBⅡ是苯丙烷类挥发性生物合成调控因子,在开花期5号株系中PAAS与PAL基因表达上调,6号株系中的BPBT基因表达上调,17号株系中的PAAS、BPBT和EOBⅡ基因表达显著上调,这些基因与香气组分中苯基/苯丙类物质的含量密切相关。研究结果可为后续培育芳香矮牵牛新品系、克隆矮牵牛花香基因、研究利用矮牵牛特有花香物质提供参考依据。     

多花黄精(Polygonatum cyrtonema Hua)高效再生体系的建立

为建立多花黄精高效再生体系,试验以多花黄精种子无菌萌发后形成的幼芽为材料,采用正交试验设计,筛选其愈伤组织和不定芽诱导的较优配方,并进一步开展了不定芽增殖、生根和移栽驯化试验。结果表明,MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L有利于诱导无菌幼芽形成愈伤组织,诱导率达83.5%;不定芽诱导较好的培养基配方为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L和MS+6-BA3.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L,诱导率均为100%;不定芽增殖较好的培养基配方为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA0.2 mg/L,增殖系数达4.7;适宜的生根培养基配方为1/2MS+NAA 0.1 mg/L;组培苗移栽到蛭石∶泥炭土∶珍珠岩=1∶2∶1的混合基质中,成活率达100%。试验构建了以多花黄精种子为外植体的离体高效再生体系,为多花黄精种苗快速繁殖提供技术途径。     

基于正交设计的露薇花组培苗增殖及瓶内开花

以露薇花组培苗为试验材料,采用L9(33)正交试验方法,在MS基本培养基中添加不同浓度的蔗糖、6-BA和NAA,以期筛选露薇花增殖的最适条件;添加不同浓度的6-BA,NAA和GA3,筛选最适露薇花瓶内开花的培养条件。结果表明,露薇花无菌苗最佳增殖条件为MS+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA (蔗糖浓度30 g/L),最高增殖倍数为3.17倍,最适开花条件为MS+1.0 mg/L 6-BA+3.0 mg/L GA3+0.5 mg/L NAA,平均开花率可达70%。本研究为露薇花的高效繁殖和试管花卉的开发提供了理论依据和技术支持。     

毛竹PeYTH2基因的克隆与初步功能分析

N⁶-methyladenosine (m⁶A)是 RNA 中最广泛的甲基化修饰方式之一,是效应蛋白(readers)的结合位点,在 mRNA 前体剪接,mRNA 降解和翻译,维持基因和基因组稳定性中发挥了重要作用。包含 YTH(YT521-B homology)结构域的 RNA 结合蛋白是重要的调控蛋白,通过结合 m⁶A 来影响含有 m⁶A 修饰的RNA。植物比其他真核生物含有更多的 YTH 蛋白,但其在毛竹中的生物学重要性仍然未知。本研究利用PCR 从毛竹 c DNA 中克隆 PeYTH2,通过生物信息学方法,对 PeYTH2 蛋白序列进行进化分析和氨基酸序列比对发现,其与麦类和高粱之间的同源性较高并且与水稻、大麦、高粱之间的功能域相似度较高。序列分析表明,PeYTH2 的 CDS 长度为 1 887 bp,编码 629 个氨基酸,蛋白质分子量为 68.262 kD。采用实时荧光定量聚合链式反应(qPCR)分析毛竹 Pe YTH2 的空间表达模式和 ABA 与 NaCl 逆境处理下 PeYTH2...     

文心兰花瓣转录组分析与调控花瓣衰老关键基因挖掘

花瓣衰老是观赏园艺植物具有经济价值的重要性状。为了解文心兰衰老花瓣的转录组学特征,挖掘参与调控文心兰花瓣衰老的关键基因,本研究对盛开期(E)、衰老初期(F)和衰老期(G)的文心兰切花花瓣进行RNA测序。测序序列经组装拼接后,共获得48 661个Unigenes,在NR、NT、SwissPort、KEGG、COG、InterPro、GO数据库中分别注释到34 922 (71.77%)、26 286 (54.02%)、23 134 (47.54%)、25 678 (52.77%)、14 483(29.76%)、25 580 (52.57%)和9 103 (18.70%)条Unigenes。经表达量比较,在盛开期(E)和衰老初期(F)之间获得差异表达基因3 914条,衰老初期(F)和衰老期(G)之间获得差异表达基因1 579条。经GO功能富集分析,花瓣盛开期(E)和衰老初期(F)共有3 914、衰老初期(F)和衰老期(G)之间共有1 579条差异表达基因被注释参与生物学过程、细胞组分和分子功能三个功能组。KEGG功能富集分析表明,盛开期(E)和衰老初期(F)之间的差异表达基因参与18个代谢通...