小鼠CD19基因部分片段的克隆及其鉴定

[目的]为了研究小鼠CD19胞膜外区的结构与功能。[方法]应用反转录—聚合酶链式反应技术(RT-PCR),通过一对自行设计的引物,从小鼠脾脏RNA中扩增出一条特异性基因片段,大小约为910 bp,对该片段进行酶切和测序鉴定。[结果]所获得的DNA片段的酶切位点与所报道的小鼠CD19基因一致,从而确定其为小鼠CD19胞膜外区基因。[结论]该研究为小鼠CD19胞膜外区的结构与功能的进一步研究提供了试验基础。     

黔东西地区桃树桑白蚧的发生及防治研究

桃树桑白蚧在黔东南地区每年发生三代，以受精雌成虫固定在枝干上越冬。通过试验，在冬季修剪后进行彻底的人工刮除枝干上的越冬雌成虫和老树皮，其防效高于仅用化学药剂，对第一代若虫的防效达80%左右；用人工防治与化学防治相结合防除越冬代雌成虫，对第一代若虫的防效达95％以上。     

中年C57BL/6小鼠焦虑行为改变

利用高架十字迷宫﹑旷场和黑白巷3个任务检测中年C57BL/6小鼠焦虑行为,探索是否有年龄及性别的影响以及3个任务是否具有一致性.结果表明,在高架十字迷宫中15月龄雌鼠进入开放臂的次数显著多于同龄雄鼠和7月龄雌鼠.15月龄鼠在黑白巷任务中的潜伏期和黑端停留的时间明显长于7月龄鼠,主要归因于雄鼠,而15月龄鼠从黑色端至白色端次数少于7月龄鼠,雌雄鼠均有改变.在旷场中,15月龄鼠的潜伏期和周边所花的时间要显著长于7月龄鼠,以雌鼠改变为主.这些结果提示中年C57BL/6小鼠即有焦虑性改变,但改变的方向并不一致,依任务和性别而定.     

云南稻种对白叶枯病菌系抗性分析

 从1983～1990年,用云南主要的4个菌系群菌株,测定了28个单位的940份地方水稻品种抗性,结果表明抗1群菌的材料占30.0%,抗Ⅱ群菌占29.3%,抗Ⅲ群菌占30.3%,抗Ⅳ群菌占28.2%。通过比较分析,筛选了部分品种供生产和推广使用,研究证明菌系与品种有特异性交又互作关系。     

春结球白菜新品种陕春白1号及其高产栽培技术

近几年生产上使用的春栽大白菜品种大多来自韩国和日本,其价格昂贵且抗软腐病能力差,目前国内可用于春种的大白菜品种很少.为此,笔者开展了春结球白菜育种工作并成功地育成了春结球白菜一代杂种,并在陕西、广西、河南等地进行了三年区域试验,均表现早熟、丰产、不易抽薹等特点.2001年5月顺利通过了陕西省农作物品种鉴定委员会蔬菜专家组鉴定并定名为陕春白1号,现将其特性及高产栽培技术介绍如下:     

三香优516水稻

选育单位湖南农业大学。审定编号湘审稻2005021。特征特性该品种属三系一季杂交晚籼组合。在湖南省作一季晚稻栽培,全生育期126天左右。株高约131厘米,株型松散适中。叶色较浓,叶鞘、叶缘、稃尖均无色,茎秆粗壮,繁茂性好。湖南省区试结果:每667平方米有效穗17.9万穗,每穗总粒数     

水稻白叶枯病抗性研究进展

白叶枯病是世界水稻重要病害之一,且已成为研究植物和病原菌互作的模式,对该病的研究对其它病害有借鉴意义。目前已鉴定出29个抗白叶枯病基因,其中17个基因被定位到染色体上,4个基因已被克隆,在这些工作的基础上,已通过分子标记辅助选择和转基因方法育成了一些抗病新品系,展示了水稻抗白叶枯病分子育种的广阔前景。     

