植物乳杆菌Uvs44酪氨酸脱羧酶基因的克隆与序列分析

酪氨酸脱羧酶与发酵食品中酪胺的产生密切相关。根据GeneBank中乳酸菌酪氨酸脱羧酶基因序列设计一对特异性引物,采用PCR扩增的方法克隆并测定了植物乳杆菌Uvs44酪氨酸脱羧酶的核苷酸序列。结果表明：克隆的酪氨酸脱羧酶基因大小为744 bp,与目前已知的四株乳酸菌酪氨酸脱羧酶基因的核苷酸序列比对结果表明：植物乳杆菌Uvs44与Lactobacillus brevis IOEB 9809的亲缘关系最近,为98.3%,与Enterococcus hirae 158的亲缘关系最远,为78.8%,不同乳酸菌的酪氨酸脱羧酶基因之间存在普遍的序列相似性,可为进一步构建酪氨酸脱羧酶基因缺失工程菌奠定基础。     

小麦根腐离蠕孢菌诱导小麦β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆及其表达

为了明确小麦受小麦根腐离蠕孢侵染后β-1,3-葡聚糖酶基因的表达情况,采用RT-PCR方法在受小麦根腐离蠕孢菌侵染后的小麦叶片中扩增β-1,3-葡聚糖酶基因,然后对侵染后的小麦叶片总RNA进行Northern斑点杂交。结果表明,克隆到了β-1,3-葡聚糖酶基因,该基因在小麦被侵染12 h时开始表达,在48 h后未见表达。对照中未见表达。可推断出此β-1,3-葡聚糖酶基因是被小麦根腐离蠕孢菌（Bipolaris sorokinianum）侵染后诱导表达的。     

植物生长延缓剂多效唑和烯效唑对紫羊茅生长的影响

[目的]推动我国北方高质量草坪的建立。[方法]用不同浓度多效唑PP333（100、200、350 mg/L）和烯效唑S3307（16、32、64 mg/L）对冷季型草坪草紫羊茅进行叶面喷施,以喷清水为对照,研究不同处理对紫羊茅生长及叶绿素含量的影响。[结果]PP333对紫羊茅高生长的抑制作用随喷施剂量的增加而增强,喷药60 d后,3个处理对紫羊茅高生长的抑制率分别为53%、62%和64%;喷药60 d后,对照株高增长24.53 cm,不同浓度S3307处理紫羊茅株高分别增长13.05、11.60、13.68 cm;浓度大于200 mg/L的PP333对紫羊茅的矮化效果较明显,200 mg/LPP333与16 mg/LS3307可显著提高紫羊茅的叶绿素含量。[结论]PP333对紫羊茅的矮化作用强于S3307。     

草菇gpd启动子的克隆及表达载体的构建

从草菇基因组中克隆内源强启动子,为草菇基因工程育种提供启动子元件材料。［方法］采用PCR技术从草菇基因组DNA中克隆gpd启动子片段,利用生物信息学手段对其序列特征和调控元件进行分析,并构建表达载体。［结果］从草菇基因组中克隆出2条特异gpd启动子片段,大小分别为1056和614bp;成功构建了分别以这2条启动子片段驱动的、以gfp基因为报告基因的2个表达载体。［结论］该研究为进一步利用基因工程手段培育品质优良的草菇新菌株奠定了基础。     

珍贵阔叶树种多树种混交造林生长比较研究

为系统总结珍贵阔叶树种多树种混交造林技术,本试验对2种立地条件下的多树种混交林的生长情况进行了对比研究,结果表明：（1）珍贵树种多树种混交模式在立地条件较好的苗圃地生长相对较好,其中柚木（Tectonagrandis）的树高、胸径生长量均达到显著水平,降香黄檀（Dalbergiaodorifera）、观光木（Tsoongio?dendronodorum）以及红锥（Castanopsishystrix）则无显著差异,且林分总体材积蓄积量无显著差异,表明珍贵树种多树种混交模式在试验中两种立地条件下均能够表现出较好的适应性。（2）采用综合权重分析法评价树种的速生效果结果表明,以观光木速生效果较佳,按速生效果从高到低排序为：观光木＞柚木＞灰木莲（Man?glietiaglanca）＞红锥＞降香黄檀＞格木（Erythrophleumfordii）。     

