孕牛血清中早孕因子的分离纯化

采用DEAE－Sepharose(DEAE-琼脂糖凝胶）、CM－Sepharose(CM-琼脂糖凝胶）等离子交换层析、抗孕牛全血清IgG-Sepharose 4B亲和层析等技术，分离纯化妊娠4－5个月健康孕牛全血清中的早孕因子（EPF），用玫瑰花环抑制实验对各阶段产物EPF活性进行检测。结果表明，经层析过柱后的CM－ⅡA提取物有EPF活性。经SDS－PAGE银染显色证实它含有分子量为21、67、80KD的蛋白，实验结果支持21KD的多肽为主要EPF活性物成分。同时实验表明了亲和层析对进一步纯化EPF是可行的。     

水貂阿留申病毒环介导等温扩增（LAMP）检测方法的建立

为建立一种简便、快速、特异的水貂阿留申病毒（ADV）检测方法,根据GenBank中已登录的ADV基因组序列,选择水貂阿留申病毒VP2基因作为靶基因,设计并合成5套环介导等温扩增（LAMP）反应所需的引物,通过试验筛选出最佳引物,并进行最佳引物的特异性及敏感性试验,建立了LAMP快速检测方法。试验结果表明,该方法比普通PCR方法灵敏性高10倍,与其他的水貂源病毒不发生非特异性反应,并且具有良好的重复性。利用建立的LAMP检测方法对30份临床样品的阳性检出率为6.7%。该方法简便快速,为水貂阿留申病的检测提供了新的发展方向,有望成为简易的常规检测手段,尤其适用于基层应用。     

生鲜牛乳中产肠毒素大肠埃希菌环介导等温扩增技术的建立与应用

为了快速检测生鲜牛乳中的产肠毒素大肠埃希菌(enterotoxigenic E.coli,ETEC),防止食源性产肠毒素大肠埃希菌给人类造成的危害,建立快速检测不耐热型产肠毒素大肠埃希菌的环介导等温扩增方法(LAMP)。敏感性和特异性试验结果表明,该方法敏感性高,特异性强,能够从生鲜牛乳中检测到1pg产肠毒素大肠埃希菌DNA,与其他型大肠埃希菌及细菌不发生交叉反应。利用建立的LAMP技术对来自西宁市奶牛场及自由市场的21份生鲜牛乳样品进行检测,6份样品呈阳性,阳性检出率为28.6%,从分子水平为生鲜牛乳中产肠毒素大肠埃希菌的检测提供了一种快速、准确的手段,对保障生鲜牛乳的食品安全有重要意义。     

禽呼肠孤病毒RT—LAMP快速检测方法的建立

根据GenBank中登录的禽呼肠孤病毒（Aviem reovirus,ARV）S1基因序列设计了特异对应靶序列中的6个基因区段的4条引物,以此建立了一种快速、准确的ARV逆转录环介导等温扩增（RT—LAMP）检测方法,并对此方法的反应条件进行了优化。结果表明,该方法能够特异地扩增ARV,而对其他常见的禽类病毒均无扩增作用,特异性强、重复性好;检测ARV的灵敏度为4ELD50,是RT-PCR方法的10倍;在反应产物中添加SYBR GREEN Ⅰ染料后,可通过肉眼观察有无荧光直接判定结果。     

环青海湖地区禽流感防控工作难点与对策

青海湖是我国最大的内陆咸水湖,又是中亚一印度候鸟迁徙路线上的重要中转站,目前记录到的鸟类有189种.2005年5月青海湖流域发生H5N1型禽流感疫情,造成大量在青海湖繁殖栖息的候鸟死亡.刚察县是环湖重点县,禽流感防控工作面临着严峻的考验,探索出一条符合实际、有效的防控措施势在必行. 1 防控工作难点 多种传染源和传播途经加大禽流感防控困难.禽流感的传染来源较多,可以来自感染或发病的家禽,也可来自野生鸟类、迁徙的水禽等.病毒通过禽类的分泌物、排泄物和尸体及其他物体直接或间接接触发生感染.     

基于荧光显色的环介导等温扩增技术(LAMP)检测禽呼肠孤病毒

建立了一种基于荧光显色的禽呼肠孤病毒(ARV)环介导等温扩增(LAMP)检测方法.该检测方法使用针对ARV的p10基因8个区域的6条LAMP引物,能够在等温(63℃)条件下1h内完成反应,具有良好的敏感性和特异性,最低能够检出102个拷贝的病毒,敏感性比普通PCR高100倍,而对其他病毒检测结果为阴性.在荧光显色中分别应用SYBR Green Ⅰ和钙黄绿素作为显色剂,其结果与琼脂糖凝胶电泳一致.在对80份临床样本的检测中,使用LAMP和PCR检测出阳性样本的数量分别为68份和55份.因此,基于荧光显色的LAMP方法可以应用于ARV的快速检测,具有在科研机构、基层实验室特别是检测现场推广和应用的潜力.     

介绍一种新型有效的挤奶机液环真空泵

近几年奶业的发展推动了挤奶机的应用。从而保证了鲜奶的卫生标准，减轻了劳动强度，提高了劳动效率，挤奶机已经成为实现规模化奶牛场的首选设备之一。合理选择挤奶机类型、规格、配置和饲养奶牛所处的环境条件有着密切的关系。它不但要符合现在使用条件，也要适合于今后奶牛场的发展。目前使用的挤奶机设备的主要部件之一是变容量旋片式真空泵。现介绍一种新型的液环真空泵，通过两种泵的性能对比以便了解液环真空泵的特性。旋片式真空泵（油润滑）是最早使用在挤奶机上的真空泵，它是通过与泵体偏心安装的转子上的旋片在离心力作用下紧贴…     

兽医临床三种β-内酰胺酶的检测方法比较

β-内酰胺环类抗生素如阿莫西林、氨苄西林、头孢菌素等具有高效、广谱、低毒的优点,在兽医临床上广泛应用.但近年来耐药菌株逐年增多,且有交叉耐药和多重耐药现象,而使其应用受到限制.在细菌产生耐药性的机制中,β-内酰胺酶的产生是最主要的.因此,寻找一种快速检测β-内酰胺酶、且结果可靠的方法是当务之急.近年来,笔者对本实验室保存的猪、鸡常见致病菌,用三种不同的检测方法进行了β-内酰胺酶的检测,现将各种方法介绍如下.     

环碳混合气体对畜产品消毒效果的研究

用环氧乙烷和二氧化碳混合杀菌气体（以下简称环碳混合气）对畜产品进行薰蒸消毒试验，经40次熏蒸消毒试验证明，消毒合格率为98.25％，达到予期目标、并克服了纯环氧乙烷毒性大、易燃、易爆等缺点，是一种高效、低毒、安全可靠完全可以替代纯环氧乙烷的畜产品消毒剂。     

气管环中和试验对2株IBV定型研究

本试验将二个 Ｉ Ｂ Ｖ 地方分离株宜毒和１１８ 毒连同 Ｉ Ｂ Ｖ 呼吸型代表株 Ｍ４１和肾型代表株 Ｔ 株制备免疫血清后在气管环上作交叉中和试验,结果显示宜株与 Ｔ 株（ Ｒ＝ ０．１８）, Ｍ 株（ Ｒ＝ ０１３５）抗原性上相差甚远,可能是一株不同于 Ｔ 和 Ｍ株的独立血清型或变异株,而１１８ 株与 Ｔ株相差较远,与 Ｍ 株（ Ｒ＝ ０．７１）比较接近,可能是马萨诸塞血清型中的一个亚型或变异型,这结果对疫苗的研制有一定指导意义。