猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

为体外表达猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）糖基化囊膜蛋白GP5,以及制备其多克隆抗体,以PRRSV PC疫苗株RNA为模板,应用RT-PCR扩增GP5基因,并克隆至原核表达载体pET-32a（+）,构建重组表达载体pET-32a-GP5。经过酶切和测序鉴定后,将阳性重组质粒转化到大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞中,加入IPTG低温诱导表达。使用亲和层析法纯化PRRSV GP5蛋白。然后将纯化的蛋白免疫北京大耳白兔制备多克隆抗体,并进行酶联免疫吸附试验（ELISA）和间接免疫荧光分析（IFA）。结果显示,表达的PRRSV GP5原核蛋白以可溶性和包涵体两种形式存在,相对分子质量大约30 kDa;制备的GP5蛋白多克隆抗体ELISA效价可达1:64 000;IFA检测显示,制备的多克隆抗体能够识别PRRSV。重组PRRSV GP5蛋白及其多克隆抗体的成功制备为PRRSV血清学检测方法的建立提供了良好的生物学材料。     

猪繁殖呼吸综合症的诊治

1999年10月下旬,我市某猪场,由于引进种母猪,加之饲养管理条件较差,造成少数种母猪及仔猪发生繁殖呼吸综合症. 该病使母猪发生以繁殖障碍和呼吸系统症状为主要特征.笔者经过近2个月的现场调查处理,采取有效的防治措施使该病得到有效的控制.     

一个储存周期内罐存食用植物油损耗原因构成观察及应对措施探讨

现行《粮油仓储管理办法》规范食用油脂的储存周期为二年,但其中仅对食用油脂储存损耗进行了定性,而未定量。2010年10月中储粮襄阳油库竣工投入试运营,按单罐设计容量的75%分别逐罐装入中央储备油(四级菜籽油)进行装油压罐;2012年10月,完成一个储存周期后轮换出库,储存时间24     

牛感冒的中医辩证施治

感冒是牛的常见病,中兽医亦称为伤风。临床上有表热型、表寒型和半表半里型之分,在诊断和治疗时应注意加以区别,才能收到理想的效果。一、风热感冒(表热型):主要因外感风邪、热邪引起,一年四季均可发生。主要症状:体温突然升高达39～40℃,呼吸加快,呼气粗,有热感,肺泡呼吸音粗厉,有的可以听到干啰音。心     

浅析如何建设节约型煤炭企业

建设节约型企业,既是建设节约型社会的一个重要组成部分,也是解决企业生存和实现可持续发展的迫切需要,既是落实科学发展观,走新型工业化道路的有效途径,也是提高企业经济效益,转变经济增长方式,实现资源有效利用,促进人与自然和谐发展,实现全面建设小康社会目标的必由之路。而煤炭企业的产品属非可再生资源,其资     

猪气喘病的诊断与防控

猪气喘病是由猪肺炎支原体引起的一种接触性、慢性、消耗性呼吸道传染病其特征是体温及食欲变化不大,有明显的气喘。咳嗽、腹式呼吸,生长发育迟缓,饲料报酬低。病理特征是肺脏呈现双侧对称性实变。本     

犬寄生虫病的诊断与治疗

寄生虫疾病是犬常见的消耗性疾病,甚至可以引起死亡。它有一定的潜伏期,发病初期很少看到临床症状,往往被饲养者忽视。以下介绍几种常见的犬寄生虫病的诊断与治疗方法。1疥螨病犬疥螨病是由疥螨虫引起的犬的一种慢性寄生性皮肤病。俗称癫皮病。特征:犬表现为剧痒不安、被毛脱     

PCV-2 ORF2和PRRSV GP5双基因共表达重组腺病毒的构建及小鼠免疫试验

为构建猪圆环病毒2型(PCV-2)ORF2和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) GP5双基因共表达重组腺病毒,将扩增的ORF2基因和GP5基因通过IRES元件串联,构建重组腺病毒穿梭质粒.然后用Pme Ⅰ酶切穿梭质粒,使其线性化,将线性化质粒转化pAdeasy-1的BJ5183感受态细胞,同源重组后筛选重组腺病毒质粒,经Pac Ⅰ酶切后转染293A细胞进行包装,获得重组腺病毒.PCR鉴定表明重组腺病毒含有ORF2和GP5基因,Western blot检测结果表明ORF2基因和GP5基因在293A细胞内获得表达.重组腺病毒经293A细胞连续传30代,TCID50稳定为10-9.0/mL.初步动物免疫试验结果表明,该重组腺病毒能够刺激机体分别产生PCV-2和PRRSV的特异性抗体免疫应答反应.该重组腺病毒可以作为PCV-2与PRRSV二联基因工程疫苗研究的候选毒株.     

最新国内外猪繁殖与呼吸综合征报道

1996年,中国被证实中国大陆存在猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）的流行,之后在全国大部分省市都有报道,其成为中国猪病中的重要疾病之一。2006年秋季,我国南方部分地区暴发猪“高热病”,     

猪蓝耳病免疫抗体检测及其免疫效果分析

为切实了解遂宁市安居区农村散养生猪的蓝耳病免疫效果,本试验随机抽取了176份生猪血清,用酶联免疫吸附试验检测PRRS免疫抗体.结果显示:所有样品血清的蓝耳病免疫抗体合格率仅为70.45％,说明部分散养户家的猪蓝耳病免疫效果不够理想,还需进一步采取切实有效的措施,提高猪只的有效免疫率.