中国美利奴成母羊促甲状腺激素受体基因的克隆与组织表达

[目的]探讨绵羊TSHR基因序列及组织表达特征,为进一步研究TSHR在绵羊季节性繁殖中作用的分子机理奠定基础.[方法]利用RT-PCR技术克隆绵羊TSHR基因,并对序列进行生物信息学分析;采用半定量RT-PCR技术检测TSHR在绵羊不同组织的表达情况.[结果]以中国美利奴羊卵巢组织cDNA为模板,获得了3 276 bp的TSHR cDNA序列,包括全部编码区序列(Coding Sequence,CDS)长2 295 bp,编码764个氨基酸.TSHR蛋白结构经预测发现存在多个磷酸化位点和蛋白激酶C磷酸化位点.半定量RT-PCR结果显示,绵羊TSHR基因在所检测组织中均有表达,其中在下丘脑、松果体和垂体中呈高丰度表达,在甲状腺、子宫等组织呈中等丰度表达.[结论]从绵羊卵巢组织中克隆到TSHR基因并进行了序列分析;TSHR基因在绵羊各组织中广谱表达,但在下丘脑、松果体、垂体、甲状腺中表达水平较高,提示TSHR在绵羊季节性繁殖等重要生理活动的神经内分泌调节过程中发挥重要作用.     

欧美杨PdPP2C基因的克隆与功能分析

欧美杨是中纬度地区最适合的短轮伐期工业用材集约经营树种之一,然而盐渍、干旱和低温严重影响了欧美杨的生长发育和产量。本文利用RT-PCR等技术克隆出欧美杨PP2C基因并进行了序列分析。PdPP2C基因开放阅读框为1 320 bp,编码439个氨基酸。蛋白质序列分析表明,PP2C蛋白N端保守性不强,C端有保守的蛋白磷酸酶区域。荧光定量PCR分析表明,该基因在欧美杨根、成熟叶、顶端叶和茎中都有表达且根中表达量最高。逆境胁迫分析表明,该基因受NaCl、ABA和干旱等诱导表达。干旱和盐胁迫处理下转PdPP2C基因拟南芥与野生型相比生长受到较少抑制,且叶绿素含量上升,丙二醛含量下降,表明PdPP2C基因作为一种蛋白磷酸酶提高了拟南芥的抗逆性。      

四川和黄淮生态区小麦品种(系)主要产量性状比较

采用来自四川和河南两地区的主栽小麦(Triticum aestivum Linn.)品种和2012年两地部分区试小麦品系共27个材料,在河南辉县地区种植,随机区组法2次重复,生长期间和收获后调查产量结构性状,研究南方和北方生态区小麦品种产量构成的差异.比较分析结果表明:①四川品种在北方种植,其产量明显低于北方品种;②四川品种的穗粒数高于北方品种,但穗数和粒重低于北方品种;③北方的多穗型品种在北方生态区种植易获得高产,大穗型品种在产量结构合理的条件下也能获得较高产量;④单位面积穗数是北方冬麦区构成小麦产量的第一因素;⑤大穗型品种播量对单位面积穗数调节效果不明显.上述结果说明,不同类型生态区小麦最佳产量结构差异较大,北方品种高产主导因素是单位面积穗数,南方品种优势倾向于穗粒数.     

重钻井液快速混配自动控制系统研制

在加重钻井液快速混配装置的基础上,研制了一套自动控制混浆系统,用以弥补人为目测调节浆体密度过程中因迟滞与误判造成的误差。该系统以PID经典控制为核心,采集混合后的加重钻井液密度和液位,与设定的目标密度与液位进行对比,根据趋势自动调节输入口下灰量阈值,以实现加重浆混配密度的自动调配。配备了该套混浆自动控制的装置经过现场工业的实际试测,所配制的浆体密度均匀,比例统一,混合程度高,粘稠度完全达到钻井加重工艺的需要。并且该自动控制装置工作持久稳定,控制精度高,响应即时,对密度变化的趋势判断准确,稳态误差小,抗干扰能力较强,无需人员值守,保证了作业的连续性。由于成本低廉,装配简易,其控制理论与数据在石油钻采,固井混浆中有着广泛的推行空间,可以衍生很多自动混配设备,该装置为石油行业中各种工况混配系统奠定了标准性基础。