祁连县农区奶牛、黄牛品种结构优化配套技术项目工作报告

纪八十年代,主要推广人工授精技术,经多年努力祁连县农区黄牛改良工作始于上世纪,实现了黄牛整体人工授精化,黄牛杂种化程度已达90%以上,形成了以荷斯坦杂种奶牛(占35%)和西门塔尔肉乳兼用杂种牛(占55%)为主体的畜群结构,改良牛存栏在5 500头以上,但是受多种因素影响,纯种牛和高产牛存栏始终在10—20%之间徘徊,制约了本地养牛效益的进一步提高,如何将现代育种技术尽快转化为生产力,加快黄牛良种化进程已成当务之急。     

家禽瘦素(Leptin)信息传导及其生理功能

瘦素（Leptin）的发现使人们了解了许多脊椎动物对能量消耗和采食量所进行的调控。瘦素也参与动物不同的生理功能。在家禽中,瘦素cDNA最初是从鸡中克隆得到的,以评定其生理作用。然而,这种cDNA既未得到许多研究人员的证实,与鸡瘦素相符合的基因组DNA也未被发现。这场争论是家禽内分泌学中必须要得到解释的最重要问题之一。2000年,家禽瘦素受体cDNA首次在鸡中得到确定;同时研究显示,该受体能够调解瘦素信号,以展示其生理功能。本文将概述家禽瘦素研究的最新发现,包括其生理作用和信号传导。     

促卵泡生成素受体基因的SNP对牛双胎性状的标记研究

以秦川牛和荷斯坦奶牛的双胎母牛和单胎母牛为实验材料，以牛的FSHR基因的第10个外显子作为标记牛双胎性状的候选基因，用SNP法进行了多态检测。结果发现，在秦川牛的双胎母牛中突变率为60％（6／10），而在单胎母牛中突变率为20％（2／10）；在荷斯坦奶牛中，双胎母牛突变率为31.25％（5／16），单胎母牛突变率为6.67％（1／15）；由此可见双胎牛和单胎牛二者之间FSHR基因的第10个外显子的突变率差异明显。这表明选择FSHR基因的10个外显子有可能作为双胎性状的候选基因。经序列分析发现在FSHR基因的第1506个碱基发生了突变（T→C），但氨基酸没有发生变化。     

牛胚胎移植受体的选择方法

牛的胚胎移植就是把供体牛的胚胎移植到适宜的受体牛子宫内 ,使之附植、妊娠并分娩出优秀犊牛的技术。而母牛的发情、排卵、受精、黄体的形成、胚胎的发育、运行、附植、妊娠以及分娩是一个复杂的、有序的生理系统。所以 ,把供体牛的胚胎移植到具有相同生理环境的受体牛子宫内尤为重要。其中 ,移植所用的胚胎绝大多数是发育到第 7ｄ的桑椹胚或囊胚 ,因此被移植到子宫内的胚胎并不立即附植 ,而要游离存在 13～ 2 3ｄ ,与子宫发生紧密联系要在受精后 6 0ｄ(45～ 75ｄ) [1] 。另外 ,胚胎死亡也大多发生的妊娠最初的 18ｄ[2 ] 。故保证胚胎在子…     

超高效液相色谱-串联质谱法检测动物肌肉组织中19种β-受体激动剂残留

建立了猪、牛和羊肌肉组织中吡布特罗、西马特罗、特步他林、齐帕特罗、沙丁胺醇、西布特罗、克伦塞罗、克伦丙罗、羟甲基克伦特罗、氯丙那林、莱克多巴胺、克伦特罗、妥布特罗、福莫特罗、溴布特罗、克伦潘特、班布特罗、马布特罗和马喷特罗等19种β-受体激动剂残留检测的超高效液相色谱-串联质谱方法.猪、牛和羊肌肉组织样品用乙腈和异丙醇（8：2,V/V）提取,加入NaC1、Na2SO4和MgSO4盐析去杂质.待测药物经BEH C18色谱柱分离,以0.1％甲酸乙腈溶液和0.1％甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱.同位素内标法和基质匹配标准溶液外标法定量.19种β-受体激动剂在系列浓度范围内呈现良好线性关系,相关系数r2均大于0.99;19种药物在肌肉组织中的检测限为0.25 μg/kg,定量限为0.5μg/kg.从0.5、1和5μg/kg三个添加浓度检测结果可以看出,19种药物的回收率为73.7％ ～ 114.1％,批内批间相对标准偏差均小于20％.结果表明,该方法简便快捷、灵敏度高、定性准确,适用于该类药物残留的检测.     

