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《畜牧与兽医》2017,(6):120-124
为制备检测新城疫病毒的实时荧光RT-PCR病毒样颗粒内标,扩增MS2噬菌体的成熟酶蛋白和衣壳蛋白序列,将其定向插入pET32a载体的相应位置,双酶切和PCR鉴定,构建pET32a-MS2重组质粒;根据新城疫病毒实时荧光RT-PCR检测的目标片段,采用化学合成和klenow酶连接技术制备内标片段,将内标片段插入pET32a-MS2重组质粒,构建pET32a-MS2-IC重组质粒,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,经RNase和DNase消化后,采用荧光RT-PCR检测耐核糖核酸酶病毒样颗粒内标的含量。结果表明,制备了高表达量耐核糖核酸酶病毒样颗粒内标,可用于新城疫病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立。 相似文献
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6株牛传染性鼻气管炎病毒BICP4基因序列的同源性分析 总被引:1,自引:0,他引:1
牛传染性鼻气管炎病毒的立即早期启动基因IER4.2编码感染细胞蛋白BICP4基因。各种疱疹病毒的BICP4基因的Ⅰ,Ⅲ,Ⅴ区变异性较大,并为其特征区。为了比较分离自不同牛种,不同部位的5种病毒株BICP4蛋白I区基因的差异性,本文根据已发表的IBBV K22毒株重复序列IRs中BICP4的基因序列设计了一特异性引物,对各毒株进行PCR扩增,均得到约540bp的片段,将其克隆,测序并连同K22株进行同源性比较。结果表明,6株病毒的核苷酸序列及氨基酸序列同源性均在98%以上,说明这些毒株重复序列中的早期基因高度保守,在一定程度上也显示出IBRV的高度保守性。 相似文献
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我县经济开发公司畜牧水产分公司肉鸭场,于4月27日进栏樱桃谷雏鸭1750只,养至5月18日,整群仔鸭上喙部出现特征性的萎缩、变形、喙边缘呈波浪状,严重的上翻。5月20日开始出现死亡,24日死亡数达到高峰,最多的一天死亡108羽,最少也有8羽,至6月6日止,总数达1034羽,死亡率达59.09%。癌状:病初病鸭鼻流水涕,继而上喙皮肤糜烂、结痂、剥离痂皮呈现溃疡面,三天以后喙便出现萎缩、变形、上翻,上喙边缘不整,呈波浪状,喙色变白,采食困难,眼流泪,眼睑周围有象戴眼镜似的黄色粘结羽 相似文献
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聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定禽呼肠孤病毒 总被引:1,自引:0,他引:1
从感染禽呼肠孤病毒的细胞中,以SDS和酚提取病毒核酸,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)法将分节段的核酸分开,经银染色显示,呈3-3-1-3分布,此法可用于禽呼肠孤病毒的快速检测、鉴定。同样方法未能使传染性法氏囊病毒核酸显示。 相似文献
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