单核细胞增生李斯特菌精氨酸脱亚胺酶基因的克隆及原核表达

精氨酸脱亚胺酶(ADI)可能介导单核细胞增生李斯特菌抗酸应激,由arcA基因编码。利用分子克隆技术从单核细胞增生李斯特菌10403S扩增得到ADI基因,测序正确后将其插入pET30a表达载体中,构建该基因的原核表达质粒pET30a-ADI,并转化入大肠埃希菌Rosetta中进行诱导表达。核苷酸序列分析显示,ADI基因的完整开放阅读框为1 233 bp,编码410个氨基酸。SDS-PAGE表明:该基因在大肠埃希菌中成功表达,重组蛋白的分子质量约为52.5 ku。为进一步研究精氨酸脱亚胺酶的活性提供了条件,同时也为探索单核细胞增生李斯特菌抗酸应激的机理奠定了重要的基础。     

鸡李氏杆菌病的诊断和防控

重点对鸡李氏杆菌病的病原、流行病学及临床诊断等方面进行分析,并从搞好环境卫生的角度对鸡李氏杆菌病的防控作了简单介绍.     

恶性肿瘤患者检测外周血淋巴细胞TfR的临床意义

恶性肿瘤患者检测外周血淋巴细胞ＴｆＲ的临床意义万军梅，王志坚，张锐发，刘琏（深圳市血液病研究所，深圳５１８０２９）文献报道［１］淋巴细胞受丝裂原激活后，在增殖过程中表达ＴｆＲ，并且ＴｆＲ表达量与淋巴细胞的增殖相关。目前ＴｆＲ检测在临床上的应用少见报道...     

单核细胞增生李斯特菌SigB蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备

为制备单核细胞增生李斯特菌SigB蛋白及其多克隆抗体,采用PCR方法扩增参考菌株10403S的sigB基因片段,并克隆至原核表达载体pET-30a构建重组质粒,测序验证后转化至大肠杆菌Rosseta(DE3)感受态细胞进行原核表达,利用Ni-NTA亲和层析纯化SigB蛋白,通过免疫兔体获得多克隆抗体.结果表明:成功构建...     

不同重悬细胞法在洗涤过程中对水牛外周血单个核细胞活率的影响

为了探讨在离心洗涤水牛外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell, PBMC）过程中以移液器吹打法和晃动离心管法重悬细胞对其活率的影响。对经密度梯度离心后初步收集到的PBMC,分别用移液器吹打和晃动离心管2种方法重悬细胞,离心洗涤后对细胞活率进行计数。结果发现,移液器吹打法得到的细胞活率为（74.9±2.6）%,而晃动离心管法使细胞活率达到（98.5±0.5）%,差异极显著（P<0.01）。说明在洗涤PBMC时,晃动离心管法重悬细胞能大大提高细胞活率,可为那些对细胞活率要求高的试验提供一个较为有效的方法。     

美洲大蠊对低免疫力小鼠免疫功能的影响

用环磷酰胺造低免疫力小鼠模型,再分别用低、中、高剂量的美洲大蠊粉给小鼠灌胃,研究虫粉对小鼠吞噬细胞的吞噬指数、血清溶血素含量、外周血CD4/CD8和免疫器官指数的影响,结果表明,高剂量虫粉组的血清溶血素含量和外周血CD4/CD8与模型对照组相比均有显著提高(P<0.05),中、高剂量虫粉组吞噬细胞的吞噬指数比模型对照组显著提高(P<0.05),说明美洲大蠊虫粉能提高低免疫力小鼠的免疫功能.     

禽呼肠病毒感染对SPF鸡外周血T细胞亚型变化和细胞因子转录的影响

为探讨禽呼肠病毒(ARV)对SPF鸡外周血淋巴细胞中CD4+、CD8+T细胞数量变化和细胞因子mRNA转录水平的影响,利用流式细胞术和实时荧光定量PCR方法分别测定了ARV感染后1、7、14、21、28、35d感染组和对照组SPF鸡外周血淋巴细胞中CD4+、CD8+T细胞含量和细胞因子IL-1β、IL-6、IL-17、IL-18、IFN-γ、TNF-α基因mRNA相对转录时相。流式细胞术检测结果表明,SPF鸡感染ARV后7d和14dCD4+、CD8+T细胞比值高于对照组,其中感染7d,CD8+T细胞含量差异显著(P0.05);感染后1、21、28、35d感染组CD4+、CD8+T细胞比值均低于对照组,感染1d后CD4+、CD8+T细胞含量均差异显著(P0.05),说明外周血T细胞亚型变化是ARV感染的重要表现之一。实时荧光定量PCR结果表明,与对照组相比,感染组外周血淋巴细胞中IL-1β、IL-6(除7d外)、IL-18(除14d外)和TNF-α在整个感染过程中表达上调,IL-17和IFN-γ除感染1d外,均表达下调,说明IL-1β、IL-6、IL-17、IL-18、IFN-γ和TNF-α均参与了ARV的感染进程。     

饲料引起育肥牛李氏杆菌病的诊治报告

李氏杆菌病是由单核细胞增多性李氏杆菌所引起的一种人畜共患的散发性传染病。李氏杆菌广泛分布于土壤、植物和水中,对外界环境有较强的抵抗力,在青贮料、干草及土壤中能长期存活,在粪便中可存活2年以上,在食品及植物屑片中可存活几个月,在干酪中可存活1年以上,还能在冰箱中贮藏的肉、蛋、食品中生存或生长。     

单核细胞增多性李氏杆菌人工感染绵羊试验

将人从病羊脑分离纯化的单核细胞增多性李氏杆菌经列脉接种于健康得奴绵羊３只,结果被感染绵羊均表现出与自然感染绵羊相同的临床症状和病理变化,并从脑、心血、淋巴结中回收到了单核细胞增钨生李氏杆菌,从而证明了该分离株单核细胞增多性李氏杆菌具有较强的致病性。     

非小细胞肺癌胸腔镜根治性切除术后早期炎症反应和营养状况对其预后的影响

目的 探讨胸腔镜根治性切除术后早期炎症反应和营养状况对非小细胞肺癌(NSCLC)患者预后的影响。方法 回顾性分析120例胸腔镜根治切除术后NSCLC患者的临床资料。根据相应标准,分为mGPS 0分、1分及2分组,OPNI、NLR、MLR和PLR高分组与低分组。采用Kaplan-Meier法及Log-rank检验进行生存分析,并采用单因素和多因素Cox回归模型分析预后影响因素,探讨OPNI评分与NLR、MLR和PLR的相关性。结果 mGPS 0、1及2分组3年OS分别为83.3%、83.3%、58.3%(P=0.011),3年PFS分别为73.7%、50.0%、50.0%(P=0.029)。PLR低分组和高分组3年OS分别为86.4%、70.0%(P=0.018),差异有统计学意义;PLR低分组和高分组3年PFS分别为73.2%、60.0%(P=0.136),差异无统计学意义。OPNI低分组和高分组3年OS分别为73.3%、83.2%(P=0.181),3年PFS分别为58.6%、74.1%(P=0.119),差异无统计学意义。NLR低分组和高分组3年OS分别为83.3%、73.2%(P...