雌性北极狐雌激素、孕激素水平测定

雌性动物在发情周期中,会阴部外观、阴道上皮细胞角化程度和各种激素含量都有变化,本文针对发情期北极狐阴道上皮细胞进行检查、并开展体内雌激素、孕激素水平的测定,为鉴定雌性北极狐卵巢排卵及北极狐人工授精提供了基本参考,具有较好的应用价值。     

犬阴道肿瘤雌孕激素受体的表达

将吉林大学小动物医院2006年6月至2008年2月收治的35例犬阴道肿瘤,根据临床特征及病理学变化分为传染性性病肿瘤、阴道增生和腺泡状软组织肉瘤3种,采用免疫组化SP法检测雌二醇受体α(ER-α)和孕酮受体(PR)在肿瘤中的表达。结果表明,犬传染性性病肿瘤(Canine transmissible venereal tumor,CTVT)组织雌孕激素受体表达缺失。阴道增生雌孕激素受体的表达,发情前期上皮细胞、平滑肌细胞及内皮细胞与正常阴道组织相比阳性表达率相似,并未随发情前期血浆雌二醇水平的升高而增加。而腺泡状软组织肉瘤(Vagin alalveolar soft part sarcoma,VASPS)雌二醇受体表达为阳性,表明犬阴道腺泡状软组织肉瘤的生成、发展可能与生殖激素有关,具有激素依赖性。     

中药滋肾养膜方对宫腔粘连内膜修复的临床研究

目的 通过观察中药滋肾养膜方联合宫腔镜技术对宫腔粘连患者内膜修复的影响,探讨中药治疗宫腔粘连的临床疗效。方法 收集观察就诊于“尤昭玲教授妇科工作室”和长沙市第一医院妇科的100例宫腔粘连患者的临床病历资料,随机分为两组,对照组50例宫腔镜技术加西药（雌孕激素序贯疗法）,试验组50例在对照组基础上配合中药滋肾养膜方,连续3个疗程。观测两组患者治疗疗效,月经量的恢复、中医证候的改善情况和对子宫内膜的影响。结果（1）试验组和对照组在年龄、病程长短、宫腔操作次数、流产次数和治疗前症候的比较,差异无统计学意义,具有齐同可比性;（2）试验组患者经治疗综合疗效总有效率88%要高于对照治疗组（84%）,但两组差异经Radit分析,差异无统计学意义;（3）两组经治疗临床症状明显改善,差异具有统计学意义（P<0.05）;（4）两组中医证候治疗后主要症状变化比较,试验组在改善经前乳胀、神疲乏力、失眠健忘、面色萎黄或晦暗方面,明显优于对照组且有统计学意义（P<0.05）,在其余症状、体征等方面,两组无统计学意义（P>0.05）;（5）对两组患者治疗后月经情况：月经周期、经期、经量、月经色质均明显改善;（6）两组治疗前后子宫内膜厚度比较,治疗后两组子宫内膜厚度均较治疗前增厚,有统计学意义（P<0.05）,试验组与对照组组间比较,试验组增厚程度大于对照组,但差异无统计学意义（P>0.05）。结论 中药滋肾养膜方联合宫腔镜技术和西药治疗对宫腔粘连患者内膜修复效果好,临床疗效确切,可明显增加患者的月经量并且改善患者中医临床症状,值得推广。     

大鼠不同时期乳腺组织及血清中孕激素变化规律

探讨大鼠不同时期乳腺组织及血液中孕激素（P）变化规律。选择雌性SD大鼠42只,分为7个时期,每个时期6只：分别为处女期,妊娠第6天、12天、18天,泌乳第6天、12天、18天。分别处死大鼠取乳腺组织及血清,通过放射免疫检测不同时期孕激素含量。结果表明血清中：处女期P含量最低,妊娠后呈现上升趋势,其中妊娠18d与各个时期差异显著（P〈0．05）;泌乳后又呈现下降趋势。7个时期中处女期与其它6个时期差异显著（P〈0．05）;乳腺组织：7个时期整体呈下降趋势,并且处女期与妊娠、泌乳整个时期差异显著（P〈0．05）。结果显示：孕激素在乳腺细胞发育、启动和维持泌乳方面发挥重要作用。     

膜孕激素受体(mPRα)在半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)卵母细胞成熟过程中的表达特征

通过实时荧光定量PCR方法(qRT-PCR)检测半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)雌性性成熟不同时期、不同时相卵母细胞中膜孕激素受体(mPRα)的表达,通过qRT-PCR和Western blotting方法检测促性腺激素(HCG)对成熟期半滑舌鳎卵母细胞mPRα表达的影响,同时,采用原位杂交、免疫组化和Western blotting方法研究雌性性成熟半滑舌鳎mPRα mRNA和蛋白在各组织中的表达.对半滑舌鳎性成熟不同时期、不同时相卵母细胞中mPRα mRNA的定量研究结果显示,在成熟时期半滑舌鳎Ⅴ时相卵母细胞的mPRα mRNA表达量最高.HCG对成熟期半滑舌鳎卵母细胞mPRα表达的影响研究结果显示,20 IU/ml HCG比10 IU/ml HCG对成熟时期半滑舌鳎卵母细胞mPRα mRNA和蛋白表达的促进作用更明显,进一步证明mPRα介导孕激素参与了卵母细胞成熟的调控.对mPRα组织表达的定量和定位研究中,Western blotting结果显示,在半滑舌鳎的卵巢、垂体、脑、头肾、肾、肝脏组织中均有mPRα蛋白表达,且在脑、垂体和卵巢中表达量较高,表明mPRα在不同组织中都发挥着一定的作用,且在内分泌相关组织如脑、垂体和卵巢中的作用更明显.原位杂交和免疫组化结果显示,mPRα mRNA和蛋白表达明显定位在卵母细胞膜上,且在其他组织的外周和管腔结构表达.本研究为进一步研究mPRα在膜上的信号转导机制提供了理论基础和形态学依据.     