人类胚胎干细胞与小鼠囊胚嵌合的探讨

【目的】探讨人类胚胎干细胞(Human embryonic stemcells,hESCs)能否在小鼠胚胎环境中生存并参与其各个组织器官的分化,为hESCs与小鼠囊胚嵌合的可行性研究提供依据。【方法】将154枚受精后3.5 d(3.5days postcoitum,3.5 dpc)ICR品系小鼠囊胚随机分为3组:试验组(注射hESCs)、模拟注射组(注射针仅刺破透明带及滋养层细胞,但不注射细胞和溶液)及对照组(未注射),于注射后培养24 h统计囊胚完全孵化率。将稳定转染增强绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)的含有9~15个hESCs的小细胞团块,显微注射入3.5 dpcICR品系小鼠囊胚腔内,注射后分别于3,24,48,69,77,94和116 h,在普通荧光显微镜下观察EGFP阳性细胞的定位与动态分布情况,并将嵌合体胚胎移植入假孕母鼠子宫内,分别于移植后第4天和第6天处死孕鼠,普通荧光显微镜下观察EGFP阳性细胞在整个小鼠胚胎中的分布情况。【结果】注射后24 h,试验组和模拟注射组的囊胚完全孵化率分别为73.6%和77.1%,均极显著高于对照组(38.3%)(P<0.01),有88.9%(32/36)的胚胎中的hESCs迁移并定位在小鼠内细胞团(ICM)及其临近的滋养层细胞上;体外培养48 h后,EGFP阳性细胞数进一步减少;116 h后,只有1枚胚胎仍残留3~4个EGFP阳性细胞,且散在分布于ICM克隆之外。体内发育试验结果显示,将43枚注射后的嵌合体囊胚移植入6只代孕母鼠子宫内,获得了22枚脱膜,有17枚脱膜中含有胚胎,其中形态正常胎儿14枚,没有胚胎含有EGFP阳性细胞。【结论】hESCs很难与小鼠囊胚正常嵌合。     

小鼠卵母细胞的孤雌激活与ES细胞样集落分离

对小鼠卵母细胞进行孤雌激活用于单性生殖研究。取成年昆明白小鼠进行超数排卵,乙醇激活,同小鼠输卵管上皮细胞共培养并添加mM16培养基培养至早期囊胚阶段,移至小鼠胎儿成纤维细胞饲养层上,换成ES细胞培养液继续培养,分离消化ICM,重新接种,对分离出的ES样细胞集落进行分离培养鉴定。结果显示,小鼠卵母细胞激活率为96.99%,2-细胞发育率为93.17%,桑椹胚发育率为80.33%,囊胚发育率为73.22%。小鼠孤雌激活囊胚中分离的ES样细胞集落具有一系列ES细胞所特有的特征,如呈现出岛屿状形态,碱性磷酸酶染色为阳性,体外能够自发分化成上皮样或单个散在分布的细胞等。试验证明,小鼠孤雌胚中可以分离出ES细胞样集落。     

不同品系小鼠精子冷冻及冻融精子体外受精的研究

采用小鼠精子冷冻、冻融精子体外受精的方法,进行小鼠保种、引种、生物净化及品系标准化的可行性研究,并初步探究小鼠精子冷冻的影响因素。实验选用同一年龄5种不同品系小鼠分别进行精子冷冻、复苏,并比较各品系冷冻效果及冻融精子的体外受精(IVF)率。结果显示,冷冻后各品系小鼠精子复苏存活率约在15%～50%之间;冻融小鼠精子体外受精结果随遗传背景的不同差异显著,受精率分别为:KM小鼠68.4%、ICR小鼠30.3%、DBA/2J小鼠47.2%、C57BL/6J小鼠6.8%、BALB/cA小鼠25%。冻融精子IVF得到的胚胎可以耐受体外培养。