小麦梭条斑花叶病毒(WSSMV)提纯、粒子性质和血清学

 采用冰冻患病小麦叶片,经0.5M磷酸钾缓冲液pH7.0抽提,1/4体积四氯化碳澄清,6%聚乙二醇,3% NaCl和1% Triton X-100沉淀,二次差速离心(含20%蔗糖垫,0.3% Triton X-100).一次10-50%蔗糖密度梯度离心,最后经一次超速离心浓缩,成功地获得部分提纯制剂。经电镜观察,可见大量线状病毒粒子,很少有杂质。病毒粒子在中性条件下稳定,在酸性条件下变形。病毒粒子直径13-14nm.长度250-1800nm,其中在300-400nm,550-700nm之间具有二个主要分布峰。经紫外读数,病毒制剂表现为典型的核蛋白吸收特性.其中OD260/OD244为1.19,OD260/OD280为1.29。病毒粒子外壳蛋白有二个组分,分子量分别约为30kd和27kd。
在免疫电镜实验中,小麦梭条斑花叶病毒(WSSMV)和小麦黄花叶病毒(WYMV)抗血清不仅均能显著而有效地捕获汁液中的WSSMV粒子,而且还可在粒子外面包上一层厚厚的抗血清外套。     

苹果褪绿叶斑病毒PBM1（李假痘）毒株的提纯、抗血清制备及ELISA检测

从木本植物分离的苹果褪绿叶斑病毒（ａｐｐｌｅｃｈｌｏｒｏｔｉｃｌｅａｆｓｐｏｔｖｉｒｕｓ，Ｔｒｉｃｈｏｖｉｒｕｓ组）的ＰＢＭ１毒株能引起李品种“Ｈａｕｓｚｗｅｔｓｈｅ”的假痘病，将其繁殖在昆诺藜（Ｃｈｅｎｏｐｏｄｉｕｍｑｕｉｎｏａ）上。感染ＰＢＭ１毒株的昆诺藜叶组织用两次蔗糖梯度离心提纯。每１００ｇ叶组织的病毒产量平均为１．６８ｍｇ。在电镜下可观察到弯曲状病毒颗粒上的螺纹结构。通过ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳分析，病毒外壳蛋白的分子量为２１．５ｋＤａ。用提纯的病毒免疫家兔制备的抗血清和ＥＬＩＳＡ法，对感染ＰＢＭ１的昆诺藜叶片和桃花进行了灵敏的检测。     

3种不同分离方法对绵羊毛圆科线虫的分离效果

毛圆科线虫(Trichostrongylidae)是反刍动物胃肠道最常见的寄生性线虫.毛圆科线虫病缺乏特殊的临床症状,进行诊断时常需要做线虫学粪便检查.此项试验的目的是根据本地试验条件,对现有的胃肠道线虫分离方法进行比较和改进,筛选出简便、稳定、幼虫活力较好的提纯方法,为线虫病的进一步研究提供依据.     

应用三点同步注射法诊断奶牛结核病的试验研究

牛结核病主要是由牛型结核杆分歧杆菌引起的一种人畜共患传染病,该病不仅严重影响奶牛业的发展,而且还对人身健康造成很大危害,科学诊断奶牛结核病是淘汰病牛,净化牛群的重要措施。目前,用牛型提纯结核     

桑萎缩病病原类菌原体的提纯、致病性及抗血清制备研究

用0．3mol／L甘氨酸缓冲液从病桑嫩叶提取病原类菌原体（MLO）,提取液上清经硅藻土柱层析分离,其洗脱液用高速离心浓缩,制备成部分纯化的病原MLO提纯物。采用显微注射技术,将提纯病原注射到介体昆虫体内,使病原在昆虫体内繁殖,再将获毒虫放饲在健桑苗上传毒接种,获得表现典型萎缩病症状的病株。病柔韧皮部筛管细胞的超薄切片在电镜下观察到大量病原MLO粒子,证实提纯MLO具致病性。同时用提纯病原为免疫抗原制备兔抗血清,抗血清用健桑提取液吸收后,获得仅与病桑抗原产生反应的特异抗血清,免疫电泳测验、仅产生一条沉淀带。     

一种快速提纯兔抗鸡EDS—76病毒IgG的方法

本试验采用辛酸加硫酸铵沉淀二步法提纯兔抗ＥＤＳ－６病毒血清中的ＩｇＧ。在０．０６Ｍ醋酸盐缓冲液（ｐＨ４．８）稀释的血清中,每ｍｌ血清滴入３３μｌ辛酸时,非ＩｇＧ类蛋白可被基本除去,利用本法提纯的ＩｇＧ,免疫活性和生物活性不发生改变,该方法简便,快速,节约试剂,所获ＩｇＧ纯度高,活性好,适用于大批量样品中提纯ＩｇＧ。     

传染性支气管炎病毒的分离提纯及蛋白电泳分析

通过ＳＰＦ鸡胚接种分别对传染性支气管炎病毒的２ 个标准毒株Ｍ４１、ＩＢＶ－ Ｔ 株，４ 株山东分离株及１ 株北京分离株进行扩增繁殖；利用差速离心法、蔗糖不连续密度梯度离心法进行提纯；用ＳＤＳ－ 聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行蛋白分析。结果表明：各毒株都含有四种结构蛋白，且各毒株结构蛋白分子量基本相似，其中仅Ｍ 和Ｓ蛋白略有区别     

蜂胶的提纯技术

天然蜂胶中虽然各种成分很复杂,但绝大部分有效成分均能良好地溶于乙醇和氢氧化钠溶液,只有少数物质溶于非极性溶液,如蜂蜡.石油醚与乙醇混合可提出蜂胶中大部分有效物质,但工艺比较复杂,且因工艺限制只适于大规模生产.丙酮与乙醇的极性接近,但是提取物不如乙醇提取法可直接制成酊剂,浸膏应用于医药、食品、化装品等方面.以下介绍几种比较可行的蜂胶提纯技术.