性成熟雌性牙鲆(Paralichthys olivaceus)新型膜孕激素受体(mPRL)的定性定量表达分析

在牙鲆(Paralichthys olivaceus)繁殖周期,新型膜孕激素受体基因(mPR-Like,mPRL)在脑-垂体-性腺轴的表达变化规律与性腺发育成熟密切相关.为进一步研究牙鲆mPRL作用机制,本研究对其mRNA和蛋白的表达特征进行了分析.应用实时定量PCR方法分析mPRL mRNA在卵子形成过程中的时序表达,发现牙鲆mPRL mRNA相对表达量的最高值出现在性成熟阶段卵巢的Ⅴ时相卵母细胞.原位杂交分析mPRL mRNA在繁殖相关组织中的细胞学定位,发现mPRL mRNA主要分布在牙鲆性成熟阶段卵巢的卵母细胞膜上;在脑组织的神经元附近区域mPRL mRNA阳性信号也较强.制备牙鲆mPRL的多克隆抗体,采用Western blotting方法检测牙鲆mPRL蛋白在不同组织的表达特性,发现mPRL蛋白表达量在卵巢和脑组织中相对较高,在肝脏、头肾、肾脏中表达量相对较少.免疫组化结果显示,牙鲆mPRL蛋白在卵巢和脑组织的细胞学定位与mPRL mRNA定位一致.牙鲆mPRL在繁殖相关组织的表达特征说明其参与卵母细胞成熟的过程,并通过内分泌方式参与牙鲆的繁殖调控.     

半滑舌鳎新型膜孕激素受体基因分子特征及其在卵巢发育过程的作用

为进一步提高半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Günther)人工育苗技术水平,对半滑舌鳎新型膜孕激素受体(m PR-like)基因进行研究。采用同源克隆和末端快速扩增(RACE)方法,获得全长为2 002 bp的半滑舌鳎新型膜孕激素受体的c DNA序列;二级结构分析表明,该蛋白存在7个跨膜区域;三级结构分析表明该蛋白有多个结合位点。使用MEGA4.0临位相联法和Clustal X方法对m PR-like的氨基酸序列进行聚类分析和序列相似度分析,发现半滑舌鳎m PR-like与青鳉(Oryzias latipes)和三刺鱼(Gasterosteus aculeayus)的m PR-like聚为一支,相似度分别为68%和72%。应用实时定量PCR方法分析了m PR-like m RNA表达情况,发现m PR-like m RNA在性成熟雌性半滑舌鳎不同组织表达具有广泛性,但表达量存在差异,在脑、卵巢、心脏、鳃、脾和胃等组织表达丰富;在不同发育阶段卵母细胞中,m PR-like m RNA表达水平从II时相卵母细胞到V时相卵母细胞持续升高,而在VI时相卵母细胞的表达水平显著下降(P0.05);在半滑舌鳎繁殖周期的脑和卵巢组织中,m PR-like m RNA的表达水平从性腺发育II期到V期持续升高,并且在V期达到最高峰(P0.05),VI期表达量开始下降;在半滑舌鳎繁殖周期的垂体组织中,不同繁殖期m PR-like m RNA表达水平变化幅度不大,但在性腺发育V期时垂体中的表达量显著高于其他繁殖期(P0.05)。放射免疫测定的结果表明,半滑舌鳎雌鱼血清中孕酮激素的含量变化在整个繁殖周期中差异显著(P0.05),在性腺发育IV期含量迅速升高并在V期达到峰值。该基因在半滑舌鳎多种组织中的表达特征,预示其具有多种生理学作用;在卵母细胞和繁殖周期脑–垂体–卵巢的表达特征表明其参与卵母细胞成熟过程和生殖调控。     

母羊发情抑制的恢复试验

本试验对因外源雌、孕激素引起的发情抑制进行对应的恢复处理，结果表明，对发情抑制的母羊处理有效弥补和完善了发情控制处理技术。     

肉羊繁殖中生物技术的应用

1药物诱发同期发情 孕激素阴道栓塞法是将孕激素阴道栓放置于母羊子宫颈外口处，绵羊放置12～14天，山羊放置16～18天后，取出阴道栓，2～3天后处理母羊发情率可达90％以上。阴道栓可以使用厂家的现成产品，也可以自制。自制阴道栓的方法是取1块海绵，截成直径和厚度均为2～3厘米的小块，     

奶山羊同期发情效果观察

在繁殖季节到来之前,利用羊用孕激素阴道栓（含氟孕酮45mg）,对文登奶山羊进行同期发情处理,10~13d取栓并注射孕马血清促性素（PMSG）100IU、200IU、250IU、300IU。参试的110只母羊,同期发情的106只,同期发情率96.4%;输精母羊100只,不返情75只,不返情率75%;产羔母羊71只,受胎率71%;共产羔羊133只,产羔率187%。