影响奶牛冷冻胚胎移植受胎率的几种因素

胚胎移植是牛育种工作的一个重要手段。近年来我国畜牧工作者在牛的胚胎移植上取得了可喜的成果。但从目前看,胚胎移植大量地应用于养牛生产,在技术上还不成熟。因为胚胎移植是一项十分复杂的技术,易受到多种因素的影响,影响受胎率的主要因素有以下几方面。1胚胎的质量胚胎移植     

绵羊瘦素受体基因部分序列测定及其变异位点分析

试验旨在检测绵羊瘦素受体(leptin receptor,LEPR)基因序列突变位点,为进一步分析LEPR基因多态性与绵羊生长性状的关系奠定基础。选用美利奴羊与阿华西羊杂交群体作为试验材料,利用RT-PCR、测序等方法测定了4只绵羊的LEPR基因cDNA部分序列及内含子7序列,同时利用PCR-RFLP分析两个位点在群体(229只)中的多态性。测定出LEPR基因cDNA序列长2608 bp(包含外显子2-16完整序列及外显子1和17的部分序列)和LEPR第7内含子序列全长160 bp,共发现5个核苷酸变异位点,第2外显子中2个(T240C和A279G),第10、14外显子中各1个(A1683G,T2373C),内含子7中1个(1285+A73G),外显子中的4个变异位点均未引起编码氨基酸的改变。在研究群体中,A279G与A1683G中A的频率分别为0.415、0.467,后者处于非平衡状态,GG和AA是主要的单倍型。不同物种间序列一致性分值均比较高,但LEPR mRNA区序列一致性比内含子高,基于LEPR mRNA序列构建的系统发育树更符合实际情况,且可靠性值更高。结果表明,绵羊LEPR基因的保守性较强,突变形式主要是转换,A279G和A1683G可能是突变热点。     

猪PNRC2基因的电子克隆和验证

为了研究猪PNRC2基因的电子克隆,试验通过抑制差减杂交获得了猪PNRC2基因的EST序列,利用生物信息学方法进行电子克隆,并设计引物,采用RT-PCR方法扩增出猪PNRC2基因cDNA序列,将其连接到pMD-19T载体上并转化DH5α后测序,得到猪PNRC2基因序列(GenBank登录号为GQ913658)。结果表明:PNRC2基因cDNA大小为750 bp,最大开放式阅读框(ORF)位于68～487位,编码139个氨基酸,其中脯氨酸占8.6%;猪PNRC2基因的氨基酸序列与牛、人、小鼠和大鼠的相似性分别为97%、94%、82%、82%,其中重要的SH3结合域和NR盒状序列与四者完全一致,其蛋白质预测分子式为C687H1081N207O207S4,属于不稳定蛋白。     

胚胎移植在绵羊生产中的应用

1 受体羊的选择及饲养管理 在胚胎移植中,接受胚胎移植的个体称为受体。胚胎着床、发育与对受体羊的选择及饲养管理有关。 在胚胎移植中对受体的要求主要是健康状况和繁殖性能,对品种和生产一般不做要求。条件好的地方最好选择3-6岁可繁母羊作为受体。年老体弱,有繁殖障碍的母羊,都不宜入选。     

神经肽S及其受体在猪免疫器官中的表达及分布

本研究采用半定量RT-PCR方法,对神经肽S(NPS)及其受体(NPSR)mRNA在猪免疫器官中的表达水平进行检测。结果表明,NPSmRNA在胸腺、脾、空肠淋巴结和软腭扁桃体中均有表达,且在脾和胸腺中的表达水平较高;NPSR mRNA在脾脏的表达水平最高。进一步利用免疫组织化学法对NPS在猪免疫器官中的分布定位进行了研究,在猪脾脏和空肠淋巴结均有NPS免疫阳性细胞分布,但在软腭扁桃体和胸腺中未见NPS免疫阳性细胞。再进行免疫接种猪传染性胃肠炎疫苗,运用半定量RT-PCR技术检测免疫接种后不同时间(3、7、14 d)NPS及其受体mRNA在猪免疫器官中表达水平的变化规律。结果表明,NPS mRNA和NPSR mRNA在胸腺、脾、淋巴结和扁桃体中均有表达,且在一定时间范围内呈现先升高后下降的变化规律,但对照组无明显的升高和下降现象。上述结果提示,猪NPS可能参与免疫功能的调节。