云南省拯救收容野生动物组成分析

记录2003年到2006年云南省野生动物收容拯救中心拯救和收容野生动物的情况,分析云南省拯救收容野生动物的组成。结果显示秋冬季节是野生动物拯救收容的关键时期。并对云南省野生动物拯救收容工作提出了建议。     

用幼胚拯救法提高矮败小麦孤雌生殖诱导频率

矮败小麦是显性不育基因ＭＳ2 与显性矮秆基因Ｒｈｔ10的紧密连锁体 ,这一特性不仅在遗传理论研究上有其特殊的意义 ,而且在小麦孤雌生殖育种上也具有重要的应用价值。 1991年以来 ,通过化学药剂诱导和延迟授以远缘花粉 ,已成功获得了孤雌生殖二倍体纯系 ,并从中筛选出了一些农艺性状比较优良的株系 ,从而证实了矮败小麦在孤雌生殖育种上应用的可行性。但研究发现 ,不育株经化学药剂诱导后 ,有的子房明显的膨大并形成胚乳 ,但不能发育成胚 ;有的虽然能够发育成胚 ,但胚乳发育不良 ,形成干瘪种子 ,最后不能出苗或出苗后即夭折 ,从而导致孤雌…     

青海两种近濒危地产特色果树主产区资源调查报告

对青海两种近濒危地产果树的濒危现状、资源量及资源分布作了全面的阐述。针对目前的现状,提出了拯救措施。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒XH株感染性克隆的构建

为构建猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)反向遗传操作系统,本实验采用RT-PCR方法将PRRSV-XH株的基因组序列分为6个片段进行扩增,连接至低拷贝载体pOKQ中,获得全长cDNA克隆。将该克隆体外转录,经脂质体转染Marc-145细胞,观察细胞病变。经RT-PCR、间接免疫荧光和western blot等试验验证,表明构建了具有感染性的PRRSV-XH株全长cDNA克隆。本实验为在分子水平上研究PRRSV的复制、致病机理和基因产物的功能等方面提供技术支持,并为构建新型病毒载体和开发安全有效的活病毒疫苗奠定基础。     

猪圆环病毒1型感染性克隆的构建与病毒拯救

用PCR法扩增猪圆环病毒1型（PCV1）全长基因组,将2个基因组顺式连接插入到pUC19质粒载体中构建感染性分子克隆。通过引物设计替换碱基,在病毒基因组内插入SalI酶切位点作为分子靶标,拯救出带有分子标记的克隆病毒,命名为recPCV1／G株。通过免疫过氧化物酶单层细胞试验（IPMA）在病毒感染细胞中检出病毒抗原,其抗原性仅与PCV1／Cap蛋白单价特异性抗体发生反应,而与抗PCV2／Cap蛋白抗体无交叉。克隆毒株基因组内插入一个SalI酶切位点,可用PCR结合限制性片段长度多态性分析法（PCR-RFLP）与亲本病毒相鉴别。该毒株经细胞连续传10代,体外培养增殖性能稳定,病毒滴度达10^4.8 TCID50/mL。构建的PCV1感染性克隆,为今后开展该病毒的起源与演化、遗传变异规律、分子鉴别诊断等研究奠定了基础。     

生物技术在三叶草遗传育种研究中的应用

三叶草是一种重要的豆科牧草,在土壤改良、水土保持以及生态环境保护方面发挥着积极作用。本文主要从基因工程对三叶草进行改良、培育和三叶草遗传资源保存、利用两方面阐述了生物技术在三叶草研究中的应用,并着重介绍了转基因、体细胞杂交、胚拯救技术。     

野生动物保护刻不容缓

古化石告诉我们，远古时代２００万年才有一种鸟类灭绝，６０万年才有一种兽类灭绝；１０年前，４天就有一种脊椎动物灭绝。到了今天，已恶化到每４个小时就有一种脊椎动物灭绝，而且这一趋势还在发展。据科学家统计，地球上有５２０５种野生动物濒临灭绝边缘，其中我国３７０种，我区１４０多种。由于人类的贪婪、无知，北方的东北虎、梅花鹿、豹、紫貂等珍贵野生动物已被大量捕杀，所剩寥寥无几；青藏高原的藏羚羊由几百万头锐减为十多万头；南方的穿山甲和大兴安岭的长尾锦鸡，也成为稀有动物；过量的猎杀、捕捉致使野生动物种群数量日益…     

华南虎的遗传资源调查评估及拯救措施

对华南虎分布，繁殖状况及数量等方面的历史性变化作全面的阐述。针对目前现状，如何更有效地保护华南虎的遗传资源？作者就建立华南虎基因文库，异地保护，建立自然保护区，基因克隆等方面作一介绍。利用这些途径来解决实际存在于华南虎资源保护中的一系列问题。     

利用反向遗传操作技术拯救重组新城疫病毒

将新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)Anhinga株的全长cDNA的克隆质粒以及L、P、NP的表达质粒共转染稳定表达T7 RNA聚合酶的BSRT7/5细胞,得到拯救病毒。通过RT-PCR扩增、酶切鉴定、测序验证拯救病毒中分子标签的存在,并通过血凝试验测定病毒的血凝效价、测定蚀斑形成单位确定病毒滴度,从而证明病毒拯救成功。新城疫病毒Anhinga株的拯救成功为该病毒进行结构基因研究和疫苗研制奠定了基础。     

新城疫病毒3′及5′末端非编码区序列的反向遗传研究

以新城疫病毒(NDV)LaSota株感染性克隆PCI-La为平台进行反向遗传操作,并利用PCR技术将其3′端和5′端非编码区分别替换为鹅源NDV NA-1株3′端和5′端非编码区,以及3′端和5′端非编码区同时替换,通过生物学软件DNAStar对替换后的序列进行比对分析,所替换的序列未出现基因突变现象,证明非编码区替换成功,从而分别获得3株突变全长感染性克隆pCI-rL-NL、pCI-rL-NT、pCI-rL-NL-NT;将所获得的这3株突变感染性克隆分别与辅助质粒pCI-NP、pCI-P、pCI-L共转染BSR细胞,进行重组病毒的拯救。结果显示,pCI-rL-NL、pCI-rL-NT两种质粒表达系统均可拯救到有感染活性的病毒粒子,其HA效价为24,23,HI试验及间接免疫荧光试验结果均为阳性,并且通过电镜观察到具有典型副黏病毒科特征的、有囊膜的NDV颗粒。本试验成功构建了2株NDV LaSota突变株的反向遗传操作系统,为后期进行重组NDV致病性的研究奠定基础,也为进一步研究筛选新型分子标记疫苗、病毒活载体疫苗和抗病毒药物提供了可能。