保护性赖氨酸对荷斯坦牛挥发性脂肪酸及菌体蛋白的影响

本试验选用3头装有永久性瘤胃瘘管和十二指肠瘘管的荷斯坦牛,分4个阶段,分别饲喂日粮Ⅰ(基础日粮+保护性赖氨酸Ⅰ30g/d)、日粮Ⅱ(基础日粮+保护性赖氨酸Ⅱ30g/d)、日粮Ⅲ(基础日粮+保护性赖氨酸Ⅲ30g/d)和日粮Ⅳ(基础日粮),研究以不同比例棕榈油脂肪粉包被的赖氨酸对瘤胃液挥发性脂肪酸和菌体蛋白的影响。结果表明,添加瘤胃保护性赖氨酸对瘤胃液挥发性脂肪酸和菌体蛋白均无明显影响(P>0.05)。瘤胃保护性氨基酸没有改变瘤胃内环境,不影响瘤胃微生物的生长和菌体蛋白的合成。     

布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统效应蛋白VceC对山羊滋养层细胞内质网应激和性腺激素分泌的影响

旨在研究布鲁氏菌IV型分泌系统效应分子VceC对山羊滋养层细胞(GTC)内质网应激及性腺激素分泌的影响,为揭示其在布鲁氏菌感染宿主细胞中的作用,阐明布鲁氏菌胞内生存和引起动物流产的机制提供重要依据。本研究通过构建VceC的真核表达载体pEGFP-C1-VceC并转染GTC,Western blot检测内质网应激标志性分子GRP78和CHOP蛋白表达量变化,qRT-PCR和Western blot进一步检测未折叠蛋白反应(UPR)信号通路相关分子;ELISA检测细胞培养上清液的孕酮和雌激素的浓度变化。结果表明,成功构建了VceC真核表达载体pEGFP-C1-VceC,转染GTC后,12和24 h GRP78蛋白表达均显著升高(P<0.01),24 h后CHOP蛋白表达显著降低(P<0.05);qRT-PCR检测IRE1和XBP-1的mRNA表达量在24 h均显著升高(P<0.05),而PERK、ATF6和ATF4 mRNA的表达未发生显著变化(P>0.05),Western blot检测IRE1蛋白的表达在转染12 h后显著升高(P<0.01);VceC转染...     

PRRSV重组N蛋白的抗原性分析及其特异性抗体制备

利用大肠杆菌表达技术和亲和层析法纯化出重组PRRSV N蛋白 ,用间接ELISA法和Western blot分析 ,证明其具有较好的抗原性。将该纯化蛋白采用大剂量长程免疫法免疫家兔 ,制备了兔抗重组N蛋白抗体 ,用Western blot分析和竞争抑制试验证明其具有很高的特异性 ,ELISA效价达 1∶32 0 0以上。     

茶树病程相关蛋白基因CsPR5的克隆及表达分析

为探究茶树中病程相关蛋白5(pathogenesis-related protein 5,PR5)在茶树中的功能,采用cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA end,RACE)技术克隆了PR5基因的全长;通过荧光定量PCR方法检测了CsPR5在龙井43茶树不同组织部位、植物激素(茉莉酸、乙烯利和水杨酸)处理、茶炭疽病菌Colletotrichum camelliae侵染和小贯小绿叶蝉Empoasca onukii为害后的表达特征。结果表明,CsPR5基因开放阅读框为843 bp,编码281个氨基酸。CsPR5基因在茶树根、茎、嫩叶、花和种子5个组织中的相对表达量分别为0.187、3.093、0.928、0.045和0.012,且五者之间差异显著,主要在茎和叶中表达,其分别为根中相对表达量的16.54倍与4.96倍。水杨酸处理6 h及乙烯利处理6、12 h后,茶树CsPR5基因的相对表达量分别为1.622、2.344和1.845,分别比对照显著上调2.20倍、3.18倍和2.35倍;但是外施茉莉酸对茶树CsPR5基因的相对表达量无影响。茶炭疽病菌侵染显著诱导了茶树CsPR5基因的相对表达量,处理后的相对表达量为1.977,是对照的1.90倍;小贯小绿叶蝉取食显著抑制了其为害部位CsPR5的相对表达量,为7.273,仅为对照的38.80%,但该诱导不具系统性。     

乙烯利对干旱胁迫下草地早熟禾生理指标的影响

以草地早熟禾(Poa pratensis)‘Nuglade'品种为试验材料,研究叶片喷施乙烯利对草地早熟禾在水分充足、干旱及复水恢复3种处理下叶片电解质渗透率、叶绿素、可溶性蛋白、丙二醛(MDA)等生理指标的影响。结果表明,乙烯利与对照组(CK)相比,乙烯利在干旱胁迫下保持更高的叶片相对含水量23.5%(对照为11.5%)和更低的电解质渗透率68.1%(对照为90.7%)及MDA含量53.90μmol·g~(-1)(对照检查131.62μmol·g~(-1)),且复水后的电解质渗透率恢复程度更好;此外乙烯利处理提高了复水恢复过程草地早熟禾的可溶性蛋白含量;说明,叶片喷施乙烯利能够缓解草地早熟禾的干旱胁迫损伤,并促进干旱后的复水恢复。     

