专家文库

丁能水，男，1975年生，江西东乡人，博士、研究员、第十一届全国青联委员、中国五四青年奖章获得者，中国青年科技工作者协会会员，江西养猪行业协会常务理事，江西省猪联合育种专家组成员，江西农业大学动物科学技术学院副院长。1997年本科毕业于江西农业大学动物科技学院动物科学专业，     

专家文库

陈健雄（1966-）,研究员、高级兽医师、博士;现任广东省中山职业技术学院副院长、中国农机学会机械化养猪协会理事长;从事大型养猪企业管理、猪病防治、遗传育种、养猪生产的研究和实践工作20多年。曾创建了著名的大型养猪企业广东白石猪场并担任总场场长和技术总监达14年，并为全国多家大型猪场、饲料和动物保健企业提供管理策划和技术服务。     

青年专有文库

杨公社，西北农林科技大学动物科技学院教授、博士生导师，民盟陕西省委副主委，政协陕西省委常委。1959年1月生，陕西富平人。1982年毕业于西北农业大学畜牧专业，同年考取西北农业大学动物遗传育种专业硕士研究生，1985年获硕士学位并留校任教。1993年获博士学位并晋升为副教授，[第一段]     

我国濒危家养动物细菌人工染色体基因组文库的构建及应用

细菌人工染色体(BAC)是新近发展起来的一种载体系统,具有克隆容量大,遗传特性稳定,转化效率高,易于操作等优点.在基因组文库构建和基因的快速克隆等方面已得到广泛应用.濒危家养动物细菌人工染色体基因组文库构建的目的在于有效、永久保存和利用其基因资源、快速克隆重要经济和抗逆性状基因以及为广泛、深入开展分子生物学研究提供宝贵的材料.     

青年专家文库 王琴

王琴：女，研究员，博士。现在中国兽医药品监察所检测技术研究室，一直从事猪瘟病毒病原学，分子流行病学、致病机理、诊断技术及综合防控技术方面的研究。2003年被评选为农业部具有突出贡献的中青年专家，2006年获得国务院特殊专家津贴，2007年入选新世纪百千万人才工程国家级人选，2007年被评选为2006／2007年度振兴中国畜牧贡献奖十大杰出人物。     

利用改进的Oligo-Capping法构建甘蔗茎全长cDNA文库

Oligo-Capping法是目前全长cDNA文库构建的重要方法之一.笔者在引进、消化和吸收的基础上,通过对特异引物和接头序列的设计,及cDNA扩增反应条件的优化,对该方法进行了一些切实可行的改进,形成了一套简便易行的技术体系.利用本研究中改进的Oligo-Capping法,成功地构建了甘蔗茎全长cDNA文库.综合评价结果表明,本研究中所构建的甘蔗茎全长cDNA文库的库容大于2.5x106cfu,重组率为91%,全长率高达88.9%.本文库的构建为进一步甘蔗茎中全长基因的克隆和功能基因的表达分析奠定了基础.     

东方田鼠肝脏裂解物筛选日本血吸虫成虫噬菌体展示cDNA文库

东方田鼠对血吸虫具有天然抗性。为寻找东方田鼠抗血吸虫抗性相关靶基因，探索其分子机理，我们将日本血吸虫童虫与东方田鼠不同组织／器官裂解物共培养，比较它们对血吸虫童虫的杀伤效果，之后，以杀伤效果较好的肝脏裂解物为探针，以亲和淘洗方法筛选日本血吸虫成虫（44d）噬菌体展示cDNA文库。经三轮筛选后，随机挑取92个噬菌体克隆进行序列测定及生物信息学分析，获得了19个有效EST序列，其中15条EST序列与已知基因或表达序列标签同源，4个EST序列与已知基因或表达序列标签均无同源性，为新的表达序列标签。对19个有效EST编码蛋白的功能预测结果显示，其中6个为卵壳蛋白（Eggshell protein）相关基因，10个EST及其编码蛋白的功能与血吸虫基因表达调控及蛋白质加工修饰相关。研究结果提示，东方田鼠直接或间接地影响血吸虫基因表达，进而影响血吸虫的发育，可能是东方田鼠具有抗血吸虫特性的一个重要分子机理。     

应用酵母双杂交系统初步筛选IBDV VP2结合蛋白

用RT-PCR扩增VP2 cDNA并克隆入诱饵载体pSos,与鸡法氏囊cDNA文库中分离的质粒DNA共转化cdc25H,筛选阳性酵母克隆;用酵母质粒DNA转化大肠杆菌,提取质粒再分别与诱饵载体pSosVP2共转化酵母细胞,利用酵母双杂交系统对阳性克隆进行验证.对阳性克隆的插入片段进行序列分析,根据生物信息学分析结果初步确定IBDV VP2结合蛋白编码基因.结果显示,经酵母双杂交共筛选出48个候选阳性克隆,分别转化酵母菌,经酵母双杂交验证后,获得阳性克隆19个.进一步的序列分析显示,在19个插入序列中,共编码8种不同的多肽,分别是Ras超家族中的RRAS2、Rit1和N-Ras,肿瘤相关蛋白TCTP和PARP14,抗病毒Mx蛋白,LAMB3蛋白以及蛋白激酶PRKX.VP2候选结合蛋白的获得为IBDV受体、诱导细胞凋亡或逃逸宿主抗病毒机制等研究奠定了基础.     

油茶种子cDNA文库的构建

以湘林1号和湘林4号油茶优良无性系近成熟种子为材料,采用裂解法和改良的CTAB法提取总RAN;用磁珠法分离得到纯化的mRNA;在反转录酶和其他酶的作用下合成一链cDNA和二链cDNA;经与质料载体重组和转化大肠杆菌,成功地构建了世界上第一个油茶种子cDNA文库.经检测,文库存容量达106,重组率为88.21%.测序结果表明:克隆片段长度一般都大于600 bp,说明构建的文库质量较高,能够满足ESTs文库构建及从文库中分离筛选重要基因等研究工作的需要,为进一步研究奠定了很好的物质和技术基础.     

Construction of cDNA Library from Populus euphratica

1 Introduction Populus euphratica is a salt tolerant tree species, which is mainly distributed in the desert regions in northwest China (Wei 1993). Moreover, it is the only large tree species, which can survive and develop into forest in these arid and saline-alkali areas. P. euphratica forest plays a very important role in restraining the expansion of desert, maintaining ecological environment in west China, protecting the biological diversity and raising the local people抯 living standard…