禽病防制难度增大的原因及防制对策

随着养禽业的发展，每年从国外引进大量的种禽，加上对进口缺乏严格检疫，难免把国外的疫病也带进来。近20年来几乎每隔1～2年就有～种新病出现，如传染性法氏囊病、禽传染性脑脊髓炎、网状内皮组织增殖症、产蛋下降综合征、鸡传染性贫血、禽流感、鸡J亚群白血病毒感染(AIV-J)等，为禽病防治增加了重重困难。     

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2基因的克隆表达及其单克隆抗体的制备方法

研制高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2基因的克隆表达及其特异性单克隆抗体(Mabs)的制备方法.本研究以HP-PRRSV为研究对象,参照已发表的PRRSV基因组序列,设计一对PCR引物,并在其上下游分别添加BamHI和SalI酶切位点,获得的PCR产物用BamHI和SalI酶切后与经同样处理的pET-28a原核表达载体质粒连接,转化DH5a感受态细胞后挑取阳性克隆,经酶切鉴定和测序验证后,转化至E.coli BL21(DE3)中,经IPTG于37℃诱导表达不同时间点后,取细菌菌体用SDS-PAGE分析.结果表明,Nsp2在大肠杆菌中得到表达.经包涵体的提取,用猪抗PRRSV血清抗体进行Western-bolt鉴定,结果表明,融合表达的pET28a-dNsp2蛋白能被PRRSV阳性血清特异性识别.取纯化的pET28a-Nsp2蛋白按每只100μg的剂量与等量弗氏完全佐剂进行乳化,并作为免疫原采取常规皮下多点注射免疫6-8周龄BALB/c小鼠.取其脾细胞与SP2/0的骨髓瘤细胞融合,经间接酶联免疫吸附试验(ELISA)筛选,采用有限稀释法进行克隆.经过3次克隆后获得了一株抗PRRSV-Nsp2蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞,命名为A2F1.Western-blot和间接免疫荧光结果显示这株单克隆抗体株能与Nsp2蛋白和PRRSV JXA1株发生特异性反应,而不与PRRSV CH1A株发生反应,证明获得的McAb为针对PRRSV JXA1株的McAb.抗体亚类鉴定结果表明,重链为IgG1型,轻链为κ链.采用间接ELISA法测得单抗的细胞培养上清抗体效价为1:800,腹水效价分别为1:12800.这株单抗的获得为进一步研究pET28a-Nsp2基因的功能及建立准确快速PRRSV的诊断方法提供了强有力的手段.     

猪繁殖与呼吸综合征研究进展

猪繁殖与呼吸综合征(俗称蓝耳病),该病困扰养猪业多年,并造成了很大的经济损失,本期主题我们结合"国际猪繁殖与呼吸综合征学术研讨会"的有关内容进行组稿,开篇文章将国际猪繁殖与呼吸综合征学术研讨会中的精华报告进行了总结,下面的文章我们分别从专家观点、论文集选登、防控经验等方面进行了讨论。     

冬春季节鸡呼吸道综合征的防治

冬春季节天气寒冷,气温多变,是肉鸡呼吸道疾病多发季节。而在小规模鸡养殖业中,由于饲养管理水平低下,也会造成呼吸道疾病的大面积暴发。当鸡的呼吸道疾病发展到了难以控制程度时,     

重组GP5AB蛋白间接ELISA检测PRRSV抗体方法的研究

利用GST-GP5AB重组蛋白作为包被抗原,通过反应条件优化,建立了用于检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的间接ELISA方法。抗原最适包被浓度为2μg/mL,最佳封闭液为0.15%BSA,37℃封闭2 h后,再4℃封闭24 h,血清最适稀释度为1∶200,其作用时间为60m in,酶标抗体最适稀释度为1∶20 000,最适作用时间为90 m in,37℃显色10 m in,S/P≥0.284为阳性,S/P≤0.26为阴性,介于二者之间为可疑的判定标准。该抗原与猪其他4种临床症状类似的疾病的阳性血清反应呈阴性。批内和批间重复性试验结果,变异系数均小于7%,表明本方法具有较好的特异性和重复性。应用本方法初步检测了一些疫苗免疫仔猪血清样品,并与重组N蛋白和PRRSV抗原同时进行比较,结果显示3种抗原检测的结果基本一致。     

产蛋下降综合征病毒PCR检测方法的建立

根据已报道的腺病毒DNA序列，设计合成了1对核苷酸引物，引物间隔约630bp。用该引物对EDS76病毒内蒙古分离株(N3，N4)和参考株(AV-127)核酸进行聚合酶链式反应(PCR)。结果，均扩增出了约630bp的特异性DNA片段。所建立的PCR方法可检出100pg的样品模板。结果表明，此PCR方法是检测EDS76病毒的一种简便快速、特异性强和灵敏度高的方法。     

牛出血性败血病的诊治

牛出血性败血症(又称牛巴氏杆菌病),简称牛出败,是由多杀性巴氏杆菌引起的一种急性热性传染病。本病发病急、传染快,以高热、肺炎、急性胃肠炎和内脏器官广泛出血为特征。牛出败是牛最常见的传染病之一,该病对养牛业的影响比较大,OIE将其列为B类疫病。     

高致病性猪蓝耳病防治技术规范

高致病性猪蓝耳病是由猪繁殖与呼吸综合征(俗称蓝耳病)病毒变异株引起的一种急性高致死性疫病。仔猪发病率可达100%、死亡率可达50%以上,母猪流产     

一起葡萄球菌引起仔猪渗出性皮炎的诊治

仔猪渗出性皮炎,又称"仔猪油性皮脂溢"或"猪油皮病",是由葡萄球菌引起的以渗出性坏死性皮炎为特征的一种急性接触性     

羊魏氏梭菌病的诊断与防治

羊梭菌病是由腐败梭菌引起绵羊的一种急性传染病.该疫病对膘情较好的羊易发生,具有发病突然,病程急促特点,死亡率极高,对养羊业危害极大.