同日龄不同体重羔羊十二指肠形态功能的比较研究

为了解小肠消化吸收功能对羔羊生长发育的影响,本试验选择60只相同饲养条件、相同断奶日龄(3月龄断奶)的5月龄健康阿勒泰×特克赛尔杂交F1代羔羊为研究对象,从中选择体重大小具有显著性差异的8只羔羊分为大体重组(HBW组)4只,平均体重(37.20±2.80)kg;小体重组(LBW组)4只,平均体重(28.24±3.75)kg。测定两组羔羊十二指肠绒毛组织形态学指标、消化酶活性及其黏膜中钠依赖性葡萄糖转载蛋白1(SGLT1)和葡萄糖转载蛋白2(GLUT2)表达量的差异。结果显示,HBW组羔羊十二指肠绒毛高度、隐窝深度均显著低于LBW组(P< 0.05),而黏膜厚度、绒毛高度/隐窝深度比值差异均不显著(P> 0.05);HBW组羔羊淀粉酶活性显著高于LBW组羔羊(P< 0.05),麦芽糖酶、乳糖酶、蔗糖酶活性均极显著高于LBW组羔羊(P< 0.01),脂肪酶及蛋白酶活性在两组羔羊间均无显著差异(P> 0.05);HBW组羔羊SGLT1表达量显著高于LBW组(P< 0.05),GLUT2表达量极显著高于LBW组(P< 0.01)。综上所述,反刍动物体重增加与十二指肠消化吸收功能密切相关,这些消化酶及葡萄糖运载蛋白的分子生物学上调机制尚需进一步研究。     

感染性朊蛋白的毒性与糖磷脂酰肌醇（GPI）的相关性

海绵状脑病(朊病)是一类神经退行性脑病,目前是世界上研究的热点问题之一。引起该病的病原是一种朊蛋白质,它与宿主自身的正常朊蛋白的一级结构相同,只是二级结构的构象有所不同。对海绵状脑病的致病机理至今仍不太清楚,作者针对目前研究的朊蛋白的致病性与GPI的关系作一综述。     

喷雾干燥法浓缩乳清蛋白的工艺参数研究

干酪副产物乳清进行超滤浓缩,将浓缩液喷雾干燥制备成浓缩乳清蛋白,通过对喷雾干燥的进口温度、料液温度、入料流量3个因素进行单因素和正交试验分析,确定了对浓缩液喷雾干燥的最佳工艺参数为：进口温度为140℃,料液温度为30℃,入料流量7%,制得的浓缩乳清蛋白与市售产品进行加热,利用激光粒径分析仪测定产品的粒径分布对比热稳定性,试验制得的浓缩乳清蛋白溶解性、分散性俱佳。     

2种酶水解制备丝素肽的形貌结构与止血性能

分别采用碱性蛋白酶Alcalase、复合风味酶Flavourzyme水解丝素蛋白,再通过冷冻干燥制备出2种粉末状丝素肽止血材料。采用场发射扫描电子显微镜(FESEM)、傅里叶变换红外光谱仪(FTIR)、Zeta电位测试仪等对2种丝素肽止血材料的形貌结构进行测试和表征,通过体外凝血试验和建立大鼠肝脏止血模型对其止血性能进行测评。FTIR测试2种丝素肽的二级结构均为SilkⅠ构象;FESEM观察显示Alcalase酶解丝素肽的表面呈多孔状结构,Flavourzyme酶解丝素肽表面较平整;Zeta电位测试显示Alcalase酶解丝素肽的电势为-12.07 m V,Flavourzyme酶解丝素肽的电势为-3.11 m V。体外凝血试验表明Alcalase酶解丝素肽能明显提高血液的粘度和血小板粘附率,缩短体外凝血时间,这3项指标均优于Flavourzyme酶解丝素肽。利用大鼠肝脏止血模型测试2组丝素肽的止血性能都明显优于常规止血材料云南白药和明胶海绵,其中大鼠肝脏经Alcalase酶解丝素肽处理后的止血时间为89.23 s±3.56 s,出血量为0.41 g±0.03 g;大鼠肝脏经Flavourzyme酶解丝素肽处理后的止血时间为198.62 s±5.92 s,出血量为0.55 g±0.08 g。以上结果提示Alcalase酶解丝素肽有望开发成新型快速的止血材料。     

鹅细小病毒非结构蛋白和结构蛋白的二级结构及B细胞抗原表位预测

利用DNAStar软件包中的Editseq将GPV H1株非结构蛋白和结构蛋白核苷酸序列翻译成氨基酸序列,然后利用Protean软件进行氨基酸序列分析,分别预测结构蛋白和非结构蛋白的二级结构及B细胞抗原表位。结果表明,GPVH1株非结构蛋白和结构蛋白具有丰富的二级结构和多处抗原指数较高的区段,其中非结构蛋白的NS2和结构蛋白的VP3含有较多的潜在的B细胞优势抗原表位。