禽致病性大肠杆菌未知功能基因突变株的构建及致病特性分析

采用抑制差减杂交技术(SSH)对禽致病性大肠杆菌(APEC)高致病株E037(血清型O78)与非致病菌株K-12 MG1655进行基因组差异片段克隆与分析。从E037株中共检出17个特异性差异片段,选取其中的编号为88#的基因进行突变株的构建。通过PCR扩增出88#的目的基因片段,并插入到T-easy载体的多克隆位点中,随之克隆到p MEG-375自杀性载体中,构建自杀性载体p MEG375-88#,将突变载体转化到受体APEC E037中,根据同源重组原理,筛选出E03788#基因插入突变株E037-1。对21日龄白来航SPF鸡右胸气囊分别接种E037、E037-1株0.1 mL(108cfu/mL),在6,24和48 h分别扑杀SPF鸡,无菌采集血液、心脏、肝、脾、左肺、肾进行细菌学检查,同时进行病变观察。结果显示:接种鸡6 h后,E037-1在肝、脾和肺中的细菌数比E037明显降低,差异极显著(P0.01);接种鸡24 h后,E037-1在心脏、肝、脾和肺中的细菌数与E037比较有所降低,差异显著(P0.05);接种鸡48 h后,E037-1在心、肝中的细菌数比E037明显降低,差异极显著(P0.01),说明E037-1突变株的致病性明显下降。结果显示88#基因可能是APEC的致病相关基因,其功能值得进一步研究。     

玉米抗甘蔗花叶病毒分子标记与检测技术

开发实用分子标记和高效检测技术是开展分子标记辅助育种的基础.本文采用"一致性",抗甘蔗花叶病毒QTL区间的InDel-186标记对BC2F2群体[(掖478×齐319)×掖478]的379个单株进行检测,用IN-Del-110标记对重组近交系群体(X178×B73)的183个F8家系进行检测.结果表明:(1)InDel-186标记抗病带型(齐319带型)单株的抗病级别平均为1.27±0.25,而感病带型(掖478带型)单株的抗病级别平均为2.57±0.10,两者差异达到显著水平(F=1.62,P<0.02);(2)InDel-110标记抗病带型(X178带型)家系的病株率平均为55.39±7.24,而感病带型(B73带型)家系的病株率平均为81.10±4.89,两者差异达到显著水平(F=0.62,P<0.03);(3)进一步优化PCR反应体系,建立了InDel-186和InDel-110 5μL的二重PCR检测体系.采用In-Del-186和InDel-110标记及优化的检测体系可以有效地选择玉米抗甘蔗花叶病毒基因型,提高选择效率.     

拟南芥β-罗勒烯合成酶基因T-DNA插入突变体的鉴定

β-罗勒烯（β-Ocimene）是一种单萜挥发性有机物,亦是一种重要的植物通讯信号分子。为了进一步研究β-罗勒烯的作用机理,需要获得β-罗勒烯合成酶基因表达沉默的实验材料。根据TAIR网站上公布的β-罗勒烯合成酶信息,从美国拟南芥生物资源中心购买该基因的T-DNA插入突变体材料,运用双引物法对这些突变体进行了T-DNA插入位点的鉴定,获得8株稳定遗传的纯合突变体,该结果为深入研究β-罗勒烯的功能奠定了良好基础。     

线程注入木马原理与防范

随着互联网的迅速普及和应用的不断发展,各式各样的木马程序也层出不穷,其中线程木马攻击以其极强的隐蔽性日益成为常见的木马技术之一,对网络安全造成了极大的威胁.简单介绍了木马发展史和线程注入的原理,对线程注入木马查杀部分进行了分析.     

关于VFP插入记录命令的探讨

以教学管理数据库为例,在叙述SQL插入记录命令的基础上,详细论述了使用插入记录命令过程中经常遇到的各种问题及解决方法。     

基于LMS Virtual.Lab的声屏障结构对其声学特性影响分析

从声屏障的降噪理论基础惠更斯理论入手,引入插入损失的概念,并讨论点声源和线声源的衰减及插入损失的计算方法,根据计算方法引出不同结构的声屏障对于插入损失的大小具有一定的影响。本文运用LMS Virtual.Lab软件的几何建模模块（Geometry）,网格划分模块（Meshing）以及声学模块（Acoustics）分别进行仿真,并由其中的结构求解器得出仿真结果。根据仿真结果分析对比直板型、T型、倾斜型和圆弧型结构的声屏障分别在100~2000Hz状态下的插入损失,以及在噪声能量集中的400Hz频率下的位移幅值。根据分析结果对声屏障设计及选择提出相应的建议,为从事声屏障方面研究人员提供一定的参考。     

特邀花艺师献技

Step 1.工欲善其事,必先利其器。在确定主题后,花艺师选择适合的花器——六个装满净水、近柱长状的玻璃花器。Step2.在瓶口置放自己制作的镂空花球。大家猜一猜,花球是用什么做的?现场观众都说是用塑料网泡纸做的。Step3.透过花球的中空部分,在玻璃花器中插入笔直、修长、修剪整齐的花材——巴西铁。     

尖孢镰刀菌T-DNA插入突变体的筛选及插入基因分析

在建立T-DNA插入突变体库的基础上,为筛选出致病力明显下降的突变体并明确其插入位点信息,对突变体的培养表型和致病性差异进行测试,研究结果为进一步阐明尖孢镰刀菌致病分子机制奠定基础。在前期构建的T-DNA插入突变体库中,采用PCR检测筛选了300株T-DNA插入突变体,观察和测定菌落形态、生长速率、产孢量、遗传稳定性等生物学性状,用海棠胚根接种法比较突变体致病力差异,对筛选到的致病力明显减弱的突变体进行插入位点侧翼序列分析及Southern杂交分析。结果显示,283个供试突变体都已插入目的基因,并伴有绿色荧光。将T-DNA插入突变体连续转接培养5代后,在含潮霉素B的培养基上能稳定遗传,且菌落形态和颜色无明显改变;在对283株突变体进行致病性测定中,87.9%的突变菌株致病力减弱,在致病力减弱的突变体中,HS2-520、HS2-1016和HS2-2109几乎丧失了致病性。选取8株致病力明显减弱的突变体进行Southern杂交分析,结果显示,其中6株突变体为单拷贝插入菌株,1株为双拷贝插入菌株。对这8株突变体进行了TAIL-PCR侧翼序列扩增,经公司测序,与野生菌株HS2基因组序列比对后获...     

如何在CAD图纸中快速插入杆号

笔者在绘制2004年城农网改造图纸时，在每份图纸中需要连续不断插入每根杆(塔)的杆号，如1#、2#、3#……，手工输入需要在多行文字或单行文字窗口中一次一次地输入，或不断地复制多行或单行文字进行修改，用VBA编一个宏就方便多了。以下是操作步骤。     

Word和Excel使用技巧（二）

我们都知道用EX CEL表格工具对于制作表格其功能是非常强的,但我们也会经常遇到在一篇文章中随处插入表格的问题,如果在EXCEL中编辑文档就没有W ORD中那么来得容易,为了满足这个要求,我们就W OR D2000中表格制作功能进行详细介绍。首先,建立规则表格。建立规则表格是建立复杂表